大腸桿菌（E,、coli）,，是動物腸道中的正常寄居菌,，其中很小一部分在一定條件下引起疾病,。大腸桿菌的血清型能夠引起人體或動物胃腸道染上，主要是由特定的菌毛抗原,、致病性毒等染上引起的,，除胃腸道染上以外，還會引起尿道染上,、關節(jié)炎,、腦膜炎以及敗血型染上等。目前國際公認的分類,，主要有六個種類的大腸桿菌,，即能夠致使胃腸道染上的腸道致病性的大腸桿菌（EPEC）、腸道產(chǎn)有毒的大腸桿菌(ETEC),、腸道侵襲性的大腸桿菌(EIEC),、腸道出血性的大腸桿菌(EHEC)、腸集聚性的大腸桿菌（EAEC）以及近年來發(fā)現(xiàn)的腸產(chǎn)志賀樣毒同時具有一定侵襲力的大腸桿菌（ESIES）,。另外,，還有能夠致使尿道染上的尿道致病性的大腸桿菌(UPEC)，以及至新命名的腸道集聚性的黏附大腸桿菌（EAggEC）,。金黃色葡萄球營養(yǎng)要求不高,，在普通培養(yǎng)基上生長良好。少根根霉戴爾變種菌株

枯草芽孢桿菌,，是芽孢桿菌屬的一種,，CAS號68038-70-0。單個細胞0.7~0.8×2~3微米,，著色均勻,。無莢膜,，周生鞭毛，能運動,。革蘭氏陽性菌,，芽孢0.6~0.9×1.0~1.5微米，橢圓到柱狀,，位于菌體中心或稍偏,，芽孢形成后菌體不膨大。菌落表面粗糙不透明,，污白色或微黃色,，在液體培養(yǎng)基中生長時，常形成皺醭,。需氧菌?？衫玫鞍踪|(zhì),、多種糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚,。在遺傳學研究中應用普遍,，對此菌的嘌呤核苷酸的合成途徑與其調(diào)節(jié)機制研究較清楚。普遍分布在土壤及腐爛的有機物中,，易在枯草浸汁中繁殖,，故名。白蟻鏈霉菌在生物工程中,，大腸桿菌被普遍用于基因復制和表達的宿主,。

金黃色葡萄球菌對高溫有一定的耐受能力，在80℃以上的高溫環(huán)境下30min才可以將其徹底殺死,，另外金黃色葡萄球菌可以存活于高鹽環(huán)境,，較高可以耐受15%濃度的NaCl溶液。由于細菌本身結構特點,，利用70%的乙醇可以在幾分鐘之內(nèi)將其快速殺死,。金黃色葡萄球菌代謝類型為需氧或兼性厭氧，對環(huán)境要求不高,，37℃為較適生長溫度,，能在各種惡劣環(huán)境中存活下來，因此,，用一般的營養(yǎng)瓊脂即可正常培養(yǎng)細菌,。金黃色葡萄球菌是常見的食源性致病菌，普遍存在于自然環(huán)境中,。金黃色葡萄球菌在適當?shù)臈l件下,，能夠產(chǎn)生腸有害元素，引起食物中毒。近幾年,，金黃色葡萄球菌引發(fā)的食物中毒報道層出不窮,，由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒占食源性微生物食物中毒事件的25%左右，金黃色葡萄球菌成為只次于沙門氏菌和副溶血桿菌的第三大微生物致病菌,。

銅綠假單胞桿菌與其他病毒無交叉反應,，無非特異性擴增；檢測靈敏度可達10~100拷貝,；該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,，可同時進行多個檢測；多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒,。PCR反應液請在冰中配制,，然后置于PCR反應儀上進行PCR反應。這種冷啟動法與熱啟動法相結合,，更能有效地減少PCR過程中的非特異性反應,，增強PCR擴增的特異性，能得到良好的PCR結果,。因擴增片段的大小,、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同,。根據(jù)模板DNA的量以及擴增片段的大小,，設定25～30個循環(huán)。如果循環(huán)次數(shù)太少,，擴增量不足,；如果循環(huán)次數(shù)太多，則會出現(xiàn)Smear,。亞硝酸鈉誘變對金黃色葡萄球的抗藥性是有利的,。

金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus，S.aureus)也稱“金葡菌”,，隸屬于葡萄球菌屬,，是革蘭氏陽性菌表示，為一種常見的食源性致病微生物,。該菌較適宜生長溫度為37℃,，pH為7.4，耐高鹽,，可在鹽濃度接近10%的環(huán)境中生長,。金黃色葡萄球菌常寄生于人和動物的皮膚、鼻腔,、咽喉,、腸胃,、癰、化膿瘡口中,，空氣,、污水等環(huán)境中也無處不在。我國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會于2013年發(fā)布《食品安全國家標準食品中致病菌限量》(GB29921-2013),，在國標中制定了金黃色葡萄球菌的限量標準：規(guī)定熟肉制品,、熟制水產(chǎn)品、熟制糧食制品等8大類食品中,，同批次采集5份樣品,，每份樣品中的金黃色葡萄球菌濃度均不得超出100CFU/g，只允許其中1份樣品在100~1000CFU/g之間,。不同種的金黃色葡萄球產(chǎn)生不同的色素,，如金黃色、白色,、檸檬色等,，色素為脂溶性。就地堆肥地芽胞桿菌

銅綠假單胞菌在普通瓊脂培養(yǎng)基上生長18~24h可以見到扁平,、濕潤的菌落。少根根霉戴爾變種菌株

制備大腸桿菌感受態(tài)細胞的關鍵是什么,？質(zhì)粒DNA的質(zhì)量和濃度：用于轉化的質(zhì)粒DNA應主要是超螺旋態(tài)的,，轉化率與外源DNA的濃度在一定范圍內(nèi)成正比，但當加入的外源DNA的量過多或體積過大時,，則會使轉化率下降,。一般地，DNA溶液的體積不應超過感受態(tài)細胞體積的5%,，1ng的cccDNA即可使50ul的感受態(tài)細胞達到飽和,。對于以質(zhì)粒為載體的重組分子而言，分子量大的轉化效率低,，實驗證明,，大于30kb的重組質(zhì)粒將很難進行轉化。此外,，重組DNA分子的構型與轉化效率也密切相關,，環(huán)狀重組質(zhì)粒的轉化率較分子量相同的線性重組質(zhì)粒高10~100倍，因此重組DNA大都構成環(huán)狀雙螺旋分子,。少根根霉戴爾變種菌株

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