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來源: 發(fā)布時間:2025-05-19

外泌體(Exosome)是細胞主動分泌的囊泡樣小體,,大小均一,,直徑30-200nm,密度1.10-1.18g/ml,,來源普遍,,幾乎所有細胞都可分泌,在血液,,尿液,,唾液,腦脊液,,腹水,,乳汁等體液中普遍分布。外泌體較早在1986年發(fā)現(xiàn)于培養(yǎng)的綿羊紅細胞上清液中,。1996年,,研究者發(fā)現(xiàn)外泌體作為抗原呈遞因子參與T細胞依賴的抗一些病癥反應,開啟了外泌體蛋白研究的新天地,。2013年諾貝爾生物/醫(yī)學獎解答了細胞如何組織其內(nèi)部較重要的運輸系統(tǒng)之一——囊泡傳輸系統(tǒng)的奧秘,。外泌體的提取、分離方法:開發(fā)高效,、快速,、穩(wěn)定,并且保持外泌體結(jié)構(gòu)和生物功能完整性的方法,。溫州外泌體提取試劑廠家推薦

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外泌體提純試劑盒的特色與優(yōu)勢:純化和富集的完整血漿/血清,,尿液和細胞培養(yǎng)基中外泌體的可用于功能研究;樣本輸入量多樣,;無需耗時的超速離心,過濾或特殊注射器,;無需沉淀試劑,,也無需過夜培養(yǎng);無需蛋白酶處理,;適用于多種物種,;外泌體被純化并且不含任何其他RNA結(jié)合蛋白;可以使用NanoSight?或電子顯微鏡分析純化的外泌體,,以評估近似外泌體大小范圍和濃度,。外泌體(exosomes)是一種能被機體內(nèi)大多數(shù)細胞分泌的直徑大約為30~150nm的具有脂質(zhì)雙層膜的微小膜泡。它普遍存在并分布于各種體液中,,攜帶和傳遞重要的信號分子,,形成了一種全新的細胞間信息傳遞系統(tǒng),影響細胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進程密切相關。寧波外泌體提取試劑銷售廠家外泌體提純試劑盒的特色與優(yōu)勢:無需耗時的超速離心,,過濾或特殊注射器,。

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1983年,外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細胞中被發(fā)現(xiàn),,1987年Johnstone將其命名為“exosome”,。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中,。所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,,包括血液,、唾液、尿液,、腦脊液和乳汁中,。有關他們分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究,。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,,參與細胞間通訊,對外泌體的研究興趣日益增長,,無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā),。如何高效地提取外泌體是實現(xiàn)這項新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)化應用的關鍵

可以。為了能夠高效提取細胞培養(yǎng)上清中的外泌體,,磁珠可重復使用5次(同一樣品),。試劑盒里的緩沖液含5次提取需要的量。1mL體積以上細胞上清樣本建議進行濃縮后再回收,,提取時可進行反復抽提,,提高提取效率。用血液樣品進行實驗時,,需要根據(jù)磁珠狀況來判斷是否能重復利用,;若磁珠發(fā)生聚集,利用渦旋儀也無法使磁珠分散,,不建議繼續(xù)使用,。詳情參考操作說明書。太好了,,這樣實驗成本瞬間就降下來了,,那樣品純化所需的比較低量是?老師:使用旋轉(zhuǎn)器的需要500μL以上,,使用離心管混合器的需要100μL,。樣品量更少的情況下加TBS到所需比較低量后再使用ExosomeCapture固定化磁珠,。同學:電鏡分析需要外泌體的量是多少?外泌體提取色譜法是利用根據(jù)凝膠孔隙的孔徑大小與樣品分子尺寸的相對關系而對溶質(zhì)進行分離的分析的方法,。

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外泌體的提取主要包括以下幾種方式:一是超速離心法,,這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,,但是純度不足,,電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標準,,也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體,。二是過濾離心,這種操作簡單,、省時,,不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問題,。三是密度梯度離心法,,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期準備工作繁雜,,耗時,,量少。四是免疫磁珠法,,這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,,特異性高、操作簡單,、不需要昂貴的儀器設備,,但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性,不便進行下一步的實驗,。五是PS親和法,,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結(jié)合,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS,。該方法與免疫磁珠法相似,,獲得的外泌體形態(tài)完整,純度較高,。由于不使用變性劑,不影響外泌體的生物活性,,外泌體可用于細胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射,。2016.9《ScientificReports》雜志發(fā)表了該方法較新數(shù)據(jù),表明PS法可提取相當高純度的外泌體,。六是色譜法,,這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,,但是需要特殊的設備,應用不普遍,。由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體,,大于一般蛋白質(zhì)。廈門正規(guī)外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家

外泌體提?。焊鶕?jù)外泌體的大小,,從蛋白質(zhì)和其他大分子中分離外泌體。溫州外泌體提取試劑廠家推薦

人體內(nèi)多種細胞及體液均可分泌外泌體,,包括內(nèi)皮細胞,、免疫細胞、血小板,、平滑肌細胞等,。當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時,外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì),、核酸,、脂類等來調(diào)節(jié)受體細胞的生物學活性。外泌體介導的細胞間通訊主要通過以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結(jié)合,,進而靶細胞細胞內(nèi)的信號通路,。二是在細胞外基質(zhì)中,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,,剪切的碎片可以作為配體與細胞膜上的受體結(jié)合,,從而細胞內(nèi)的信號通路。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細胞膜上未能檢測出,。三是外泌體膜可以與靶細胞膜直接融合,,非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA溫州外泌體提取試劑廠家推薦