膠原蛋白的提取方法：1.堿法提?。簤A法提取膠原蛋白常用的處理劑為石灰、氫氧化鈉,、碳酸鈉等,。如Holzer等[5]采用1%～1.5%石灰水浸泡的方法提取膠原蛋白。由于它容易造成肽鍵水解，因此得到的水解產(chǎn)物分子量比較低,。所以,，若想保留膠原的三股螺旋結(jié)構(gòu)，此法不可取,。2.鹽法提?。蝴}法提取膠原蛋白所用的中性鹽有鹽酸-三羥甲基胺基甲烷(Tris-HCl)、氯化鈉,、檸檬酸鹽等,。在中性條件下，當(dāng)鹽的濃度達(dá)到一定量時,，膠原溶解,。并且可采用不同濃度的氯化鈉對提取的膠原蛋白進(jìn)行鹽析處理，可以沉淀出不同類型的膠原蛋白,。剪下幾毫米小鼠尾巴,、在小鼠尾靜脈上劃一道小口、用注射器抽取的操作都可以得到這種鮮紅的「耗子尾汁」,。濟(jì)南鼠尾膠原服務(wù)電話

鼠尾膠原醋酸溶解：1．將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,，制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解,。2．建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%,。不要晃動或攪拌,。在2-8度中放置過夜。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液,。我們不建議用過濾的方法無菌化,。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會導(dǎo)致丟失蛋白。3．稀釋一定數(shù)量的膠原溶液,。4．按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶,。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時或者2-8度過夜。5．從包被表面除去多余的液體,。過夜干燥,。如果膠原溶液不是無菌的，這時候可以在無菌細(xì)胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒,。在接種細(xì)胞前用無菌的水漂洗,。無錫珠海鼠尾膠原期間不斷攪拌，防止凍結(jié)成塊,，得到膠原溶脹液,。

鼠尾膠原：鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑,。實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料：大鼠尾巴、剪刀,、鑷子,、止血鉗、彎頭吸管,、平皿,、三角燒瓶、燒杯,、量筒,、天平、生理鹽水,、75%酒精,、0.1%醋酸溶液、蓋玻片,、培養(yǎng)瓶,、鉆石筆、鼠尾膠原,。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：1,、制備鼠尾膠原（兩個同學(xué)一組操作）。2,、切割小玻片。3,、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內(nèi),。制備鼠尾膠原：1、取大鼠尾巴洗凈,，75%酒精浸泡5分鐘,；2、手持尾巴,，用止血鉗夾住鼠尾的,，折斷尾骨后拉出尾腱；3,、將尾腱剪斷置于平皿中,，生理鹽水浸泡；4,、重復(fù)步驟2,、3，直至尾腱量夠用,；5,、吸去生理鹽水,，將尾腱稱重（0.5-1克）；6,、將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎,，轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中；7,、按每克尾腱50ml的比例,，加入0.1%醋酸溶液；8,、搖晃,，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置一星期,；9,、離心，4000轉(zhuǎn)/分,，10-15分鐘,；10、吸取上清,，分裝成小瓶,，4℃保存。

鼠尾膠原蛋白耗子尾汁還能變得更加,，一種被稱作鼠尾膠原蛋白的“珍貴”液體就來自大鼠的尾巴,，制作過程需要經(jīng)歷醋酸抽提、氯化鈉沉淀和磷酸氫二鈉沉淀等步驟,，才能從鼠尾中獲得珍貴的膠原蛋白,。這種膠原蛋白在37℃的條件下會形成3股螺旋結(jié)構(gòu)，可以用來當(dāng)作細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì),。細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，細(xì)胞需要貼附在培養(yǎng)皿表面（懸浮培養(yǎng)細(xì)胞除外）才能完成生長過程，而有一些細(xì)胞卻總是不太給力,，自己完成不了貼壁過程或者貼壁困難,，這個時候鼠尾膠原蛋白就能承擔(dān)起讓細(xì)胞更容易貼壁的作用。這一步也被稱作涂層（coating）,，給培養(yǎng)皿涂上了一層膠原蛋白后,，細(xì)胞就能更好地貼附上去，除了培養(yǎng)皿,，一些需要使用海藻碳酸鈣微球培養(yǎng)得細(xì)胞,，同樣也可以用鼠尾膠原蛋白協(xié)助細(xì)胞貼壁生長。鼠尾I型膠原蛋白系采用方法在無菌下制備,，純度達(dá)到95%以上,。

鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,，它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞（特別是上皮細(xì)胞）貼壁的作用，同時它也是一種天然的黏附劑,，當(dāng)我們需要在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)放置小玻片,，制備細(xì)胞爬片時，可在瓶底涂一層膠原,，再放上小玻片,，自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中。通過本實(shí)驗(yàn)可掌握鼠尾膠原的制備方法,，以及如何切割小玻片,，并利用鼠尾膠原將其固定于培養(yǎng)瓶內(nèi)。實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料：大鼠尾巴,、剪刀,、鑷子、止血鉗,、彎頭吸管,、平皿、三角燒瓶,、燒杯,、量筒、天平,、生理鹽水,、75%酒精、0.1%醋酸溶液,、蓋玻片,、培養(yǎng)瓶、鉆石筆、鼠尾膠原。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：1,、制備鼠尾膠原,。2、切割小玻片,。3,、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內(nèi)。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長時程記錄,，并且制作簡便，成本低廉,。制備鼠尾膠原：取大鼠尾巴洗凈,，75%酒精浸泡5分鐘,。徐州昆明鼠尾膠原

它可以用于監(jiān)測小鼠血液成分的變化，確糖尿病或者某些能夠改變小鼠的血糖等,。濟(jì)南鼠尾膠原服務(wù)電話

膠原蛋白的適用征狀：1,、由于工作勞累，睡眠不足形成的皮膚晦暗無光,、發(fā)黃,、皮膚彈性差等皮膚衰老的不良癥狀。2,、由于年齡,、太陽輻射因素引起的皮膚松弛、下垂,、皺紋,、干燥等皮膚衰老現(xiàn)象。3,、由于體內(nèi)異常黑色素分泌旺盛,，大量沉積皮膚表面，肌膚不能及時代謝出異常黑色素,，形成各種色斑,。4、由于長期戶外活動及皮膚保養(yǎng)不當(dāng)使膚質(zhì)受到損傷,，過早出現(xiàn)細(xì)紋,皮膚干燥,、脫皮、,、毛孔粗大等不良癥狀,。5、由于內(nèi)分泌功能紊亂,，皮膚膚質(zhì)差,、皮膚發(fā)油、發(fā)暗,，易長青春痘留下的色印,、色素沉著等。6,、由于生活無規(guī)律,吸煙等因素,造成的黑眼圈,眼袋等問題,。7.長期電腦旁工作，電腦輻射造成脫發(fā),，內(nèi)分泌紊亂問題,。濟(jì)南鼠尾膠原服務(wù)電話