一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法:隨著現(xiàn)代醫(yī)學的發(fā)展,各種醫(yī)用耗材的更新?lián)Q代也是日新月異,。止血材料是常見的醫(yī)療器械產(chǎn)品,。但是現(xiàn)今市面上的止血材料不光存在著容易引起傷口傳染的缺點;同時還存在著容易與傷口粘附不易去除,,導致傷口潰爛,,或者因為粘附導致傳染;再次就是止血材料多是通過吸收血液及添加凝血酶等外在因素止血,,很少有止血材料是使用能夠自身具有止血性質(zhì)的材料來生產(chǎn)的?,F(xiàn)今市面上的可吸收止血材料有氧化纖維素、α-氰基丙烯酸酯類組織膠,、醫(yī)用止血明膠等,,但是都有各自的缺點。如氧化纖維素可引起組織周圍PH值升高,;α-氰基丙烯酸酯類組織膠降解過程中釋放出氰和甲醛等有毒物質(zhì),;醫(yī)用止血明膠黏附性較差,易脫落,,因其吸收血液后膨脹可能壓迫傷口周圍組織等,。將無組織纖維,、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,真空冷凍干燥備用,。鼠尾膠原廠家
鼠尾膠原醋酸溶解:1.將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解,。2.建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中,,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%,。不要晃動或攪拌,。在2-8度中放置過夜。在無菌條件下轉移上層的膠原溶液,。我們不建議用過濾的方法無菌化,。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會導致丟失蛋白。3.稀釋一定數(shù)量的膠原溶液,。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶,。在室溫或37度結合數(shù)小時或者2-8度過夜。5.從包被表面除去多余的液體,。過夜干燥,。如果膠原溶液不是無菌的,這時候可以在無菌細胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒,。在接種細胞前用無菌的水漂洗,。溫州正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家鼠尾膠原蛋白用于生產(chǎn)明膠并添加到布丁和棉花糖中。
鼠尾膠原包被培養(yǎng)板:胎干細胞在體外可誘導分化為血管內(nèi)皮細胞,進而形成血管,因而成為血管組織工程理想的種子細胞來源之一,。目的:探討建立定向誘導人胚胎干細胞向血管內(nèi)皮細胞分化的方法,。方法:在小鼠胚胎成纖維細胞飼養(yǎng)層上培養(yǎng)人胚胎干細胞H1,將H1細胞團塊轉移到鼠尾膠原包被的培養(yǎng)板,貼壁24-48h后,培養(yǎng)基換為含不同輔助因子和內(nèi)皮細胞生長添加劑的EGM-2內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基。結果與結論:①在EGM-2內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基誘導下,細胞逐步表達內(nèi)皮細胞特異性標記基因VEGFR-2,、PECAM1,、vWF、CD34,、VE-cadherin,、GATA-2。②分化細胞表達內(nèi)皮細胞特異性標記VE-cadherin,、CD31,。③分化細胞具有吞噬低密度脂蛋白功能。說明將人胚胎干細胞接種在鼠尾膠原包被培養(yǎng)板上,通過EGM-2內(nèi)皮培養(yǎng)體系誘導,可直接分化為功能性血管內(nèi)皮細胞,。為研究胞外基質(zhì)對誘導胚胎干細胞血管內(nèi)皮細胞分化的作用以及相關信號分子機制打下了基礎,。
鼠尾膠原蛋白的提取方法,采用酸法與酶法相結合的工藝,,保持恒低溫無菌的環(huán)境,,利用同樣濃度的鹽溶液進行兩次鹽析與離心,,簡化了提純步驟。所用酸為低濃度酸溶液,,并采用檸檬酸替代醋酸進行提純,。從提取原料到樣品生成過程中,進行多次真空冷凍干燥,,并經(jīng)進一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉,;較后由滅菌、無菌包裝,,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上,。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產(chǎn)率和生物相容性,,降低了成本,,適用于生物醫(yī)用材料,所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結構,。取大鼠尾巴洗凈,,75%酒精浸泡5分鐘。
對于生物科研汪們來說,,大白鼠,、小白鼠們簡直渾身是寶,從毛發(fā),、皮膚,,到心肝脾肺,甚至各種排泄物,,都是我們重要的研究對象,。尾巴,,自然也是,。所以耗子尾汁不僅存在,甚至是我們生物實驗中必不可少的實驗材料和實驗對象,。有不少人靠「耗子尾汁」發(fā)了CNS和頂刊,。沒有「耗子尾汁」,很多課題可能都沒辦法開展,。在以小鼠為模式生物進行科學研究的實驗室中,,日常和基本的一個實驗就是提取它們的遺傳物質(zhì)—DNA(脫氧核糖核酸)進行基因型鑒定,檢測這些小動物的基因組中是否含有特定的DNA,??梢岳斫鉃榻o小動物做核酸檢測。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,,加入適當體積的細胞培養(yǎng)液,,轉移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。杭州正規(guī)鼠尾膠原廠家供應
鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,它具有促進體外培養(yǎng)細胞(特別是上皮細胞)貼壁的作用,。鼠尾膠原廠家
以鼠尾膠原為支架的類似物的建立:探尋建立類似物的培養(yǎng)方法,。方法:原代培養(yǎng)人皮膚成纖維細胞,制備鼠尾膠原,,將鼠尾膠原溶液,、濃縮培養(yǎng)基、NaOH溶液和以血清重懸的成纖維細胞溶液在適當?shù)谋壤禄旌虾笮纬赡z構建類似物,。結果:形成的類似物中成纖維細胞生長狀態(tài)良好,,并且組織塊具有一定彈性和抗拉伸能力。結論:①利用鼠尾膠原可以構建類似物,,該模型是進行皮膚部位型培養(yǎng)和制作復合皮的關鍵與基礎,;②成纖維細胞膠原凝膠復合物有著良好的生物學特性,它是研究成纖維細胞與細胞外基質(zhì)之間以及細胞之間相互作用的良好模型,。鼠尾膠原廠家