銅綠假單胞菌是一種常見的條件致病菌,,屬于非發(fā)酵革蘭氏陰性桿菌,。菌體細長且長短不一,有時呈球桿狀或線狀,,成對或短鏈狀排列。菌體的一端有單鞭毛,,在暗視野顯微鏡或相差顯微鏡下觀察可見細菌運動活潑,。銅綠假單胞菌為專性需氧菌,,生長溫度范圍25~42攝氏度,較適生長溫度為25~30攝氏度,,特別是銅綠假單胞菌在4攝氏度不生長,,而在42攝氏度可以生長的特點可用以鑒別。在普通培養(yǎng)基上可以生存并能產(chǎn)生水溶性的色素,,如綠膿素與帶熒光的水溶性熒光素等,。在血平板上會有透明溶血環(huán)。銅綠假單胞菌有菌體o抗原和鞭毛h抗原,。o抗原含有內(nèi)毒養(yǎng)素和原內(nèi)毒養(yǎng)素蛋白質(zhì)兩種成份,。原內(nèi)毒養(yǎng)素蛋白質(zhì)是一種高分子、低毒性,,原性強的保護性抗原,,不只存在于不同血清型銅綠假單胞菌中??莶菅挎邨U菌能夠改善有害藍藻泛溢造成的水質(zhì)渾濁問題,,水質(zhì)由渾變清,具有很強的凈化水質(zhì)功能,。粘著劍菌菌株
保存的銅綠假單胞菌復蘇時,,直接從菌種保存管挑取少量細菌移種普通瓊脂平板或肉湯管,于37攝氏度培養(yǎng)18~24小時,。主要生化指標檢測,,取較低溫甘油保存法和半固體保存法兩種保存法保存的菌種分別進行42攝氏度生長試驗、氧化酶試驗,、氧化-發(fā)酵試驗,、動力試驗及明膠液化試驗檢測。半固體保存法在3個月內(nèi)復蘇,,細菌生長良好,,但在6個月后復蘇,存活率降低,,只達30%,。移種普通瓊脂平板上無肉眼可見的藍綠色的色素產(chǎn)生,需連續(xù)移種3~4次后才可見到色素產(chǎn)生,。改良的方法使菌種保存已達27個月,,期間分別在6、12,、18,、24、27個月時復蘇,,均可見綠膿桿菌在普通瓊脂平板上生長良好,,可見圓形,、大小不一、光滑,、濕潤,、邊緣不整齊的扁平菌落,菌落周圍的瓊脂被染成藍綠色,;細菌存活率為100%,。雪葉擬盤多毛孢菌株銅綠假單胞菌的O抗原包含脂多糖,有特異性,。
銅綠假單胞桿菌的凍結(jié)保存記錄內(nèi)容包括冷凍的日期,、細胞代號、冷凍管數(shù),、冷凍保存中溫度下降的情況,、保存位置以及操作者。不使用銅綠假單胞桿菌前,,要使用高壓蒸汽滅菌,,其自身具有殺菌作用。高壓滅菌反而破壞了其分子結(jié)構(gòu),,可以降低冷凍保護的效果,。對細胞注意凍結(jié)保存管投入液氮,操作簡單地從液氮向液氮罐內(nèi)迸發(fā),。如果液氮可能會迸發(fā),,會凍壞皮膚。操作中盡量帶防寒手套,、口罩,、工作服或防寒鞋。要注意控制冰箱的質(zhì)量,。在凍結(jié)之前確保細胞有活力,,沒有微生物污染,值得凍結(jié)在這樣的細胞上,。另外,,幾個細胞凍結(jié)后,使1~2管復活,,觀察其活力,,觀察微生物是否受到污染。
SHBCCD73798侏羅紀地芽孢桿菌SHBCCD73798=VKMB-2301Geobacillusjurassicus模式菌株SHBCCD73799熱球狀尿素芽孢桿菌SHBCCD73799Ureibacillusthermosphaericus模式菌株SHBCCD73800強酒海桿狀菌SHBCCD73800=CCUG52119Marinobactervinifirmus模式菌株SHBCCD73801拉浩爾谷農(nóng)球菌SHBCCD73801=CGMCC1.7259=CGMCC1.8869=JCM14301=MTCC7154Agrococcuslahaulensis模式菌株SHBCCD73802解纖維素木聚糖單胞菌SHBCCD73802=CECT5975=LMG20990Xylanimonascellulosilytica模式菌株SHBCCD73803斯氏片球菌SHBCCD73803=CCUG51290=LMG23082Pediococcusstilesii模式菌株SHBCCD73804“冰川鹽單胞菌”SHBCCD73804=MTCC4321Halomonasglaciei模式菌株SHBCCD73805檸檬黃色農(nóng)球菌SHBCCD73805=ATCC700859=CCM4975=CIP106287=DSM12453=CGMCC1.6150Agrococcuscitreus模式菌株SHBCCD73806光神農(nóng)球菌SHBCCD73806=CCM4953=CIP107635=DSM14215=CGMCC1.6144Agrococcusbaldri模式菌株SHBCCD73807缺陷短波單胞菌SHBCCD73807BrevundimonasdiminutaSHBCCD73808殺蟲貪銅菌SHBCCD73808CupriavidusnecatorMutantfromDSM428,doesnotformpoly-β-hydroxy-butyrateSHBCCD73809殺蟲貪銅菌SHBCCD73809=ATCC17699 銅綠假單胞菌菌體的一端有單鞭毛,。
保存條件斜面,、穿刺菌和凍干粉可常溫運輸,但應在4-10度長期保存,。甘油菌可常溫運輸,,但應在-80度長期保存,。微生物菌種應保存于低溫,、清潔和干燥的地方,,室溫放置時間過長會導致菌種衰退。
凍干管的開啟方法:方法一:將凍干粉甩至底部圓球位置,,然后用70%的酒精脫脂棉球擦凈凍干管,,將凍干管的前列(注意不是圓球端)放在火焰上加熱。然后迅速滴幾滴無菌水至加熱處,,此時凍干管的前列會自動破開,。然后用鑷子輕輕敲下凍干管前列,并將凍干管開口處在火焰上加熱滅菌一下,,并且保持下面的菌種菌種活化步驟在火焰旁操作,。然后逐漸敲開凍干管,直至適當位置,。(敲開位置以可以很好注入無菌水以及吸取混勻后的液體為準)直接敲開法,。方法二:首先將凍干粉甩至底部圓球位置,然后用70%的酒精脫脂棉球擦凈凍干管,,將凍干管的前列(注意不是圓球端)放在火焰稍微加熱滅菌,。然后直接用大鑷子敲打前列,敲開后將破口處在火焰上加熱滅菌一下,,并且保持下面的菌種菌種活化步驟在火焰旁操作,。然后逐漸敲開凍干管,直至適當位置,。(敲開位置以可以很好注入無菌水以及吸取混勻后的液體為準),。 銅綠假單胞菌的標本采集,分別來自不同影響部位的各種標本,。皮革正青霉菌種
銅綠假單胞菌在乙酰胺肉湯實驗下呈陽性,。粘著劍菌菌株
大腸桿菌屬的系統(tǒng)發(fā)育:大量屬于該物種的菌株已得到分離和鑒定。除了血清型(videsupra),,它們還可以根據(jù)它們的系統(tǒng)發(fā)育(即推斷的進化史)進行分類,。如下所示,其中該物種分為六組,。特別是全基因組序列的使用產(chǎn)生了高度支持的系統(tǒng)發(fā)育,。基于這些數(shù)據(jù),,大腸桿菌的5個亞種被區(qū)分開來,。系統(tǒng)發(fā)育距離(“關(guān)聯(lián)性”)和病理學之間的聯(lián)系很小,例如O157:H7血清型菌株形成一個分支(“一個獨特的群”)—下面的E群——都是腸出血性菌株(EHEC),,但并不是所有的EHEC菌株都是密切相關(guān)的,。事實上,,四種不同的志賀氏菌嵌套在大腸桿菌菌株(見上),然而E.albertii和E.fergusonii不屬于這個群體,。事實上,,在包括類型菌株在內(nèi)的系統(tǒng)基因組研究中,所有志賀菌都被放在大腸桿菌的一個亞種內(nèi),,因此很難進行相應的重新分類,。所有常用的研究菌株大腸桿菌屬于a組,主要來源于Clifton的K-12菌株(λ?f?,。O16)并且在較小程度上來自d'Herelle的大腸桿菌菌株(B菌株)(O7),。粘著劍菌菌株
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