細(xì)胞凍存的基本原理：細(xì)胞代謝過(guò)程需要各種蛋白酶的參與,，而這些蛋白酶在環(huán)境溫度低于-70℃時(shí)會(huì)集體不工作，低溫貯藏的目的是通過(guò)較低溫使細(xì)胞代謝活動(dòng)近乎停止,。細(xì)胞因此進(jìn)入休眠狀態(tài),，使細(xì)胞“不會(huì)老”，所以可以長(zhǎng)期保存,。因?yàn)閮鋈谶^(guò)程對(duì)所有細(xì)胞和組織都是有一定傷害的,，因此，需要開(kāi)發(fā)出有效的技術(shù)來(lái)防止細(xì)胞死亡和損傷,。低溫保護(hù)劑可保護(hù)細(xì)胞不受細(xì)胞內(nèi)冰凍影響,，目前多采用DMSO，甘油,，乙二醇和丙二醇等滲透型低溫保護(hù)劑,。它們的作用機(jī)制包括：自由進(jìn)入細(xì)胞，取代水,，使冰點(diǎn)下降,，充當(dāng)鹽的二次溶劑，提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,。無(wú)血清凍存液特性：不含動(dòng)物成分,。北京無(wú)血清細(xì)胞凍存液銷售廠家

無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞復(fù)蘇方法：1.從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,，立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍。2.待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,，立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合，再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,，混合均勻,。3.離心收集培養(yǎng)細(xì)胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃,，3~5min）,，移去上清液。4.清洗細(xì)胞,，充分洗凈殘留凍存液,。5.加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液,。適量地稀釋后,，將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。6.鏡檢后,，研究者可根據(jù)各自方法和需要來(lái)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),。北京無(wú)血清細(xì)胞凍存液銷售廠家無(wú)血清細(xì)胞凍存液使用方法：按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。

無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液,，通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株,。特別配方具有有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力。不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白,，能減少各類病毒,、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細(xì)胞安全,。既適用于一般培養(yǎng)細(xì)胞的凍存,，也適用于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞的凍存。產(chǎn)品特色：1.高安全性,，完全使用醫(yī)藥品等級(jí)原料進(jìn)行生產(chǎn),，不含動(dòng)物成分，病毒,、霉菌和支原體等污染可能性低,，各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性。2.細(xì)胞存活率高,，無(wú)批次差異,。3.完全凍存液配方，可直接使用,，方便簡(jiǎn)捷,，可直接存放于-80℃冰箱凍存，無(wú)需經(jīng)過(guò)費(fèi)時(shí)的程序降溫過(guò)程（省時(shí)、省力,、省錢）,。

無(wú)血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)點(diǎn)有哪些呢：很多所使用的傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液的成份主要是：新鮮的培養(yǎng)基，其中含有10%的胎牛血清和5-10%的DMSO,。凍存的方法：將冷凍管置于4℃條件喜愛(ài)10分鐘,，接著在-20℃的條件下30分鐘，-80℃的條件下保存16-18個(gè)小時(shí)（或隔夜保存也可以）,，較后再液氮的環(huán)境中進(jìn)行長(zhǎng)期的儲(chǔ)存,。需要注意在-20℃的環(huán)境下保存不可超過(guò)1個(gè)小時(shí)，主要用以防止冰晶產(chǎn)生過(guò)大,，造成細(xì)胞大量的死亡,。對(duì)于無(wú)血清的細(xì)胞凍存液來(lái)說(shuō)，其所含有的成分是：不含血清,，含DMSO,、pH調(diào)節(jié)劑、葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分等,。其中不含有動(dòng)物來(lái)源性的蛋白,，所以能夠減少各類的細(xì)菌、霉菌,、支原體等帶來(lái)的污染,，而且可以確保凍存細(xì)胞的安全。比較通用于各種動(dòng)物的細(xì)胞株,。無(wú)血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì)：因不含血清,，批次間差異小。

細(xì)胞凍存和復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)：一般來(lái)說(shuō),，細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)移和保存,，較佳的策略是進(jìn)行低溫保存（-70℃~-196℃），而細(xì)胞深低溫保存的基本原理是：在-70℃以下時(shí),，細(xì)胞內(nèi)的酶活性均已停止,，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故而可以長(zhǎng)期保存,。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,，在于通過(guò)0~20℃階段的處理過(guò)程，在此溫度范圍內(nèi),，冰晶呈針狀,，極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。經(jīng)過(guò)前人的長(zhǎng)期試驗(yàn),，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇基本原則是慢凍速融,，這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力,。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷,。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷,。無(wú)血清凍存液用途：無(wú)血清細(xì)胞凍存液用于免疫細(xì)胞及干細(xì)胞的存儲(chǔ)。北京無(wú)血清細(xì)胞凍存液銷售廠家

無(wú)血清凍存液特性：適合各種動(dòng)物細(xì)胞,。北京無(wú)血清細(xì)胞凍存液銷售廠家

無(wú)血清細(xì)胞凍存液凍存雜交瘤細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)：簡(jiǎn)單,、方便、快捷,。1.即用型,，無(wú)需現(xiàn)配，可直接使用,。2.可孔板原位凍存,，可微量?jī)龃妫瑹o(wú)需使用凍存管,。3.無(wú)需程序降溫,，可直接放置-80℃凍存，操作簡(jiǎn)單,。4.不含血清,，較大減少細(xì)胞污染。5.因不含血清,，批次間差異小,。6.無(wú)需液氮，-80℃冰箱長(zhǎng)期凍存,。無(wú)血清細(xì)胞凍存液凍存雜交瘤細(xì)胞的方法：1.驗(yàn)證陽(yáng)性克隆的細(xì)胞培養(yǎng)孔,，將培養(yǎng)基上清小心吸取干凈；2.加入適量Cellregen無(wú)血清細(xì)胞凍存液,，充分浸潤(rùn)細(xì)胞（無(wú)需消化細(xì)胞）,；3.蓋上蓋板，直接放入-80℃冰箱,，長(zhǎng)期冷凍保存,。北京無(wú)血清細(xì)胞凍存液銷售廠家