酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型):一,、原理簡介,。改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶,,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物,、蛋白等雜質(zhì)去除,,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫,。二,、試劑盒特點:1,、離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,,可重復(fù)性好,。克服了國產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端,。2,、結(jié)合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好,純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點,,不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題。3,、獨有的RL裂解液配方,,可以有效的消除基因組污染。4,、多次漂洗去蛋白過程,,提取RNA純度更高。5,、有效的去除了無用的5S在總RNA中含量,,提高了純度。rRNA是組成核糖體的組分,,是蛋白質(zhì)合成的工作場所,。南京RNA提取試劑報價
酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型):一,、原理簡介。改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶,,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫,。二、試劑盒特點:1,、離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜,,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好,??朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。2,、結(jié)合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好,,純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點,不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題,。3、獨有的RL裂解液配方,,可以有效的消除基因組污染,。4、多次漂洗去蛋白過程,,提取RNA純度更高,。5、有效的去除了無用的5S在總RNA中含量,,提高了純度~寧波正規(guī)RNA提取試劑植物花總RNA提取試劑盒:特殊的提取緩沖液保證特殊植物材料中的總RNA充分溶解,。
植物RNA提取:植物組織中,,富含酚類化合物,,或富含多糖,或含有某些尚無法確定的次級代謝產(chǎn)物,,或RNase的活性較高,。這些物質(zhì)在細胞裂解后與RNA緊密結(jié)合形成難溶復(fù)合物或者膠狀沉淀,很難將其去除,。所以我們在提取植物組織時,,要選取針對植物的試劑盒,試劑盒里的裂解液能有效解決多酚易氧化,、多糖化合物與核酸分離等難題,。1,、植物的果皮、果肉,、種子、葉片等要在研缽中充分研磨,,研磨過程中液氮要及時補充,,避免樣品融化,研磨后的樣品應(yīng)迅速加入裂解液中震蕩混勻,,避免RNA降解,。2、像水稻及小麥葉片等富含纖維的樣本,,則應(yīng)適當(dāng)減少提取用量,,否則組織研磨及裂解不徹底,會使提取的RNA產(chǎn)量較低,。3,、含水分較多的植物組織例如石榴果實、西瓜果實,、桃子果實等則應(yīng)當(dāng)適當(dāng)提高樣本量(可選100~200mg),。4、植物組織,,如植物葉片,、根莖、堅硬的果實等材料一般建議使用液氮在研缽中徹底研缽成份,,再繼續(xù)進行提取步驟,。常規(guī)的組織勻漿機對植物組織的勻漿效果可能不佳,一般不建議使用,。
植物RNA快速提取試劑盒:1.固體組織破碎設(shè)備,。可用下列裝置之一:1)玻璃勻漿器,。泡酸清潔,,用高壓滅菌蒸餾水洗滌數(shù)次。2)研缽,。適用于液氮凍存組織的研磨,,清洗方法同玻璃勻漿器。3)高速機械勻漿器(Polytron,,Tekmar或類似產(chǎn)品),,打開開關(guān),在蒸餾水中清洗分散器頭數(shù)次,。2.高壓蒸汽30分鐘消毒一次性吸頭離心管,。RNA沉淀溶解之后,,應(yīng)嚴格使用高壓消毒的一次性用品。然而PlantRNAtrip能在RNA酶污染環(huán)境下工作,,在裂解步驟可使用未高壓但潔凈的一次性吸頭和離心管,,但光推薦在緊急情況下這樣做。3.普通雙蒸水,,高壓消毒20分鐘,。用于沖洗器皿,配制瓊脂糖凝膠和電泳用緩沖液,。DEPC處理的雙蒸水,。加DEPC到水中至終濃度為0.01%v/v,室溫過夜,,高壓消毒30分鐘,。用于溶解RNA,配制TE緩沖液和75%乙醇,。4.濕冰,。在冰上進行操作有助于減少RNA降解。5.其它用品,。電泳槽,,雙蒸水沖洗。離心機和加樣器,,無需處理,。6.戴手套。注意某些實驗如提取質(zhì)粒DNA如使用極大量RNA酶,,為防污染,,須較全仔細清洗實驗器具和實驗區(qū)域。植物RNA提取試劑:可從植物組織中快速提取總RNA,,可同時處理大量不同樣品,。
經(jīng)典Trizol法并不能獲得總RNA:這個事實可能會刷不少新手甚至老手的三觀,但確有實驗支持:經(jīng)典Trizol法會選擇性丟失低GC比的miRNA,。這一點,,源自一則作者自撤稿的故事。V.NarryKim是韓國鼎鼎大名的美女科學(xué)家,,專做RNA相關(guān)的研究,,包括miRNA。幾年前她們組發(fā)現(xiàn)一個奇怪的“現(xiàn)象”,,即貼壁細胞在消化之后,,會有一些miRNA的豐度突然降低,看起來好像是被快速“降解”掉了,,并據(jù)此寫了一篇文章發(fā)到MolecularCell上,。但很快她們就發(fā)現(xiàn),,這個“現(xiàn)象”難以重復(fù):如果用Trizol做實驗,就一定是陽性結(jié)果,,而用試劑盒提RNA,,就重復(fù)不出來。難道是號稱能提總RNA的Trizol方案出了問題,?確實如此,。經(jīng)進一步實驗后發(fā)現(xiàn),經(jīng)典的Trizol方案會使得低GC比的miRNA丟失,。RNA提取試劑注意事項:TRIReagent含有毒物質(zhì)苯酚,避免接觸皮膚或吸入,。金華RNA提取試劑產(chǎn)品介紹
血漿/血清中miRNA提取試劑盒:是專門針對血清,、血漿樣本中miRNA提取而開發(fā)的。南京RNA提取試劑報價
RNA提取試劑的選擇:選擇合適的提取試劑是較重要的一步,。好的提取試劑在確保成功的同時,,操作方便且經(jīng)濟實用。對于動物組織,、簡單的植物材料,、各種微生物、培養(yǎng)細胞的totalRNA提取,,Takara公司的RNAisoPlus具有諸多的成功案例,。隨著2013年7月柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTUniversalTotalRNAExtractionKit的成功上市,進一步豐富了TakaraRNA提取的產(chǎn)品線,。該產(chǎn)品采用了獨特的細胞裂解系統(tǒng),,無需苯酚氯仿抽提等步驟,簡單快捷,。組織或細胞裂解后,,提取操作光需20分鐘便可完成。南京RNA提取試劑報價