鼠尾膠原：含細(xì)胞三維膠原凝膠的制備（以配制1mg/mL三維膠1mL為例）準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞，并放置于冰浴中,。將200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻,。再加入23μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中（混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,，初次使用時(shí)需要測(cè)定pH值）,。加入760μL的細(xì)胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,，加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。本品在室溫下pH中性時(shí)可迅速成膠，在操作過程中要盡量保持低溫,。保存條件4℃保存,，切勿凍存,，有效期一年。利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料,。蕪湖太原鼠尾膠原

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)：將培養(yǎng)器皿在室溫(25 度左右)下 放置 20 分鐘待膠凝固后,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是 10PBS,， 使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡,。 B．含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制 200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH 加到膠原溶液中，會(huì)由于 NaOH 不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)）,，立即 混勻,。再加入 23ul 10PBS 10培養(yǎng)液，混勻(混勻后pH 左右,，如果 PBS 或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,，初次使用時(shí)需要用 pH 試紙測(cè)試)。加入 760ul 的細(xì)胞懸浮液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫下放 20分鐘待膠凝固后，加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。 注意事項(xiàng)：在室溫下pH 中性時(shí)可迅速成膠，在操作過程中要 盡量保持低溫,。廈門鼠尾膠原推薦廠家可直接或間接參與細(xì)胞的附著,。

鼠尾膠原蛋白等實(shí)驗(yàn)技術(shù)應(yīng)用：干細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等多種「難伺候」的細(xì)胞,，以及一些組織在體外培養(yǎng)時(shí),，需要在模擬體內(nèi)環(huán)境的細(xì)胞外基質(zhì)中生長(zhǎng)，膠原蛋白和纖粘蛋白正是細(xì)胞外基質(zhì)的主要組成部分,，富含 1 型膠原蛋白大鼠尾部也成了實(shí)驗(yàn)室用膠原蛋白的較主要來源,。鼠尾取血剪下幾毫米小鼠尾巴、在小鼠尾靜脈上劃一道小口,、用注射器抽取的操作都可以得到這種鮮紅的,。它可以用于監(jiān)測(cè)小鼠血液成分的變化，確認(rèn)小鼠是否患上了 糖尿病或者某些治好能夠改變小鼠的血糖等,。比起心臟和眼部取血,，實(shí)驗(yàn)用鼠尾尖取血的取血量較小，但取血之后,，小鼠還能繼續(xù)下一步建?；蛘邔?shí)驗(yàn)，完全沒有性命之憂,。

要準(zhǔn)備的器具：組織剪2把,，有齒鑷1把,，無齒鑷1把，200 ml燒杯1個(gè),，培養(yǎng)皿1個(gè),，帶蓋廣口瓶1個(gè)，離心管,、小瓶數(shù)個(gè),，滴管若干。以上物品須經(jīng)嚴(yán)格高壓消毒滅菌,。需配制的液體0.1％醋酸溶液,。經(jīng)44.48N10 min高壓蒸汽滅菌(或是過濾除菌)后備用。此外還有用消毒雙蒸水配制75％酒精溶液,。取大鼠尾巴,，洗凈，置75%酒精浸泡消毒后,，手持尾巴,，用止血鉗夾住尾巴較高，折斷尾骨后拉出尾腱,，將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中,，稱尾腱的重量，按每克尾腱50ml 的比例加入0.1%醋酸溶液,，搖晃,，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置48 小時(shí),，離心,。吸取其上清，分裝至小瓶,，4℃保存,。上述制備過程均在無菌條件下完成。膠原蛋白按其應(yīng)用可以分為食品級(jí),、一般級(jí),、醫(yī)藥級(jí)。

膠原蛋白（Collagen）是結(jié)締組織和內(nèi)臟部位外基質(zhì)的主要成分,，但在皮膚,、肌腱、骨骼中分布*為普遍,。膠原蛋白在結(jié)構(gòu)和遺傳學(xué)上被分為不同類型,，I型膠原蛋白（Collagen, Type I）結(jié)構(gòu)上是由2個(gè)α1鏈和1個(gè)α2鏈組成的異源多聚體，在37℃中性條件下可形成3股螺旋結(jié)構(gòu)，被普遍用于多種細(xì)胞的培養(yǎng)基質(zhì),，如肝細(xì)胞,、纖維細(xì)胞、脊髓神經(jīng)節(jié),、雪旺氏細(xì)胞等,。另外,，I型膠原蛋白在細(xì)胞生長(zhǎng)、分化,、遷移和組織態(tài)的發(fā)生等方面也具有重要應(yīng)用,。注意事項(xiàng)：1） 為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。2） 整個(gè)操作請(qǐng)于冰上進(jìn)行,，因室溫下鼠尾膠原I可迅速成膠,。3） 整個(gè)操作請(qǐng)?jiān)跓o菌環(huán)境下無菌操作，避免污染以影響細(xì)胞生長(zhǎng),。我們不建議用過濾的方法無菌化,。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會(huì)導(dǎo)致丟失蛋白。鄭州鼠尾膠原直銷價(jià)

制備鼠尾膠原：吸去生理鹽水,，將尾腱稱重（0.5-1克）,。蕪湖太原鼠尾膠原

鼠尾Ⅰ型膠原：組裝液的配置：1.50 mmol/L甘氨酸+200 mmol/L氯化鉀 100 mL，用1 mol/L 氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸堿度至9.2,。2.膠原纖維的重構(gòu)吸取膠原10μL至小培養(yǎng)皿中,，倒入0.5 mL自組裝液，室溫放置20 min,。予自組裝液自組裝24 h,。吸取0.05%戊二醛2 mL至小培養(yǎng)皿中，將自組裝24 h的膠原浸泡在戊二醛中,。然后將膠原經(jīng)去離子水,、50%乙醇、100%乙醇依次漂洗后進(jìn)行TEM觀察,。3.生物礦化形成仿生骨材料靜滴配置鈣磷礦化液將25mL鈣液(10 mmol/L 二水氯化鈣+150 mmol/L氯化鈉+50 mmol/L三羥甲基氨基甲烷+0.02%三氮化鈉)倒入燒杯中,，滴入聚丙烯(PAA)至濃度350 μg/mL；滴加1 mol/L的氯化氫,，調(diào)節(jié)酸堿度至7.4,，然后緩慢滴入25 mL磷液(6 mmol/L磷酸氫二鈉)，約16滴/min,。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄，并且制作簡(jiǎn)便,，成本低廉,。蕪湖太原鼠尾膠原