無血清細(xì)胞凍存液：采用patent的凍存配方，用包括重組人血白蛋白等多種蛋白組分替代了血清的用途。用包括DMSO在內(nèi)的復(fù)合凍存保護(hù)劑替代了單一的DMSO的保護(hù)作用。復(fù)合保護(hù)劑的內(nèi)部保護(hù)劑,，易于穿透細(xì)胞膜，避免在細(xì)胞凍存過程中細(xì)胞內(nèi)部的水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,；外部保護(hù)劑,，可在溶液形成冰晶之前,，在細(xì)胞膜外部競爭性的結(jié)合細(xì)胞膜表面的水分子，從而降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度,，減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量,。在細(xì)胞內(nèi)部與外部的協(xié)同保護(hù)作用下，明顯降低了溫度迅速下降與溫度上升對細(xì)胞的損害,，因此大幅度提高了細(xì)胞經(jīng)過凍存后的復(fù)蘇存活率,。同時另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞。石家莊正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液供應(yīng)商

細(xì)胞凍存：取出凍存管,，注明細(xì)胞名稱,，代數(shù)，日期,。離心后,，以無菌吸管吸棄上清，不要吸到底部的細(xì)胞沉淀,。將細(xì)胞沉淀與凍存液充分混勻,，根據(jù)計數(shù)結(jié)果，將細(xì)胞總數(shù)調(diào)節(jié)成細(xì)胞數(shù)量為5-10*105/ml為宜,。將細(xì)胞凍存懸液分裝進(jìn)細(xì)胞凍存管中,，一般2ml的凍存管中裝入1-1.5ml凍存液為宜。嚴(yán)密封口后,，使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,，使溫度每分鐘大約降低1℃?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入異丙的醇凍存盒中，然后將凍存盒置于–80℃條件下過夜,。若無凍存盒及其他凍存裝置,，可以先將凍存管置于4℃30min，再-20℃凍存1h直至完全冷凍,，再轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱過夜。第二天將已經(jīng)冷凍的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到液氮容器中,，置于液氮上方的氣相空間中儲存,。無血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能：2-8℃即可穩(wěn)定保存，無需冷凍,，即取即用,。

含血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞時遇到的問題：1.凍存細(xì)胞時需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細(xì)胞凍存液，此步可省略),。2.需要程序降溫（4℃→-20℃→-80℃→液氮）,，步驟繁瑣,，耗時耗力。3.含血清,，細(xì)胞污染(細(xì)菌,、霉菌和支原體等)的風(fēng)險更高。4.血清批次,、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異,。5.需液氮凍存，且不能原位（如孔板）凍存,。Cellregen無血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動物源成分,，含DMSO、糖類,、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液,。Cellregen無血清細(xì)胞凍存液的凍存方法是：將細(xì)胞凍存懸液（凍存管或孔板）直接放置-80℃冰箱長期保存。

細(xì)胞凍存是將細(xì)胞放在低溫環(huán)境,，減少細(xì)胞代謝,，以便長期儲存的一種技術(shù)。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一,，起到了細(xì)胞保種的作用,。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一，利用凍存技術(shù)可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,，這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實驗,。目前現(xiàn)有技術(shù)中，細(xì)胞凍存液中的主要成分有10％二甲基亞砜(DMSO),、20％～90％胎牛血清(FBS),、剩余組分為完全培養(yǎng)基。培養(yǎng)基以及FBS可為細(xì)胞提供必要的營養(yǎng)物質(zhì),。DMSO是一種滲透性保護(hù)劑,，能夠降低細(xì)胞冰點，減少冰晶的形成,，從而達(dá)到降低細(xì)胞損傷的保護(hù)效果,。但FBS屬于動物源性物質(zhì)，成分比較復(fù)雜,，在臨床應(yīng)用上存在潛在的風(fēng)險,，也增加了污染的幾率，并且由于凍存液中含有動物血清,，會導(dǎo)致凍存液的成分存在不穩(wěn)定的因素,。無血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢：因不含血清，批次間差異小,。

細(xì)胞凍存秘籍：1.在倒置相差顯微鏡上每隔幾分鐘檢查酶處理的進(jìn)展情況,。一旦細(xì)胞變圓,，輕輕敲擊細(xì)胞瓶使其脫離塑料表面。加入5mL含血清的生長培養(yǎng)基滅活胰酶,?？赡苄枰獎×业囊埔翰僮鱽硎古囵B(yǎng)容器底部的剩余細(xì)胞脫落，或?qū)⒓?xì)胞團(tuán)塊分解成單細(xì)胞懸浮液,。胰酶的去除或失活對于冷凍細(xì)胞至關(guān)重要,。如果游離試劑不能直接滅活，可以通過下一步的離心去除,。2.用15ml離心管收集細(xì)胞,。取出樣本進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)，剩余的細(xì)胞懸液以約100×g離心5分鐘以獲得細(xì)胞沉淀,。離心時,，用細(xì)胞計數(shù)板對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)。使用臺盼藍(lán)染液檢查細(xì)胞的活性,。凍存液中使用的所有原料均應(yīng)符合臨床或藥物需求,。珠海正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液廠家

無血清凍存液使用方法：將加有凍存液的細(xì)胞懸液分裝至凍存管中。石家莊正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液供應(yīng)商

所含化學(xué)成分明確,，無動物源性成分,，可一步實現(xiàn)細(xì)胞凍存并長期在-80℃冰箱保存，保護(hù)細(xì)胞免受冰晶和溶質(zhì)損傷,，適用于大多數(shù)常規(guī)細(xì)胞,。LiveCyteTM（LC-1602）是原代細(xì)胞及干細(xì)胞**凍存液，可進(jìn)一步提高原代細(xì)胞和干細(xì)胞凍存效率,。產(chǎn)品優(yōu)點1,、省去繁瑣的降溫步驟，可直接放置于-80°C冰箱,，節(jié)省時間和精力,。2、即用型,，無需現(xiàn)配,，操作方便，可減少實驗中因操作引起的污染,。3,、在多種哺乳細(xì)胞系中經(jīng)過性能驗證，其復(fù)蘇率和活率達(dá)90%以上,。石家莊正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液供應(yīng)商