枯草芽孢桿菌對(duì)土壤脲酶活性的影響，應(yīng)用土壤酶作為監(jiān)測(cè)指標(biāo)，評(píng)價(jià)農(nóng)藥的生態(tài)毒理效應(yīng)已成為環(huán)境科學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一,。而脲酶屬于土壤中研究得比較深入的一種水解酶類,，是惟一對(duì)尿素在土壤中轉(zhuǎn)化及尿素利用率有重大影響的酶。尿素施人土壤后,，在脲酶的催化作用下,，迅速分解成二氧化碳和氨，所以土壤脲酶活性的降低,，不僅可使尿素水解減緩,，令其水解產(chǎn)物更多地被土壤吸附而有效減少尿素水解產(chǎn)物氨的揮發(fā)損失，也可能相應(yīng)減少水解產(chǎn)物NH硝化作用潛勢(shì),?？莶菅挎邨U菌能為以單細(xì)胞藻類為主的浮游植物提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)繁殖,。浮游植物的光合作用,，又為池內(nèi)底棲水產(chǎn)動(dòng)物的呼吸、有機(jī)物的分解提供氧氣,，從而使養(yǎng)殖水體形成一個(gè)良性的生態(tài)循環(huán),。銅綠假單胞菌的O抗原包含脂多糖，有特異性,。勒克瑙曲霉菌種

枯草芽孢桿菌為接種微生物,，對(duì)菲與苯并芘都可進(jìn)行吸附或生物降解，48h液相PAHs濃度達(dá)到平衡時(shí),，微生物對(duì)菲消除了98％,，對(duì)苯并芘消除85％；接種的樣品48h吸附等溫線均呈線形,，能較好地符合線性方程,；在接種微生物情況下，沉積物與土壤對(duì)菲和苯并芘吸附特征均發(fā)生較大變化,，對(duì)菲的吸附量增大約35倍,，而對(duì)苯并芘的吸附量卻降低了2/3左右；未接種微生物的土壤和沉積物對(duì)菲解吸率為20％,，接種的樣品組為2.9％,，而對(duì)苯并芘的解吸結(jié)果與菲相反，未接種的對(duì)照組為4％,，接種的樣品組為3％,。脲酶屬于土壤中研究得比較深入的一種水解酶類，枯草芽孢桿菌是對(duì)尿素在土壤中轉(zhuǎn)化及尿素利用率有重大影響的,。廣州慢生根瘤菌菌株枯草芽孢桿菌有著很好的競(jìng)爭(zhēng)作用,，保護(hù)作物根部不受病菌侵染和抑制作物體內(nèi)病原菌擴(kuò)散,。

目前，科研人員已確定了幾種宿主因素與抗金葡菌傳染的作用有關(guān)：補(bǔ)體系統(tǒng),、中性粒細(xì)胞,、γδ+T細(xì)胞產(chǎn)生的IL-17、B細(xì)胞免疫應(yīng)答,、Th1和Th17免疫應(yīng)答等,。其中，越來越多的證據(jù)表明細(xì)胞免疫與金葡菌的反復(fù)傳染密切相關(guān),。然而,，在病原體與宿主的“競(jìng)賽”中，金葡菌已進(jìn)化出多種策略來壓制宿主的獲得性抵御力的建立,。葡萄球菌蛋白A（SpA）是一種明確的致病因子,，能夠通過增強(qiáng)B細(xì)胞超抗原活性并阻斷抗體介導(dǎo)的吞噬作用來干擾B細(xì)胞活力和功能。到目前為止,，只有肽聚糖O-乙?；D(zhuǎn)移酶（OatA）被證明可通過阻斷NLRP3炎性小體信號(hào)通路，進(jìn)而直接影響Th17保護(hù)性細(xì)胞免疫反應(yīng)的建立,。因此,，探究金葡菌逃避宿主保護(hù)性免疫反應(yīng)的潛在機(jī)制，對(duì)金葡菌疫苗的開發(fā)具有重要意義,。

金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）,，又稱金葡菌，是一種常見的革蘭陽(yáng)性菌,，普遍存在于空氣,、水、灰塵及人和動(dòng)物的排泄物中,。它是一種生物共患病原菌，可導(dǎo)致人和動(dòng)物的多種疾病,，包括偽膜性腸炎,、敗血癥和膿毒癥等，嚴(yán)重威脅人類和動(dòng)物的生命安全,。長(zhǎng)期以來,，青霉素和甲氧西林普遍用于救治敏感菌引起的傳染性疾病。隨著抑菌藥物的大規(guī)模使用以及人類的濫用和不合理使用,，耐藥菌株層出不窮,。金葡菌耐藥性較為突出，其中以耐甲氧西林金葡菌(Methicillin-resistantS.aureus,，MRSA)危害較大,。據(jù)報(bào)道顯示,，MRSA傳染已經(jīng)和HBV傳染、AIDS并列為世界范圍內(nèi)三大難解決傳染性疾病,?？莶菅挎邨U菌在酸性胃環(huán)境中能保持活性，可以耐唾液和膽汁的攻擊,。

大腸桿菌的培養(yǎng)：將保藏狀態(tài)的菌種放入適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng),，逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)得到純而壯的培養(yǎng)物，即獲得活力旺盛的,、接種數(shù)量足夠的培養(yǎng)物,。菌種發(fā)酵有一般需要2-3代的復(fù)壯過程，因?yàn)楸４鏁r(shí)的條件往往和培養(yǎng)時(shí)的條件不相同,，所以要活化,，讓菌種逐漸適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境。菌種經(jīng)過冷凍干燥后,，生長(zhǎng)延遲期較長(zhǎng),，需連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)。將菌種接種至一新鮮培養(yǎng)基上,，每萌發(fā)一次即為一代,，因此，當(dāng)原始菌種復(fù)溶并轉(zhuǎn)至新培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng),，即認(rèn)為已傳代一次,，從菌種保藏中心獲得的冷凍干燥的菌種為第0代，冷凍干燥的原始菌種開啟后轉(zhuǎn)種為第1代,，直到第3代為工作菌種,。菌種的傳代次數(shù)（自原始菌種凍干粉起）不得超過5代。直接從凍存搖的菌甘油放了不少可能會(huì)抑制菌的生長(zhǎng),，活力差,，而且多余的甘油對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)不利，經(jīng)劃板的菌株活力好,，可以挑菌搖菌提質(zhì)?；蛘咦霰磉_(dá)用。在有特殊用途的時(shí)候必須考慮大腸桿菌的性能,、規(guī)格等,。中國(guó)葡萄座腔菌

嗜酸乳桿菌 W37 嗜酸乳桿菌W55 副干酪乳桿菌W72 植物乳桿菌 W62 鼠李糖乳桿菌 W71 唾液乳桿菌 W24 干酪乳桿菌 LBC80R .勒克瑙曲霉菌種

保存的銅綠假單胞菌復(fù)蘇時(shí)，直接從菌種保存管挑取少量細(xì)菌移種普通瓊脂平板或肉湯管,，于37攝氏度培養(yǎng)18~24小時(shí),。主要生化指標(biāo)檢測(cè)，取較低溫甘油保存法和半固體保存法兩種保存法保存的菌種分別進(jìn)行42攝氏度生長(zhǎng)試驗(yàn),、氧化酶試驗(yàn),、氧化-發(fā)酵試驗(yàn),、動(dòng)力試驗(yàn)及明膠液化試驗(yàn)檢測(cè)。半固體保存法在3個(gè)月內(nèi)復(fù)蘇,，細(xì)菌生長(zhǎng)良好,，但在6個(gè)月后復(fù)蘇，存活率降低,，只達(dá)30%,。移種普通瓊脂平板上無肉眼可見的藍(lán)綠色的色素產(chǎn)生，需連續(xù)移種3~4次后才可見到色素產(chǎn)生,。改良的方法使菌種保存已達(dá)27個(gè)月,，期間分別在6、12,、18,、24、27個(gè)月時(shí)復(fù)蘇,，均可見綠膿桿菌在普通瓊脂平板上生長(zhǎng)良好,，可見圓形、大小不一,、光滑,、濕潤(rùn)、邊緣不整齊的扁平菌落,，菌落周圍的瓊脂被染成藍(lán)綠色,；細(xì)菌存活率為100%。勒克瑙曲霉菌種

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