外泌體（Exosomes）是細(xì)胞分泌到胞外的一種囊泡（ExtracellularVesicles，EVs）,，其大小為30-150nm,，具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài)，含有豐富的內(nèi)含物（包括核酸,、蛋白和脂質(zhì)等），參與細(xì)胞間的分子傳遞,。外泌體普遍存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,，包括血液、唾液,、尿液,、乳汁等,，同時(shí)也存在于組織樣本中，如腦組織,、肌肉組織,、脂肪組織等。腦組織分離方法簡(jiǎn)述：將腦組織剪成薄片,，放入離心管中加上消化液進(jìn)行消化,，經(jīng)水浴、反復(fù)輕輕上下顛倒,，再用移液間斷緩慢吹吸至消化結(jié)束,。隨后加入培養(yǎng)基于消化液中，混勻,，置于冰上,。再進(jìn)行一系列的差速超速離心過(guò)程，包括除雜,、濾膜過(guò)濾,、超離等。較后用PBS重懸外泌體,，用重懸后的外泌體進(jìn)行下面的透射電鏡（TEM）,、納米粒徑追蹤分子（NTA）和markerWB鑒定。由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能,，使得它具有潛在的應(yīng)用價(jià)值,。溫州外泌體提取試劑銷(xiāo)售廠家

聚乙二醇（PEG）可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集細(xì)菌,，現(xiàn)在也被用來(lái)沉淀外泌體,，其原理可能與競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問(wèn)題：比如純度和回收率低,，雜蛋白較多（假陽(yáng)性）,，顆粒大小不均一，產(chǎn)生難以去除的聚合物,，機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等,，因此發(fā)表文章時(shí)易受質(zhì)疑。外泌體表面有其特異性標(biāo)記物（如CD63,、CD9蛋白）,，用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,，即可將外泌體吸附并分離出來(lái),。磁珠法具有特異性高、操作簡(jiǎn)便,、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn),，但是效率低,，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響，不利于下游實(shí)驗(yàn),，難以普遍普及,。唐山外泌體提取試劑單價(jià)外泌體的提取方法：密度梯度離心。

所有的細(xì)胞都能分泌外泌體,，但是不同細(xì)胞分泌的外泌體不管在數(shù)量上還是在內(nèi)含物中都具有很大的差異性,，這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣。外泌體普遍參與細(xì)胞間物質(zhì)運(yùn)輸與信息傳遞,，調(diào)控細(xì)胞生理活動(dòng),。同時(shí)，外泌體具有抗原提呈,、免疫逃逸,、誘導(dǎo)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化、促進(jìn)一些病癥發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用,；此外,，外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來(lái)進(jìn)行藥物遞送。外泌體相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)有哪些,？lexoRBase數(shù)據(jù)庫(kù)收集和描述人類(lèi)血液外泌體中所有長(zhǎng)的RNA,，包括circRNA、lncRNA和mRNA,。lEVpedia和Vesiclepedia數(shù)據(jù)庫(kù)匯總了不同囊泡研究中發(fā)現(xiàn)的蛋白,、mRNA、miRNA,、脂類(lèi)等信息,。lExoCarta數(shù)據(jù)庫(kù)主要收錄了包括人、大鼠,、小鼠,、綿羊等幾個(gè)物種的286個(gè)研究結(jié)果，涉及蛋白,、mRNA,、miRNA、脂類(lèi)等信息,。

外泌體與肺病預(yù)后：外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子,。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn)，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升,。此外,，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率,。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時(shí)發(fā)現(xiàn),，NY-ESO-1是其中對(duì)低生存率有顯著影響的標(biāo)志物,。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA，其中l(wèi)et-7f,、miR-30e-3p和miR-20b表達(dá)均下調(diào),，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者,，高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預(yù)后密切相關(guān),。外泌體的提取方法：多聚物沉淀法。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式,。一是超速離心法,，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,，但是純度不足,，電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),，也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體,。二是過(guò)濾離心，這種操作簡(jiǎn)單,、省時(shí),，不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問(wèn)題,。三是密度梯度離心法,，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,，耗時(shí),，量少。外泌體檢測(cè)作為一種新型的液體活檢熱點(diǎn)技術(shù)已被許多臨床科研機(jī)構(gòu)普遍地應(yīng)用于一些病癥和疾病的無(wú)創(chuàng)診斷,。外泌體提?。盒》肿涌蛇M(jìn)入凝膠中絕大部分孔洞，在柱中受到更強(qiáng)地滯留,，更慢地被洗脫出,。無(wú)錫正規(guī)外泌體提取試劑直銷(xiāo)廠家

靜置10～15分鐘，留取沉淀物備用,。溫州外泌體提取試劑銷(xiāo)售廠家

外泌體的提取主要包括以下幾種方式：一是超速離心法,，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,，但是純度不足,，電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),，也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過(guò)濾離心,，這種操作簡(jiǎn)單,、省時(shí)，不影響外泌體的生物活性,，但同樣存在純度不足的問(wèn)題,。三是密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高,，但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,，耗時(shí)，量少,。四是免疫磁珠法,，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整，特異性高,、操作簡(jiǎn)單,、不需要昂貴的儀器設(shè)備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性,，不便進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn),。五是PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合,，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS,。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態(tài)完整,，純度較高,。由于不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性,，外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射,。2016.9《ScientificReports》雜志發(fā)表了該方法較新數(shù)據(jù)，表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體,。六是色譜法,，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備,，應(yīng)用不普遍,。溫州外泌體提取試劑銷(xiāo)售廠家