鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,，它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞（特別是上皮細(xì)胞）貼壁的作用,，同時(shí)它也是一種天然的黏附劑，當(dāng)我們需要在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)放置小玻片,，制備細(xì)胞爬片時(shí),，可在瓶底涂一層膠原，再放上小玻片,，自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中,。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)可掌握鼠尾膠原的制備方法，以及如何切割小玻片,，并利用鼠尾膠原將其固定于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),。實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料：大鼠尾巴、剪刀,、鑷子,、止血鉗、彎頭吸管,、平皿,、三角燒瓶、燒杯,、量筒,、天平、生理鹽水,、75%酒精,、0.1%醋酸溶液、蓋玻片,、培養(yǎng)瓶,、鉆石筆、鼠尾膠原,。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：1,、制備鼠尾膠原。2,、切割小玻片。3,、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,，并且制作簡(jiǎn)便,，成本低廉。制備鼠尾膠原（兩個(gè)同學(xué)一組操作）。北京鼠尾膠原直銷廠家

鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用：膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,對(duì)于其抗氧化作用目前尚無(wú)相關(guān)研究,。目的:探討鼠尾膠原對(duì)過(guò)氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用,。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實(shí)驗(yàn)組)和普通培養(yǎng)皿(對(duì)照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導(dǎo)。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài),應(yīng)用MTT比色法檢測(cè)心肌細(xì)胞存活率,TUNEL法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡形態(tài),流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測(cè)丙二醛水平,Western-Blot檢測(cè)凋亡蛋白Bax,、Bcl-2的表達(dá),。結(jié)果與結(jié)論:兩組培養(yǎng)皿中,隨著過(guò)氧化氫濃度的增高,均可見細(xì)胞凋亡狀態(tài)明顯加重,細(xì)胞存活率及細(xì)胞內(nèi)過(guò)氧化氫活力明顯下降,細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞內(nèi)丙二醛水平明顯增高,Bcl-2/Bax比值明顯降低,呈劑量依賴性。北京鼠尾膠原價(jià)格鼠尾膠原蛋白是從老鼠尾巴提取出來(lái)的物質(zhì),。

鼠尾膠原蛋白耗子尾汁還能變得更加,，一種被稱作鼠尾膠原蛋白的“珍貴”液體就來(lái)自大鼠的尾巴，制作過(guò)程需要經(jīng)歷醋酸抽提,、氯化鈉沉淀和磷酸氫二鈉沉淀等步驟,，才能從鼠尾中獲得珍貴的膠原蛋白。這種膠原蛋白在37℃的條件下會(huì)形成3股螺旋結(jié)構(gòu),，可以用來(lái)當(dāng)作細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì),。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，細(xì)胞需要貼附在培養(yǎng)皿表面（懸浮培養(yǎng)細(xì)胞除外）才能完成生長(zhǎng)過(guò)程,，而有一些細(xì)胞卻總是不太給力,，自己完成不了貼壁過(guò)程或者貼壁困難，這個(gè)時(shí)候鼠尾膠原蛋白就能承擔(dān)起讓細(xì)胞更容易貼壁的作用,。這一步也被稱作涂層（coating）,，給培養(yǎng)皿涂上了一層膠原蛋白后，細(xì)胞就能更好地貼附上去,，除了培養(yǎng)皿,，一些需要使用海藻碳酸鈣微球培養(yǎng)得細(xì)胞，同樣也可以用鼠尾膠原蛋白協(xié)助細(xì)胞貼壁生長(zhǎng),。

鼠尾Ⅰ型膠原：組裝液的配置：1.50mmol/L甘氨酸+200mmol/L氯化鉀100mL,，用1mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸堿度至9.2,。2.膠原纖維的重構(gòu)吸取膠原10μL至小培養(yǎng)皿中，倒入0.5mL自組裝液，室溫放置20min,。予自組裝液自組裝24h。吸取0.05%戊二醛2mL至小培養(yǎng)皿中,，將自組裝24h的膠原浸泡在戊二醛中,。然后將膠原經(jīng)去離子水、50%乙醇,、100%乙醇依次漂洗后進(jìn)行TEM觀察,。3.生物礦化形成仿生骨材料靜滴配置鈣磷礦化液將25mL鈣液(10mmol/L二水氯化鈣+150mmol/L氯化鈉+50mmol/L三羥甲基氨基甲烷+0.02%三氮化鈉)倒入燒杯中，滴入聚丙烯(PAA)至濃度350μg/mL,；滴加1mol/L的氯化氫,，調(diào)節(jié)酸堿度至7.4,，然后緩慢滴入25mL磷液(6mmol/L磷酸氫二鈉)，約16滴/min,。加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

實(shí)驗(yàn)應(yīng)用：鼠尾膠原為底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞培養(yǎng)模式的建立目的建立以鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式,，為人鼻腔黏液纖毛運(yùn)輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法.方法制備鼠尾膠原并鋪片,，以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞，培養(yǎng)7天時(shí)進(jìn)行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),，應(yīng)用高速攝像技術(shù)測(cè)量纖毛擺動(dòng)頻率.結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻,，平均厚度約為1mm；HE染色可見上皮細(xì)胞呈單層向周圍爬開,；掃描電鏡下見纖毛上皮細(xì)胞呈不規(guī)則多角形,，纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細(xì)胞間為緊密連接；同一細(xì)胞任意兩點(diǎn)纖毛擺動(dòng)頻率是相同的,；同一來(lái)源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動(dòng)頻率是相同的.結(jié)論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立,，為今后研究鼻內(nèi)用藥對(duì)纖毛清理功能的影響提供了良好的方法和途徑。為了盡可能減少對(duì)動(dòng)物的傷害和方便試驗(yàn)人員的操作,，剪下一小段鼠尾是一個(gè)不錯(cuò)的選擇,。上海鼠尾膠原直銷價(jià)

制備鼠尾膠原：手持尾巴，用止血鉗夾住鼠尾的,，折斷尾骨后拉出尾腱,。北京鼠尾膠原直銷廠家

膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同，每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,，其中每3個(gè)氨基酸殘基形成一圈螺旋,。3條左手螺旋再扭在一起形成一個(gè)右手大螺旋。這樣的螺旋稱為3股螺旋,。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內(nèi)部,。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃，這些棒狀分子首尾相連,，并側(cè)向排列形成膠原微絲（其直徑可從50埃至數(shù)千埃）,。膠原分子在兩端及沿軸向每隔680埃的距離存在極性區(qū)，這些極性區(qū)能和重金屬離子結(jié)合,，使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu),。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,，并且制作簡(jiǎn)便,，成本低廉。北京鼠尾膠原直銷廠家