糖原染色試劑盒,。含乙二醇基的多糖經(jīng)過(guò)碘酸氧化,,產(chǎn)生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無(wú)色品紅結(jié)合,,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應(yīng)稱為碘酸-雪夫(PAS)反應(yīng),。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,,冷卻60℃時(shí)過(guò)濾,加1mmol/L鹽酸20ml,,再冷卻至25℃左右,,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,,置暗處24h,,無(wú)色即可放冰箱中保存,呈微紅色,,則加活性炭1~2g,,吸附過(guò)濾使成無(wú)色液體,放冰箱中保存,。若溶液變紅,,即不能再用。(2)10g/L過(guò)碘酸水溶液:過(guò)碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml,。細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究。天津如何使用糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)
糖原染色在使用過(guò)程中需要注意以下幾個(gè)方面:盡可能選取小塊新鮮組織及時(shí)固定,。糖原易溶于水,,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,更易溶于水,,固定之前決不能用水或生理鹽水等浸洗,。應(yīng)避免用水溶性固定液,宜采用酒精性固定液,,如Carnoy液,,能較好地保存糖原,但有使糖原流動(dòng)到細(xì)胞一側(cè)的現(xiàn)象,,多數(shù)人認(rèn)為是由于固定劑把細(xì)胞內(nèi)的糖原推向固定劑對(duì)組織浸透的方向而造成,。其他組織應(yīng)用中性福爾馬林固定為佳,。組織在4℃左右溫度內(nèi)固定與保存,是針對(duì)糖的性質(zhì)和避免糖原溶于水而采取的相應(yīng)措施,。乙醇能沉淀白蛋白,、球蛋白,亦能**白和糖原沉淀,,但仍可溶于水,,因此較好不單獨(dú)使用乙醇固定,以乙醇為溶劑的混合固定液固定為佳哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒哪家便宜擁有千錘百煉的專業(yè)人才隊(duì)伍,,保證實(shí)驗(yàn)快速,、有效的完成。
可以通過(guò)pas染色計(jì)算糖原含量嗎:PAS染色又稱過(guò)碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用來(lái)顯示糖元和其它多糖物質(zhì).具體現(xiàn)象例舉:陽(yáng)性反應(yīng),胞漿呈紅色,陰性反應(yīng),胞漿呈無(wú)色,;在正常血片中RBC不染色,;PLT染成深紅色;中性粒細(xì)胞胞漿染成紅色或深紅色,有些細(xì)胞有陽(yáng)性顆粒,;單核細(xì)胞的胞漿染成淡紅色,可含有細(xì)小或粗大陽(yáng)性顆粒,;少數(shù)淋巴細(xì)胞的胞漿內(nèi)含有少許小的淡紅色或紅色顆粒;正常骨髓的幼稚細(xì)胞和有核RBC都不染色,;巨核細(xì)胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色.巨核細(xì)胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色.顏色深淺與濃度相關(guān),。
糖原D-PAS染色液:使用方法:1、兩張相同切片,,二甲苯脫蠟,,梯度乙醇入水。2,、一張切片入37℃淀粉酶溶液處理1h,。另一張不用淀粉酶溶液處理,入水中1h作為對(duì)照,。3,、流水沖洗兩張切片各5~10min。4,、入過(guò)碘酸溶液,,室溫放置5~8min,一般不宜超過(guò)10min,。5,、自來(lái)水沖洗1次,再用蒸餾水浸洗2次,。6、入SchiffReagent,,置于室溫陰暗處浸染10~20min,。7,、自來(lái)水沖洗10min。8,、入Mayer蘇木素染色液,,染細(xì)胞核1~2min。9,、(可選)酸性乙醇分化液分化2~5s,。10、自來(lái)水沖洗10~15min,,更換蒸餾水清洗使其返藍(lán),。11、二甲苯透明,,中性樹(shù)膠封固,。可以選用真空滲入法來(lái)幫助底物和酶滲入細(xì)胞,。
糖原染色(PAS):(1)原理:過(guò)碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,,生成醛基。醛基與雪夫液中的無(wú)色品紅結(jié)合,,形成紫色化合物,,定位于細(xì)胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,,滴加甲醛固定液固定10分鐘,,流水沖洗,晾干,。滴加過(guò)碘酸溶液作用20分鐘,,流水沖洗,晾干,。滴加雪夫液作用60分鐘,,流水沖洗,晾干,。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,,流水沖洗,晾干鏡檢,。(4)臨床意義:根據(jù)染色陽(yáng)性程度和陽(yáng)性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細(xì)胞白血病和急性非淋巴細(xì)胞白血病鑒別,,還有助于紅白血病與巨幼細(xì)胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷腺泡狀軟組織肉瘤與化感瘤:前者棒狀小體糖原染色為陽(yáng)性。天津如何使用糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)
將動(dòng)物殺死后迅速取出所需要的組織,。天津如何使用糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)
染色流程相對(duì)簡(jiǎn)便,、染液易配制的染色方法;選擇染色流程簡(jiǎn)便的方法,,無(wú)論對(duì)于量較多的整批次染色,,還是較少量的染色均能夠節(jié)省時(shí)間,、更為便捷。選擇染液易配制的方法,,對(duì)自配染液(尤其是保存較短的染液)是較為重要的選擇,,不容易造成因染液配制問(wèn)題而影響染色結(jié)果。如顯示彈性纖維,。醛品紅染色法無(wú)論是從染色流程,,還是染液配制都要比鐵蘇木精、間苯二酚堿性品紅等染色方法要簡(jiǎn)單方便,、省時(shí),,同時(shí)陽(yáng)性著染對(duì)比度也很明顯。特異性高,、傳統(tǒng)或經(jīng)典的染色方法,;特異、傳統(tǒng)/經(jīng)典的一些染色法在特殊染色方法的選擇中往往作為選擇,。如顯示淀粉樣物質(zhì),。天津如何使用糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)
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