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來源: 發(fā)布時間:2023-09-13

外泌體相關miRNA與肺病的診斷:miRNAs是一類含有20~25個核苷酸的非編碼小RNA,能夠通過下調(diào)或壓制靶mRNAs來調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄水平上的基因表達,,目前非編碼RNA被普遍發(fā)現(xiàn)存在于NSCLC患者外泌體中,,參與一些病癥的形成和演化過程。單個miRNA可能通過壓制性復合物與多個mRNA結合,,從而阻滯整個生物通路,。因此,外泌體的miRNA具有成為NSCLC標志物的優(yōu)勢,。Chen等在152例肺病患者的研究中初次報道了循環(huán)游離miRNA的表達,,與75例健康者相比,發(fā)現(xiàn)了兩種高表達的miRNA(miR-25和miR-223),。Rabinonowits等對27例肺病患者和9例健康人的血漿外泌體中12個miRNA的表達進行了評估,,結果顯示,12個一些病癥相關的miRNA*在肺病患者中過度表達,。Cazzoli等收集了30個血漿樣本,,發(fā)現(xiàn)4種外泌體miRNA(miR-378a、-379a,、-139-5p,、-200b-5p)在肺病患者血清中明顯升高,用于篩查患者與健康人ROC曲線下面積(AUC)為0.908,。離心除去細胞器,,留取上清。外泌體提純試劑盒的特色與優(yōu)勢:純化和富集的完整血漿/血清,,尿液和細胞培養(yǎng)基中外泌體可用于功能研究,。鄭州外泌體提取試劑推薦廠家

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外泌體(exosomes)是活細胞經(jīng)過"內(nèi)吞-融合-外排"等一系列調(diào)控過程而形成的膜性囊泡,,來源于晚期核內(nèi)體(也稱為多囊泡體),直徑約為30-150nm,,密度在1.13-1.21g/ml,,天然存在于血液、唾液,、尿液及母乳等體液中,,同時外泌體也存在于組織和細胞間隙中。人體中幾乎所有類型的細胞均能產(chǎn)生外泌體,,人體中大約有1014個外泌體,,大約平均每個細胞產(chǎn)生1000-10000個。外泌體中含有核酸(DNA,、miRNA,、lncRNA、mRNA,、tRF等),、蛋白和脂類,在細胞間物質(zhì)和信息轉(zhuǎn)導中發(fā)揮重要作用,,研究表明其在干細胞,、免疫調(diào)控、瘤轉(zhuǎn)移,、血管生成以及生物標志物等領域都發(fā)揮著不可替代的作用,。金華正規(guī)外泌體提取試劑直銷廠家外泌體的提取分離:密度梯度離心。

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CD47是信號調(diào)節(jié)蛋白α(SIRPα,,也稱為CD172a)的配體,,CD47-SIRPα間的結合能夠發(fā)出“不要吃我”的信號,從而壓制吞噬作用,。病基因RAS能夠促進胰腺病細胞增殖,,增強胞飲作用從而促進一些病癥細胞攝取外泌體。合成納米顆粒對細胞有一定毒性作用,,但使用外泌體能夠較小化對細胞的毒性,。研究人員發(fā)現(xiàn),CD47和病基因KRAS驅(qū)動的胞飲作用都會壓制外泌體被循環(huán)系統(tǒng)的清理,,并增強胰腺病細胞對外泌體的特異性,。所以,外泌體的這種特性增強了它們通過遞送RNAi來特異性靶向胰腺病中的KRAS的能力,,并且使用外泌體作為單一靶向劑顯著改善了所有實驗PDAC小鼠模型的總生存期,。

外泌體提取:尺寸排阻色譜。尺寸排阻色譜(Size-exclusionchromatography,,SEC)是基于大小而非分子量實現(xiàn)分離大分子,。該技術應用填充多孔聚合物微球的柱子,分子根據(jù)其直徑通過微球,,半徑小的分子需要更長的時間才能通過色譜柱的孔隙遷移,,而大分子則從色譜柱中更早地洗脫。尺寸排阻色譜可以精確分離大小分子,。此外,,可以將不同的洗脫溶液應用于該方法。與離心方法相比,,色譜分離已被證明具有更多優(yōu)勢,,因為通過色譜分離的外泌體不受剪切力的影響,這可能會改變囊泡的結構,。目前,SEC是一種普遍接受的分離血液和尿液中外泌體的技術,。不過,,該方法耗時較長,不適合大量樣本處理如純度和回收率低,,雜蛋白較多(假陽性),,顆粒大小不均一,產(chǎn)生難以去除的聚合物,。

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外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體,,可通過細胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體,內(nèi)涵體與細胞膜融合后釋放其中的小囊泡,。外泌體的直徑在40-110nm之間,,其中包含RNA、蛋白質(zhì),、microRNA,、DN**段等多種物質(zhì),存在于血液,、唾液,、尿液、腦脊液和母乳等多種體液中,。外泌體從發(fā)現(xiàn)至今已有30多年的歷史,,雖然較初被認為可能是細胞的“垃圾”,所以才被排出來,,但是近年來研究表明外泌體具有功能活性并可進行細胞間信息傳遞,。如今,研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體在抗原提呈細胞中呈遞抗原程中、一些病癥細胞發(fā)生的發(fā)展,、神經(jīng)細胞信號轉(zhuǎn)導過程中都發(fā)揮著重要作用,。專利申請利用分離培養(yǎng)人尿液來源細胞并收集培養(yǎng)基來進行體外培養(yǎng)。外泌體提?。簶悠分写蠓肿硬荒苓M入凝膠孔,,只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過色譜柱,被流動相洗脫出來,。杭州外泌體提取試劑進貨價

同時對超速離心機的設備要求以及操作程序的培訓較大提高了提取成本,。鄭州外泌體提取試劑推薦廠家

外泌體(exosome),特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡,。其主要來源于細胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。現(xiàn)已證實可以分泌外泌體的細胞有:肥大細胞,、淋巴細胞,、樹突狀細胞、瘤細胞,、間充質(zhì)干細胞等,。外泌體在免疫中抗原呈遞、瘤的生長與遷移,、組織損傷的修復等生理病理上起著重要的作用,。同時,不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,,可作為疾病診斷的生物標志物,。細胞外囊泡是蛋白質(zhì)、mRNA,、miRNA和脂質(zhì)運輸來完成細胞間通訊通路的重要媒介,,根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類,包括外泌體,、微泡和凋亡小體,。其中,外泌體是直徑大約為40-100nm的包裝囊泡,,由多種細胞分泌,,內(nèi)含有特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì),、細胞因子或遺傳物質(zhì),。來源于不同的組織的外泌體不光具有其特異性蛋白分子,而且還包含其行使功能的關鍵分子鄭州外泌體提取試劑推薦廠家