RNA提取試劑的選擇:首先,要確定材料的可用性,。盡管現(xiàn)有的RNA提取試劑都用壓制RNase的成分,,但提取的材料仍需謹(jǐn)慎處理,。提取的材料的新鮮度是獲取完整RNA的關(guān)鍵,但是由于種種原因無法立即從新鮮材料中提取RNA時,,使用Takara公司的樣品保護(hù)劑SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低溫冰箱的不便,,同時也可以有效解決組織、細(xì)胞樣品的短時間保存及運(yùn)輸問題,。此外,,如果將不同時期收集的樣品都預(yù)先存放于本試劑中,可以做到立即終止并固定RNA表達(dá)的時序變化,,減少實驗組間的誤差,。RNA提取試劑注意事項:耐高溫器物可150℃烘烤4小時以去除RNA酶。青島RNA提取試劑產(chǎn)品介紹
病毒RNA提取試劑盒可以快速從全血,、血清,、血漿、口腔拭子等生物液體中提取病毒RNA,。在此試劑盒中,,使用了核酸助沉劑--carrierRNA。核酸助沉劑不光有利于微量RNA的沉淀,,同時也可以減少RNA的降解,。本試劑盒操作簡捷方便。30-40min就可以完成一個樣品的提取,,得到純凈的RNA,。RNA可以使用RT-PCR,real-timeqPCR,Northernblot,Dotblot,poly(A)+selection,體外翻譯,和分子克隆等實驗,。此外,,裂解液VLS也是病毒RNA樣品的一個很好的保存液。儲存在裂解液中的病毒RNA(在病毒樣品中加入3倍體積裂解液后劇烈渦旋裂解樣品)可以在-20℃情況下穩(wěn)定至2個月,;在-80℃情況穩(wěn)定半年;同時,儲存在裂解液中的樣品在運(yùn)輸過程中,,也可以在4℃穩(wěn)定一日,;-20℃穩(wěn)定一周。RNA提取試劑推薦廠家常用RNA提取方法有:1TRIzol法,;2TRIzol+過柱法,;3CTAB+過柱法;4試劑盒法,。
植物花總RNA提取試劑盒:采用進(jìn)口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱,,配合特殊的提取緩沖液,可以從多糖多酚植物的根,、莖,、葉以及花組織中快速提取總RNA,,40~60分鐘內(nèi)即可完成提取過程,提取的總RNA純度高,,沒有DNA和蛋白質(zhì)污染,,適用于RT-PCR、qRT-PCR,、芯片分析,、Northernblot雜交等實驗。特殊的提取緩沖液保證特殊植物材料中的總RNA充分溶解,??俁NA提取速度快,提取效率高,。有效去除植物花組織中的多糖、多酚類等雜質(zhì),,提取純度高,。細(xì)菌總RNA提取試劑盒:本試劑盒可以快速從細(xì)菌體內(nèi)提取總RNA,提取的總RNA純度高,,沒有DNA和蛋白質(zhì)污染,,適用于RT-PCR、qRT-PCR,、芯片分析,、Northernblot雜交等實驗。吸附柱特異吸附總RNA,,提取速度快,。提取效率高。有效去除蛋白質(zhì),、鹽類,、脂類等雜質(zhì),提取純度高,。
新型土壤總RNA快速提取試劑盒:獨特裂解劑/裂解液迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶,,然后RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于玻璃奶,然后將粗純化的玻璃奶轉(zhuǎn)移到離心柱,,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將腐植酸,、細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,,較后低鹽的洗脫緩沖液將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫,。試劑盒特點:離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,,可重復(fù)性好,??朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。兼容性強(qiáng),,適用于各種不同的土壤,、糞便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟,??焖伲喗?,單個樣品操作一般可在1小時內(nèi)完成,。多次柱漂洗確保高純度,OD260/OD280典型的比值達(dá)1.9以上,,可直接用于PCR,,Northern-blot和各種酶切反應(yīng)~RNA提取試劑注意事項:使用凍存的細(xì)胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細(xì)胞或組織差一些。
眾所周知,,RNA提取是一項困難的工作,。常見的挑戰(zhàn)包括RNA降解、低產(chǎn)率和/或純度以及DNA污染,。此外,,不同的樣品類型有自己獨特的特性,需要特別注意,。例如,,微生物(如革蘭氏陽性/陰性細(xì)菌、菌類,、古生菌等)的細(xì)胞壁堅硬,,不易被化學(xué)和酶解。其他樣本類型,,如糞便和植物含有壓制劑(如多酚類,、腐殖酸/黃腐酸、單寧酸等),,可與RNA共沉淀,,并可壓制下游分析,如RT-qPCR,。RNA是不穩(wěn)定的,,極易降解。許多樣品含有高水平的RNase,,會快速降解RNA,。為了使之較小化,較好在采集時穩(wěn)定樣本中的RNA。常用的樣品穩(wěn)定方法包括液氮快速冷凍,、干冰乙醇浴或-80°C冷凍室,。然而,這些方法也有缺點,,如核酸的凍融損傷,,并不是所有的研究人員在采集樣品時都能立即使用這些方法。拭子RNA提取試劑的選擇,?如果離心柱硅膠膜吸附能力不好,,裂解液和洗脫液沒有經(jīng)過很好的優(yōu)化。RNA提取試劑推薦廠家
細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點:方便快捷的離心柱操作方式,。青島RNA提取試劑產(chǎn)品介紹
拭子RNA提取試劑的選擇,?操作簡便性。操作簡便性也是拭子RNA提取試劑選擇的一個重要因素,。操作過于復(fù)雜,,不光費(fèi)時費(fèi)力,還容易導(dǎo)致樣本間的交叉污染,,也容易損失樣本,。特別是用于臨床檢測或樣本量較多情況下的檢測,操作復(fù)雜如果導(dǎo)致交叉污染會引起誤診,,還會影響出檢測報告的時間。因而,,選用操作簡便,、流暢的提取試劑盒非常重要。就我們曾經(jīng)用過的以上三種提取試劑盒來說,,Q公司的拭子RNA提取試劑盒提取過程大約25min,,從樣本處理開始需要10個步驟;T公司拭子RNA提取試劑盒整個提取過程需要1個多小時,,從樣本開始處理10個步驟,;B公司的Biog拭子RNA提取試劑盒提取過程大約20min,從樣本開始處理7個步驟,,B公司的拭子RNA提取試劑盒在操作簡便性上具有一定優(yōu)勢,,更適合于較多樣本的檢測。據(jù)了解,,該產(chǎn)品已通過藥監(jiān)局備案,,也更適合臨床樣本的檢測。青島RNA提取試劑產(chǎn)品介紹