RNA提取試劑盒原理:該EpiQuik?總RNA提取試劑盒提供了一種快速,,簡單,,經濟有效的方法,可從全血,,哺乳動物細胞,,細菌細胞和菌類細胞中分離總RNA。優(yōu)化的洗滌劑和離液鹽用于裂解細胞并滅活核糖核酸酶,。專門的高鹽緩沖系統(tǒng)允許RNA物質基團結合到旋轉柱的玻璃纖維基質上,,同時使污染物通過柱被有效地洗去。純的RNA用RE緩沖液洗脫,,不用酚提取或醇沉淀,。RNA提取試劑盒特點:1、快速程序在25-40分鐘內提供高質量的總RNA,。2,、即用型RNA,可在絕大多數(shù)下游應用,,例如RT-PCR,,cDNA合成,NorthernBlotting,,Differentialdisplay,,PrimerExtension,mRNAselection。3,、適用樣品:全血,,哺乳動物細胞,細菌細胞和菌類細胞(樣品起始量:300μl全血,,10^7個哺乳動物細胞,,10^9個細菌細胞和10^8個菌類細胞??偣部梢允褂迷撛噭┖羞M行50次標準提取,。總RNA的產量可達30μg,。產量可能因樣品類型而異,。)若比值較低,說明有殘余蛋白質存在,;比值太高,,則提示RNA有降解。RNA提取試劑進貨價
Trizol是一種總RNA抽提試劑,,內含異硫氰酸胍等物質,,能迅速裂解細胞,壓制細胞釋放出的核酸酶活性,。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA,。原理:在勻質化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,,同時能破壞細胞及溶解細胞成分,。加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機相,。RNA存在于水相中,。水相轉移后,RNA通過異丙醇沉淀回收,。移去水相后,,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,加入異丙醇沉淀可從有機相得到蛋白質,。異硫氰酸胍氯化銫超速離心法:原理:使用蛋白質變性劑異硫氰酸胍有效壓制RNA酶的活性,,經過起始密度為1.78g/ml的氯化銫介質,進行密度梯度超速離心,,RNA沉淀于管底,,而DNA與蛋白質在上清液中。使用這種方法,,不但能得到高質量的RNA,,而且能同時分離出細胞染色體DNA,。廈門長沙RNA提取試劑RNA提取試劑注意事項:間層用乙醇沉淀可回收DNA。
RNA快速提取試劑盒:隨著對小RNA的研究的逐漸深入,,小RNA的分離逐漸成為一種需求,,百泰克利用雄厚的研發(fā)實力,開發(fā)出高效快捷的小RNA分離純化試劑盒,,對各種不同來源的樣品(動物,、植物、細胞等)均取得滿意的效果,。miRNA提取試劑盒采用自創(chuàng)的結合洗脫技術,,對小RNA,包括RNA(miRNA),、smallinterferingRNA(siRNA),、smallnulcearRNA(snRNA)均能很好的回收。產品特點:高效分離小RNA,,同時分離總RNA,。富集200nt以下的小RNA,增加其用于下游實驗的濃度,??焖佟?0分鐘完成實驗??捎糜趍iRNA,、siRNA、shRNA和snRNA分析,。適用于各種來源的樣品。
拭子RNA提取試劑的選擇,?1,、產品價格。價格也是選購產品的重要考量因素,。對于絕大多數(shù)實驗如Northern雜交,、RT-PCR、RealTimeRT-PCR,、cDNA文庫構建等,,國產試劑盒都能滿足質量要求。與國外有名品牌相比,,國產試劑盒的價格較為便宜,,價格還不到國外品牌價格的30%,性價比較高,。因而,,對于以上實驗建議選用國產試劑盒,。一些經費不是很多的課題研究或樣本量較大的臨床檢測項目,特別適合選用國產試劑盒,。2,、與國外有名品牌相比,國產試劑盒在拭子RNA提取純度上略有不足,,但不影響大多數(shù)實驗,,特別是下游需要PCR擴增的實驗和分子雜交類實驗。在提取得率上,,國內試劑盒與國外品牌差別不大,,而在價格方面,國產試劑盒具有比較明顯的優(yōu)勢,。如果經費充足,,RNA純度要求特別高,可考慮選擇Q等國外有名品牌,。如果經費不多或下游主要做PCR或分子雜交等實驗,,可考慮選擇性價比較高的國產品牌。為了使這種酶對降解的影響較小化,,較好在采集時就穩(wěn)定好樣本中的 RNA,。
RNA是什么?和DNA有什么區(qū)別,?RNA(核糖核酸),,是存在于生bai物細胞以及部分病菌、類病菌中的遺傳信息載體,。RNA由核糖核苷酸經磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子,。與DNA的區(qū)別:組成的區(qū)別:1、RNA由核糖核苷酸經磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子,。一個核糖核苷酸分子由磷酸,,核糖和堿基構成。RNA的堿基主要有4種,,即A腺嘌呤,、G鳥嘌呤、C胞嘧啶,、U尿嘧啶,。2、DNA分子巨大,,由核苷酸組成,。核苷酸的含氮堿基為A腺嘌呤、G鳥嘌呤,、C胞嘧啶及T胸腺嘧啶,;戊糖為脫氧核糖,。優(yōu)化的洗滌劑和離液鹽用于裂解細胞并滅活核糖核酸酶。廣州正規(guī)RNA提取試劑產品介紹
在裂解液上游加入酶裂解步驟(如蛋白酶 K,、溶菌酶等),。RNA提取試劑進貨價
RNA提取注意事項:1、組織樣本要盡可能的新鮮,,避免反復凍融,。2、提取時組織要充分研磨,,組織量不宜過少,,更不宜過多。3,、加入裂解液后應給予充分的孵育時間,,使樣本充分裂解。4,、在用Trizol法提取時,,分層后吸取上清的原則是“寧愿少吸,不能多吸”,,千萬不能提取到中間層,,否則會導致嚴重的基因組DNA污染。5,、洗滌時洗滌液應充分浸潤到管壁的四周,,確保洗滌徹底。6,、柱式提取法,,洗滌完后除了對柱子進行空離后,還應當將吸附柱置于超凈臺內吹風5~10min,,使有機溶劑充分揮發(fā)干,。7、柱式法較后洗脫時候,,當加入DEPC水后還應孵育3~5min,或者提前將DEPC水加熱至60℃,,可提高洗脫得率,。傳統(tǒng)的Trizol裂解異丙醇沉淀法較后RNA是用DEPC水溶解沉淀,則應當給予適當溶解時間,,并用泵頭不斷吹吸離心管底部,。RNA提取試劑進貨價