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來源: 發(fā)布時間:2024-08-08

糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化,,產(chǎn)生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結(jié)合,,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中,。該反應(yīng)稱為碘酸-雪夫(PAS)反應(yīng)。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,,冷卻60℃時過濾,,加1mmol/L鹽酸20ml,再冷卻至25℃左右,,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,,混合后放棕色瓶中,置暗處24h,,無色即可放冰箱中保存,,呈微紅色,則加活性炭1~2g,,吸附過濾使成無色液體,,放冰箱中保存。若溶液變紅,,即不能再用,。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml。故PAS染色有助于三種急性白血病類型的鑒別,。安徽哪家提供糖原染色試劑盒推薦廠家

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糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體,、霉菌,、色素、淀粉樣物質(zhì),、基底膜等,。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強氧化劑,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,,使之變?yōu)槎?,醛不Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色,。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),,使用時應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,,這是很關(guān)鍵的步驟,。PAS技術(shù)是很少可檢測不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原,。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步驟,。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去,。人類的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段,,但是出于安全以及缺乏標(biāo)冸唾液的考慮,不主張應(yīng)用唾液,。天津口碑好的糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家巨幼紅細(xì)胞貧血,、溶血性貧血、再障的幼紅細(xì)胞PAS染色為陰性,。

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粘液染色法:粘液一般有以下幾點特性:(1)對鹽基性染料有親合力,,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍(lán)色,。(2)對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍(lán)有異染性,。(3)遇醋酸發(fā)生沉淀,胃粘蛋白則除外,。(4)溶于弱堿溶液,。常用的粘液染色有以下幾種:1、P.A.S染色法:操作方法同前,,結(jié)果,;中性粘液性物質(zhì),某些酸性粘液物質(zhì)呈紅色,,核呈藍(lán)色,。2、AB/P.A.S染色法:該種方法的特點是能同時顯示出酸性和中性粘液物質(zhì),。操作方法:(1)切片常規(guī)脫蠟入水,。(2)3%醋酸液洗2分鐘,入1%阿利新蘭醋酸液(PH2.5)10-20分鐘。(3)蒸餾水洗,。(4)按P.A.S染色程序,。(5)蘇木素淡染2-3分鐘,水洗,。(6)常規(guī)脫水,、封片。

糖原D-PAS染色液注意事項:1,、切片脫蠟應(yīng)盡量干冷,,否則影響染色效果。需使用一張陽性對照片驗證酶的活性,。2,、過碘酸氧化時間不宜過久,氧化時溫度以18~22℃較佳,。3、試劑(A),、試劑(B),、試劑(C)、應(yīng)置于4℃密閉保存,,使用時避免接觸過多的陽光和空氣,,使用前較好提前取出恢復(fù)到在室溫后,避光暗處使用,。4,、酸性乙醇分化液應(yīng)經(jīng)常更換新液,其分化時間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄,、組織的類別和酸性乙醇分化液的新舊而定,,另外分化后自來水沖洗時間應(yīng)該足夠。5,、在過碘酸溶液和SchiffReagent中作用時間非常重要,,該依據(jù)切片厚薄、組織類別等決定,。6,、況冶切片染色時間盡量要短??梢赃x用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細(xì)胞,。

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糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘,?;?%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結(jié)晶應(yīng)重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗,。(4)Schiff氏液15-30分鐘,。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細(xì)胞核2-3分鐘,。(7)脫水,、透明、封蓋,。結(jié)果:糖原呈紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色,。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液,。(2)Schiff氏試劑,。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過濾,,加入當(dāng)量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,,然后加入少量活性碳并震蕩,、過濾,此時溶液應(yīng)為無色,。保存冰箱備用,。溶液如顯淺紅色或草黃色,,染色效果較差。冷凍切片染色時間盡量要短,。福建如何使用糖原染色試劑盒平均價格

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糖原染色的原理與操作方法是什么:(1)原理:過碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,,生成醛基,。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,,定位于細(xì)胞質(zhì)中,。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,,流水沖洗,,晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,,流水沖洗,,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,,流水沖洗,,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,,流水沖洗,,晾干鏡檢。細(xì)胞的組織化學(xué)方法,,是研究細(xì)胞成分常用的方法之一,。它是利用化學(xué)試劑與細(xì)胞內(nèi)的某些物質(zhì)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng),從而在細(xì)胞局部形成有色沉淀物,,再通過顯微鏡對組織內(nèi)的生物化學(xué)成分進(jìn)行定性、定位,、定量研究安徽哪家提供糖原染色試劑盒推薦廠家