外泌體是細(xì)胞間進(jìn)行物質(zhì)運(yùn)輸和信息交流的重要工具，可以通過(guò)調(diào)節(jié)免疫功能促進(jìn)一些病癥的增殖，血管新生和一些病癥轉(zhuǎn)移,。與細(xì)菌傳染,，幫助細(xì)菌逃避免疫關(guān)系很大，并與心血管疾病,，老年癡呆等疾病具有密切關(guān)系,。外泌體可通過(guò)流式、WB（檢測(cè)指標(biāo)有CD9,CD63,CD81）,、電鏡觀察,、NTA粒徑追蹤等手段檢測(cè)，普遍應(yīng)用于藥物載體,、疾病診斷marker,、精細(xì)醫(yī)療、一些病癥治病等方面研究,。由于外泌體直徑小,，樣本含量低，提取十分困難,。已有的外泌體分離方式有密度梯度離心,、超濾離心法、免疫磁珠抗體捕獲,、商用試劑盒等,。但到目前為止，仍沒(méi)有一種提取方法能同時(shí)保證外泌體的含量,、純度以及生物活性,。用于外泌體提取的體液收集注意事項(xiàng)：操作要輕柔迅速。廣州外泌體提取試劑廠家供應(yīng)

外泌體的提取方法：1.超速離心法（差速離心）。超離法是較常用的外泌體純化手段,，采用低速離心,、高速離心交替進(jìn)行，可分離到大小相近的囊泡顆粒,。超離法因操作簡(jiǎn)單,，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎，但過(guò)程比較費(fèi)時(shí),，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)）,，純度也受到質(zhì)疑；此外,，重復(fù)離心操作還有可能對(duì)囊泡造成損害,，從而降低其質(zhì)量。2.密度梯度離心,。在超速離心力作用下,，使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層，是一種區(qū)帶分離法,。通過(guò)密度梯度離心,，樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高,，但步驟繁瑣,，耗時(shí)，對(duì)離心時(shí)間極為敏感,。蕪湖正規(guī)外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹外泌體的提取方法：密度梯度離心,。

外泌體提取：1,、過(guò)濾,。超濾膜也可用于分離外泌體。根據(jù)外泌體的大小,，從蛋白質(zhì)和其他大分子中分離外泌體,。較常見(jiàn)的過(guò)濾膜具有0.8μm、0.45μm或0.22μm的孔徑,，可用于收集大于800nm,、400nm或200nm的外泌體，也有設(shè)計(jì)成微柱多孔硅纖毛結(jié)構(gòu)以分離40-100nm外泌體：不過(guò),，該方法由于過(guò)濾膜的粘附,，可能會(huì)損失外泌體，并且過(guò)濾時(shí)的壓力和剪切力,，可能會(huì)使外泌體變形受損,。2,、基于聚合物的沉淀技術(shù)?；诰酆衔锏某恋砑夹g(shù)通常包括將樣本與含聚合物的沉淀溶液混合,，在4℃溫育并低速離心。用于聚合物沉淀的較常見(jiàn)聚合物之一是聚乙二醇（PEG）,。用這種聚合物沉淀具有許多優(yōu)點(diǎn),，包括對(duì)分離的外泌體影響小、pH中性等,。目前大多數(shù)快速分離外泌體的商品化試劑盒都是基于此方法,。然而基于聚合物的沉淀方法可能會(huì)同時(shí)分離非囊泡污染物（包括脂蛋白）而且，聚合物材料的混雜可能會(huì)影響下游分析

外泌體的生物學(xué)功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,，而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣,、硬件要求高、操作難度大,。李記生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,，組分經(jīng)過(guò)優(yōu)化處理，適用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、血清,、血漿,、尿液及其他體液（腦脊液,、腹水、羊水,、乳汁以及唾液等）中的外泌體提取,，并搭配純化過(guò)濾裝置，可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒,。注意事項(xiàng)：1.對(duì)于待測(cè)樣品粘度過(guò)大時(shí),，可將樣本用4℃預(yù)冷的1×PBS緩沖液進(jìn)行等體積稀釋處理。2.當(dāng)血清,、血漿,、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高，收獲的外泌體顆粒無(wú)法通過(guò)EPF柱純化時(shí),，可用4℃預(yù)冷的1×PBS進(jìn)行稀釋后再通過(guò)EPF柱離心,。通過(guò)超速離心(120000g/分鐘)20小時(shí)以上才能獲得足夠的外泌體量。

外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來(lái)的微小囊泡,，直徑約為30-200nm,，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯狀形態(tài),、雙層膜結(jié)構(gòu),，天然存在于血液,、尿液、唾液,、母乳和細(xì)胞培養(yǎng)基等生物體液中,。包括瘤細(xì)胞在內(nèi)幾乎所有類型的細(xì)胞（免疫細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞,、干細(xì)胞),，都可以產(chǎn)生并釋放exosome。Exosome內(nèi)含有與細(xì)胞來(lái)源相關(guān)的蛋白質(zhì)rRNA和microRNA,，Exosome可通過(guò)細(xì)胞膜受體直接受體細(xì)胞,，也可運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì)、mRNA,、miRNA,、lncRNA、circRNA,，甚至細(xì)胞器進(jìn)入受體細(xì)胞,，參與細(xì)胞間通訊。Exosome在免疫應(yīng)答,、炎癥反應(yīng),、血管生成、凋亡,、凝血和廢物處理等生理過(guò)程發(fā)揮關(guān)鍵作用,，不同細(xì)胞來(lái)源的exosome所含有的RNA和蛋白成分不盡相同，可作為多種疾病的早期診斷標(biāo)記物,，也能作為靶向藥物的載體進(jìn)行疾病外泌體的提取方法：磁珠免疫法,。鄭州外泌體提取試劑報(bào)價(jià)

有的是通過(guò)特殊設(shè)計(jì)的過(guò)濾器過(guò)濾掉雜質(zhì)成分，有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進(jìn)行分離純化,。廣州外泌體提取試劑廠家供應(yīng)

外泌體的提取,、分離方法：超高速離心法。常用的是超高速離心法,，該方法是被譽(yù)為分離外泌體的“金標(biāo)準(zhǔn)”,。該方法利用離心力從細(xì)胞培養(yǎng)液或生物流體獲得外泌體，經(jīng)過(guò)400×g,、2000×g,、10000×g的低速離心，除去細(xì)胞及大的細(xì)胞分泌物,；較后超高速100000×g離心得到外泌體[12],。超高速離心因操作簡(jiǎn)單，不需要復(fù)雜的技術(shù)支持,，并且成本相對(duì)較低而被普遍使用,。但是該方法耗時(shí),、產(chǎn)率低，得到的外泌體的數(shù)量和質(zhì)量很大程度上受轉(zhuǎn)子的類型,、轉(zhuǎn)子沉降角度等因素影響,，其中較主要的問(wèn)題就是差速離心法獲得的沉淀物是外泌體，但也會(huì)有其他的囊泡,、蛋白質(zhì)或蛋白和RNA的聚集體,。廣州外泌體提取試劑廠家供應(yīng)