無(wú)血清細(xì)胞凍存液,,通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株(tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞),,凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存(>5年)。CellFreezingMedium配方成分明確,,不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白,,Chemicalbook不含血清,可減少各類細(xì)菌,、病毒和支原體等污染,,保證凍存細(xì)胞的安全。該凍存液含DMSO,、葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分,,提高細(xì)胞存活率和活力,亦適合于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞,。細(xì)胞凍存是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中的一個(gè)常規(guī)技術(shù),,通常細(xì)胞凍存液的配方是由胎牛血清加上DMSO組成,由于血清含有異源成分且生長(zhǎng)過(guò)程中可能帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)Chemicalbook,,故傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存配方并不適于體內(nèi)研究,。本產(chǎn)品完全由化學(xué)成分組成,無(wú)動(dòng)物來(lái)源,,目前測(cè)試可以很好的凍存T細(xì)胞,,NK細(xì)胞以及MSC等細(xì)胞。無(wú)血清凍存液用途:無(wú)血清細(xì)胞凍存液用于醫(yī)院樣本庫(kù)細(xì)胞樣本保存,。開封無(wú)血清細(xì)胞凍存液直銷廠家
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):1,、細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題:教科書中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml-15m培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附,。2,、復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過(guò)多,,細(xì)胞濃度過(guò)低,,不利于細(xì)胞的貼壁,。3、加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題:這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題是DMSO的濃度,,從如果你加培養(yǎng)基的太少,,那么DMSO的濃度就會(huì)比較大,就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),,從以前的資料來(lái)看,,DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響,還有一個(gè)說(shuō)法是1%,。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度,。鄭州正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)凍存細(xì)胞可直接存放于-80℃冰箱,穩(wěn)定保存數(shù)年,。
使用方法:1)細(xì)胞超凈臺(tái)無(wú)菌環(huán)境,,1.5mlEP管內(nèi)加入細(xì)胞混懸劑均勻混懸細(xì)胞,細(xì)胞終濃度為5×106個(gè)/ml,,混懸液體積為200μl,。細(xì)胞凍存劑冰水混合物中預(yù)冷,逐滴加入細(xì)胞凍存劑800μl,,細(xì)胞混懸劑與細(xì)胞凍存劑的體積比控制在1:4,。2)開啟程序性降溫,降溫速率為1℃/min,,較后降溫至-80℃以下進(jìn)行凍存,。將比較例1凍存后細(xì)胞的復(fù)蘇率與實(shí)施例5凍存后細(xì)胞的復(fù)蘇率進(jìn)行對(duì)比,具體結(jié)果如附圖1所示,,可見采用本發(fā)明的凍存方法能夠明顯提高細(xì)胞的復(fù)蘇率,。其他實(shí)施例通過(guò)與比較例1進(jìn)行比較,也得到相同的試驗(yàn)結(jié)果,。本發(fā)明的凍存方法不僅可以明顯提高凍存后細(xì)胞復(fù)蘇率,,同時(shí)還可減少不同批次細(xì)胞凍存復(fù)蘇率不穩(wěn)定、以及避免由血清中的支原體,,細(xì)菌,,朊細(xì)菌及其他細(xì)菌顆粒引發(fā)的污染。
無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞復(fù)蘇方法:1,、從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,,立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍。2,、待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,,立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,混合均勻,。3,、離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,,3~5min),,移去上清液。4,、清洗細(xì)胞,,充分洗凈殘留凍存液。5,、加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,,使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后,,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中,。6,、鏡檢后,,研究者可根據(jù)各自方法和需要來(lái)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。鏡檢后,,研究者可根據(jù)各自方法和需要來(lái)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),。
無(wú)血清細(xì)胞凍存液與含血清細(xì)胞凍存液對(duì)比:傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液是使用培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例混合,,其中DMSO的含量是10%,,血清的含量是10%,統(tǒng)稱為含血清細(xì)胞凍存液,。含血清細(xì)胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法,,如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,然后移至-20℃冰箱30分鐘,,再移至-80℃冰箱保存16-18個(gè)小時(shí)(或隔夜),,較后才移至液氮罐中進(jìn)行長(zhǎng)期的儲(chǔ)存??梢?,含血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞時(shí)遇到的問(wèn)題:1.凍存細(xì)胞時(shí)需現(xiàn)配凍存液(如購(gòu)買市面上通用的含血清細(xì)胞凍存液,此步可省略),。2.需要程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮),,步驟繁瑣,耗時(shí)耗力,。3.含血清,,細(xì)胞污染(病毒、霉菌和支原體等)的風(fēng)險(xiǎn)更高,。4.血清批次,、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異,。5.需液氮凍存,且不能原位(如孔板)凍存,。無(wú)血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:通常細(xì)胞凍存液的配方是由胎牛血清加上DMSO組成,。南京無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家批發(fā)價(jià)
待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,立即加入1 ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,。開封無(wú)血清細(xì)胞凍存液直銷廠家
無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液凍存液成分,。無(wú)血清細(xì)胞,無(wú)血清干細(xì)胞及MSC凍存液,。保存條件:儲(chǔ)存于4℃以下,。質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,為期3年,。3個(gè)月以上沒(méi)有使用凍存液計(jì)劃時(shí),,盡可能冷凍保存。為避免重復(fù)凍融過(guò)程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低,,推薦將100ml產(chǎn)品分裝小瓶后,,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。無(wú)血清細(xì)胞凍存液,,細(xì)胞凍存與復(fù)蘇后,,平均活細(xì)胞回收比例超過(guò)80%。與含血清凍存液比較,,BI無(wú)血清凍存液細(xì)胞存活率都有較佳的表,,BI無(wú)血清細(xì)胞凍存液也適用于動(dòng)物血清培養(yǎng)的細(xì)胞凍存。開封無(wú)血清細(xì)胞凍存液直銷廠家