細胞凍存配制含10%DMSO或甘油的細胞凍存液，4℃預(yù)冷（新鮮配制的凍存液會產(chǎn)生大量的熱）；取對數(shù)生長期的細胞，用細胞消化酶將單層生長的細胞消化下來,；懸浮細胞則直接將細胞收集到離心管中；離心1200rpm,，6min,；去除上清液，逐漸加入適量預(yù)冷的細胞凍存液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻,，計數(shù),，調(diào)節(jié)凍存液中的細胞終濃度為5×10e6/ml~1×10e7/ml；將細胞分裝入凍存管中,，每管1~1.5ml,；在凍存管上標(biāo)明細胞的名稱、凍存時間及操作人員姓名,；凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min,；到達-80℃時，則可迅速放入液氮中,。同時另一些保護劑不能穿透細胞,。深圳無血清細胞凍存液生產(chǎn)廠家

細胞凍存，我們應(yīng)該注意哪些事項：DMSO快速稀釋會對細胞造成滲透性損傷,，使存活率下降50%,。對于DMSO凍存的細胞，復(fù)蘇后應(yīng)緩慢稀釋成細胞懸液：1）凍存液：培養(yǎng)基=1:1稀釋成細胞懸液后離心,，然后重懸至培養(yǎng)皿中培養(yǎng),，隔天換液；2）凍存液：培養(yǎng)基=1:10稀釋成細胞懸液,，不用離心,，直接放置到培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)2-4小時后，換液,。上述兩種方法都是比較常用的細胞復(fù)蘇方法,，后者更適用于原代細胞或比較難養(yǎng)的細胞。液氮內(nèi)的細胞凍存較長時間不要超過半年,，凍存在液氮中的細胞應(yīng)一段時間內(nèi)進行更替,。一個細胞系在培養(yǎng)一個月后，可復(fù)蘇一管新的細胞確保其質(zhì)量沒有發(fā)生太大變化,，傳代幾次后,，再凍存留種。正規(guī)無血清細胞凍存液廠家無血清凍存液特性：不含動物成分,。

所含化學(xué)成分明確,，無動物源性成分，可一步實現(xiàn)細胞凍存并長期在-80℃冰箱保存,，保護細胞免受冰晶和溶質(zhì)損傷,，適用于大多數(shù)常規(guī)細胞。LiveCyteTM（LC-1602）是原代細胞及干細胞**凍存液,，可進一步提高原代細胞和干細胞凍存效率,。產(chǎn)品優(yōu)點1,、省去繁瑣的降溫步驟，可直接放置于-80°C冰箱,，節(jié)省時間和精力。2,、即用型,，無需現(xiàn)配，操作方便,，可減少實驗中因操作引起的污染,。3、在多種哺乳細胞系中經(jīng)過性能驗證,，其復(fù)蘇率和活率達90%以上,。

無血清細胞凍存液的優(yōu)點有哪些呢：很多所使用的傳統(tǒng)的細胞凍存液的成份主要是：新鮮的培養(yǎng)基，其中含有10%的胎牛血清和5-10%的DMSO,。凍存的方法：將冷凍管置于4℃條件喜愛10分鐘,，接著在-20℃的條件下30分鐘，-80℃的條件下保存16-18個小時（或隔夜保存也可以）,，較后再液氮的環(huán)境中進行長期的儲存,。需要注意在-20℃的環(huán)境下保存不可超過1個小時，主要用以防止冰晶產(chǎn)生過大,，造成細胞大量的死亡,。對于無血清的細胞凍存液來說，其所含有的成分是：不含血清,，含DMSO,、pH調(diào)節(jié)劑、葡萄糖等各種細胞營養(yǎng)成分等,。其中不含有動物來源性的蛋白,，所以能夠減少各類的細菌、霉菌,、支原體等帶來的污染,，而且可以確保凍存細胞的安全。比較通用于各種動物的細胞株,?？梢苑乐够驕p少冷凍冰晶對細胞的損傷作用。

無血清快速細胞凍存液,，是一種新型的快速凍存細胞的保護液,，可將細胞置于-80^C直接冷凍保存。NM4100內(nèi)含天然抗凍蛋白（Naturalantifrereprotein）,，不含動物來源的血清成分,，能夠有效提高細胞凍存活率和復(fù)蘇活力，減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,，確保凍存細胞安全,，能夠滿足大部分體外培養(yǎng)細胞的凍存需求。無血清凍存液使用方法：1,、收集懸浮細胞或貼壁細胞,，離心去除上清培養(yǎng)液。2,、加入適量的細胞凍存液,，重懸細胞，調(diào)節(jié)密度至1-5x10*↑/mL,。3,、將加有凍存液的細胞懸液分裝至凍存管中。4,、將凍存管直接轉(zhuǎn)移至-80C水箱中冷凍保存,。5、儲存條件：2-8C保存,，年有效：-20C保存,，兩年有效。無血清快速細胞凍存液：減少各類病毒,、霉菌和支原體等的污染,，確保凍存細胞安全。開封無血清細胞凍存液單價

無血清細胞凍存液產(chǎn)品特色：即用型,，無需現(xiàn)配,，即開即用。深圳無血清細胞凍存液生產(chǎn)廠家

細胞凍存經(jīng)驗談:選對凍存培養(yǎng)基才是王道：研究人員經(jīng)常需要冷凍細胞并保存,，以供后續(xù)實驗或臨床使用,。基本過程相當(dāng)簡單：慢慢冷凍細胞,，將凍存管放入液氮中,，并在需要時快速解凍。凍存培養(yǎng)基能支持細胞并防止冰晶形成,。不過,，Malfavon的體驗告訴我們，使用不同的凍存培養(yǎng)基,，結(jié)果那可是大不同,。一些經(jīng)驗老道的研究人員自己制備凍存培養(yǎng)基。不過,，那些面對脆弱細胞（比如原代和多能細胞）的研究人員,，則更喜歡購買標(biāo)準(zhǔn)化的商業(yè)產(chǎn)品,。一些非常敏感的細胞系也許能從添加物中受益，以避免細胞在解凍時凋亡,。深圳無血清細胞凍存液生產(chǎn)廠家