拭子RNA提取試劑的選擇,?拭子樣本的量與提取的核酸量成正比,如果要提高核酸得率,,也可通過增加樣本量來實(shí)現(xiàn),。一般先取一根拭子的涮洗液樣本,然后進(jìn)行提取,,如結(jié)果不理想可考慮增加樣本量或重新采樣,。但如果增加樣本量或重新采樣還不能得到滿意結(jié)果,應(yīng)及時(shí)考慮更換試劑盒,。目前國內(nèi)常用的拭子核酸提取試劑有Q,、Biog等。根據(jù)我們的經(jīng)驗(yàn),,Q和T品牌試劑盒的拭子RNA提取得率(一根口腔拭子在口咽部來回刮擦10次)在0.5-3.5ug,。同樣處理的口咽拭子,Biog試劑盒的提取得率在1-4ug,,基本上都能滿足下游PCR相關(guān)實(shí)驗(yàn)的要求,。RNA由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。開封RNA提取試劑產(chǎn)品介紹
RNA快速提取試劑盒:隨著對小RNA的研究的逐漸深入,,小RNA的分離逐漸成為一種需求,,百泰克利用雄厚的研發(fā)實(shí)力,開發(fā)出高效快捷的小RNA分離純化試劑盒,,對各種不同來源的樣品(動(dòng)物,、植物、細(xì)胞等)均取得滿意的效果,。miRNA提取試劑盒采用自創(chuàng)的結(jié)合洗脫技術(shù),,對小RNA,,包括RNA(miRNA)、smallinterferingRNA(siRNA),、smallnulcearRNA(snRNA)均能很好的回收,。產(chǎn)品特點(diǎn):高效分離小RNA,同時(shí)分離總RNA,。富集200nt以下的小RNA,,增加其用于下游實(shí)驗(yàn)的濃度??焖佟?0分鐘完成實(shí)驗(yàn),。可用于miRNA,、siRNA,、shRNA和snRNA分析。適用于各種來源的樣品,。開封RNA提取試劑產(chǎn)品介紹RNA提取試劑注意事項(xiàng):需自備氯仿,,異丙醇,DEPC,,75%乙醇(DEPC水配制),,和DEPC水。
昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:將50~300mg昆蟲組織放入10~15mL塑料離心管中,,加入1mL溶液A,,然后用勻漿器勻漿5~20秒。勻漿時(shí)會產(chǎn)生泡沫,,但不影響提取效果,。也可以使用液氮硯磨法破碎昆蟲組織,硯磨完后加入1mL溶液A,。注意:溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能會產(chǎn)生沉淀,,使用前必須放在65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用,。將勻漿物或硯磨物轉(zhuǎn)移至干凈的1.5mL塑料離心管中(可以不必轉(zhuǎn)移非液體的細(xì)胞碎片)。在離心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自備氯仿,,在振蕩器上振蕩30秒混勻,,此時(shí)溶液呈均勻的乳濁狀。振蕩器振蕩時(shí)必須使管底溶液震蕩起來,。室溫12000rmp離心3~5分鐘,,兩相間將有約5-10毫米厚的細(xì)胞破碎物。將上清液(約0.6mL)轉(zhuǎn)移到另一干凈的1.5mL塑料離心管中,,下層有機(jī)相和中間層含有DNA,、蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì),,避免觸及或吸取。較好留下100μL上清液不取,。加入等體積的溶液C,,充分顛倒混勻。
Trizol是一種總RNA抽提試劑,,內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì),,能迅速裂解細(xì)胞,壓制細(xì)胞釋放出的核酸酶活性,。目前常用Trizol法進(jìn)行提取組織或細(xì)胞中的RNA,。原理:在勻質(zhì)化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,,同時(shí)能破壞細(xì)胞及溶解細(xì)胞成分,。加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機(jī)相,。RNA存在于水相中,。水相轉(zhuǎn)移后,RNA通過異丙醇沉淀回收,。移去水相后,,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,加入異丙醇沉淀可從有機(jī)相得到蛋白質(zhì),。異硫氰酸胍氯化銫超速離心法:原理:使用蛋白質(zhì)變性劑異硫氰酸胍有效壓制RNA酶的活性,,經(jīng)過起始密度為1.78g/ml的氯化銫介質(zhì),進(jìn)行密度梯度超速離心,,RNA沉淀于管底,,而DNA與蛋白質(zhì)在上清液中。使用這種方法,,不但能得到高質(zhì)量的RNA,,而且能同時(shí)分離出細(xì)胞染色體DNA。拭子RNA提取試劑的選擇,?操作簡便性,。
與DNA不同,RNA一般為單鏈長分子,,很多RNA也需要通過堿基配對原則形成一定的二級結(jié)構(gòu)乃至三級結(jié)構(gòu)來行使生物學(xué)功能,。RNA是以DNA的一條鏈為模板,以堿基互補(bǔ)配對原則,,轉(zhuǎn)錄而形成的一條單鏈,,主要功能是實(shí)現(xiàn)遺傳信息在蛋白質(zhì)上的表達(dá),是遺傳信息向表型轉(zhuǎn)化過程中的橋梁,。在此過程中,,轉(zhuǎn)運(yùn)RNA是攜帶與三聯(lián)體密碼子對應(yīng)的氨基酸殘基與正在進(jìn)行翻譯的mRNA結(jié)合,,而后核糖體RNA將各個(gè)氨基酸殘基通過肽鍵連接成肽鏈進(jìn)而構(gòu)成蛋白質(zhì)分子。有些生物,,例如一些病菌,,也直接使用RNA作為遺傳信息的載體,而不是DNA,。很多RNA也需要通過堿基配對原則形成一定的二級結(jié)構(gòu)乃至三級結(jié)構(gòu)來行使生物學(xué)功能,。蕪湖正規(guī)RNA提取試劑廠家
細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn):有效分離和提取細(xì)胞質(zhì)RNA,與細(xì)胞核RNA,。開封RNA提取試劑產(chǎn)品介紹
細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn):1.有效分離和提取細(xì)胞質(zhì)RNA,,與細(xì)胞核RNA。2.方便快捷的離心柱操作方式,。3.提取的RNA,,品質(zhì)高,產(chǎn)量多,。4.試劑盒不含苯酚,,可提取所有RNA(含RNA)。5.純化的RNA可用于任何應(yīng)用,,包括RT-PCR,,qRT-PCR,RNA-Seq,,陣列等,。6.細(xì)胞質(zhì)RNA不含DNA,可直接用于RT-PCR/qRT-PCR,。7.試劑盒可用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞或者組織樣品的提取,。在某些情況下,研究者們更希望能夠提取特定分餾的RNA,,而不是總RNA,。例如,在一些表達(dá)譜研究中,,較好能夠提取成熟的細(xì)胞質(zhì)(Cytoplasmic)RNA,。或者,,在研究分析未剪接的RNA前體時(shí),提取細(xì)胞核(Nuclear)RNA會是一個(gè)更好的選擇,。然而,,市面上絕大多數(shù)廠家只能為您分別提供2種試劑盒來提取細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核的RNA,不光費(fèi)用高昂,,而且浪費(fèi)大量的材料與時(shí)間,。該EpiQuik?總RNA提取試劑盒提供了一種快速,,簡單,經(jīng)濟(jì)有效的方法,。開封RNA提取試劑產(chǎn)品介紹