鼠尾膠原膠凝程序：膠原蛋白I按以下步驟使其pH達到堿性時凝膠,。1）將無菌5cm左右的紗布海綿貼在150mm培養(yǎng)皿的蓋子上來制備氨蒸氣室,。用氫氧化銨使紗布飽和，把蓋子放在150mm的培養(yǎng)皿上，暫放置一邊,。2）將膠原蛋白I均勻涂布在要包被物的表面上，厚度可以根據(jù)需要改變，膠原蛋白I（50-100μL）足以涂覆22mm的蓋玻片。對于直徑100mm的培養(yǎng)皿,，每個加入約6mL;對于60mm培養(yǎng)皿添加約2.3mL，對于35mm培養(yǎng)皿添加約1mL,。3）將涂有膠原蛋白的蓋玻片或帶有蓋子的培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)移到氨蒸氣室并暴露三分鐘,。4）在無菌蒸餾水中（35mm培養(yǎng)皿加5mL，60mm培養(yǎng)皿加10mL等）浸泡涂布的蓋玻片或培養(yǎng)皿30min,。吸取原蒸餾水并加0.5-1.0mL無菌蒸餾水,，放置在層流罩中過夜。5）吸出蒸餾水,，用含血清的平衡鹽緩沖液溶液代替并保存在2-8°C,。鼠尾膠原蛋白的用途很普遍，可用于化妝品,，工業(yè)和食品生產(chǎn)等領(lǐng)域,。青島正規(guī)鼠尾膠原

膠原蛋白的功效與作用：一提起膠原蛋白，女性朋友們眼睛都放光了,，因為我們都知道膠原蛋白被稱為我們皮膚的“軟黃金”,，層中70%都是膠原蛋白，膠原蛋白含量的多少決定克皮膚的年輕程度,！是讓我們皮膚變得有彈性的東西,。大部分只知道需要補充膠原蛋白，但是卻不知道什么時候需要補充膠原蛋白,，總認為自己還年輕不需要補充,，其實這是錯誤的觀念，膠原蛋白在女性20歲的時候就已經(jīng)開始流失了,，含量逐漸下降,，25歲后進入流失的高峰期，40歲時的含量不到80歲的一半,，所以我們應(yīng)該20歲就開始補充膠原蛋白,，以保持皮膚的年輕狀態(tài)。南昌鼠尾膠原哪家便宜鼠尾型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料,。

實驗應(yīng)用：鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細胞中的應(yīng)用,。目的：建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細胞的效果,。結(jié)果：自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細胞,，細胞角蛋白18表達陽性，免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實所培養(yǎng)的細胞具有典型的分泌上皮細胞特征,。結(jié)論：成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細胞的方法,，并且制作簡便,成本低廉。

具體實施方式實施例1止血材料的制備1、選擇能與鼠尾膠原蛋白聯(lián)合發(fā)揮作用的聚乙烯醇,、殼聚糖作為輔料,。各個材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇殼聚糖為0.2%0.2%。余量為水,。2,、將混合材料用無菌水溶解后澆入培養(yǎng)小板，-40°C預(yù)凍池,，再轉(zhuǎn)入_80°C超低溫冰箱急凍4h，再轉(zhuǎn)入真空冷凍干燥機中將復(fù)合材料在-4°C下冷凍干燥10h,，即可以得到復(fù)合型凍干止血材料,。Co60輻射滅菌，干燥保存,。凍干的材料可直接用于各種傷口的止血,。實施例2止血材料的制備1、選擇能與鼠尾膠原蛋白聯(lián)合發(fā)揮作用的聚乙烯醇,、殼聚糖作為輔料,。各個材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇殼聚糖為5%2%1%，余量為水,。2,、將混合材料用無菌水溶解后澆入培養(yǎng)板，-20°C預(yù)凍,，再轉(zhuǎn)入_80°C超低溫冰箱急凍8h,，再轉(zhuǎn)入真空冷凍干燥機中將復(fù)合材料在-4°C下冷凍干燥30h，即可以得到復(fù)合型凍干止血材料,。Co60輻射滅菌,，干燥保存。鼠尾膠原醋酸溶解：在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解,。

簡介：鼠尾I型膠原蛋白（Collagenfromrattail,TypeI）系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備,，純度達到95%以上，可溶于0.006mol/L乙酸,。本品可用于細胞培養(yǎng)皿的包被,，特別適合普通細胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細胞的培養(yǎng)；也可用于制備三維膠原凝膠,，使細胞在模擬的三維環(huán)境中生長,。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：1、SDS-PAGE分析純度大于95%,。2,、無菌檢驗結(jié)果為陰性。3、本品2μg/cm2包被細胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細胞,，貼壁及生長正常,。4、本品濃度1mg/mL,，pH7.0時形成具有一定強度的三維膠原凝膠,，NIH-3T3細胞在三維凝膠內(nèi)生長正常、PC-12細胞在三維凝膠表面生長正常,。從包被表面除去多余的液體,。過夜干燥。青島正規(guī)鼠尾膠原

這種膠原蛋白在37℃的條件下會形成3股螺旋結(jié)構(gòu),，可以用來當(dāng)作細胞培養(yǎng)的基質(zhì),。青島正規(guī)鼠尾膠原

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi),。如果配制中使用的是10PBS,，使用前需要加入適當(dāng)體積的細胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。B．含細胞的三維膠原的制備（以配制200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到（如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)）,，立即混勻。再加入23ul10PBS10培養(yǎng)液,，混勻(混勻后pH左右,，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試),。加入760ul的細胞懸浮液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放20分鐘待膠凝固后,，加入適當(dāng)體積的細胞培養(yǎng)液,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。注意事項：在室溫下pH中性時可迅速成膠,，在操作過程中要盡量保持低溫,。青島正規(guī)鼠尾膠原