天然培養(yǎng)基血清種類:目用于組織培養(yǎng)的血清主要是牛血清,培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也用人血清,、馬血清等,。選擇用牛血清培養(yǎng)細(xì)胞的原因:來源充足、制備技術(shù)成熟,、經(jīng)過長(zhǎng)時(shí)間的應(yīng)用考驗(yàn)人們對(duì)其有比較深入的理解,。牛血清對(duì)絕大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞都是適合的,但并不排除在培養(yǎng)某種細(xì)胞時(shí)使用其他動(dòng)物血清更合適,。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量比較大的天然培養(yǎng)基,,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,具有極為重要的功能,。牛血清分為小牛血清,、新牛血清、胎牛血清,。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛,;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛,。顯然,,胎牛血清是品質(zhì)比較高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,,血清中所含的抗體,、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分較少。改良V-P培養(yǎng)基 6.5%氯化鈉肉湯 石蕊牛奶培養(yǎng)基 緩沖李斯特氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)BLEB基礎(chǔ)LEB基礎(chǔ) LM-137瓊脂基礎(chǔ),。DG18瓊脂基礎(chǔ) GB
培養(yǎng)基(Medium)是供微生物,、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料,,一般都含有水、氮源,、無機(jī)鹽(包括微量元素),、碳源、生長(zhǎng)因子(維生素,、氨基酸,、堿基、色素和血清等)等,。培養(yǎng)基由于配制的原料不同,,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同,。一般培養(yǎng)基在受熱,、吸潮后,易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì),,因此一般培養(yǎng)基必須防潮,、避光、陰涼處保存,。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),,較長(zhǎng)時(shí)間的貯存,必須放在3-6℃的冰箱內(nèi),。由于液體培養(yǎng)基不易長(zhǎng)期保管,,均改制成粉末。3%氨基酸脫羧酶試驗(yàn)對(duì)照培養(yǎng)基M-遠(yuǎn)藤氏防腐培養(yǎng)基 克羅諾桿菌篩選肉湯 Skirrow瓊脂基礎(chǔ)(Skirrow血瓊脂基礎(chǔ)) 半固體儲(chǔ)存培養(yǎng)基,。
合成培養(yǎng)基(synthetic medium) 由已知化學(xué)成分的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組成的培養(yǎng)基,。根據(jù)微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求的不同,可完全由無機(jī)鹽或化合物組成,,如:氨基酸,、糖、嘌呤,、嘧啶,、維生素等,其組成成分已知,,只要嚴(yán)格操作,,各批次間質(zhì)量可做到穩(wěn)定一致。此培養(yǎng)基可用來檢測(cè)某種營(yíng)養(yǎng)物或藥物對(duì)微生物代謝的影響,。組織細(xì)胞培養(yǎng)液均屬合成培養(yǎng)基,。合成培養(yǎng)基的成本較高,其價(jià)格相當(dāng)于同類天然培養(yǎng)基的幾倍以至于幾十倍,。只含幾種無機(jī)鹽的合成培養(yǎng)基,,只適用于自養(yǎng)菌的培養(yǎng),,如培養(yǎng)亞硝化細(xì)菌、氧化硫桿菌等的培養(yǎng)基,。有些培養(yǎng)基大部分成分為已知化學(xué)結(jié)構(gòu)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),,其中的個(gè)別或少數(shù)成分為未明化學(xué)成分的必須營(yíng)養(yǎng)物,成為半合成培養(yǎng)基,,如百日咳菌苗生產(chǎn)用的水解酪素培養(yǎng)基,。
半組合培養(yǎng)基:指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時(shí)還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基,。例如,,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基:1.液體培養(yǎng)基:80%~90%是水,,其中配有可溶性的或不溶性的營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。2.固體培養(yǎng)基:一類配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì),。根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基,、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基,、濾膜,。3.半固體培養(yǎng)基:指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。4.脫水培養(yǎng)基:又稱預(yù)制干燥培養(yǎng)基,,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基,。細(xì)菌L型分離瓊脂 L型細(xì)菌高滲鹽增菌培養(yǎng)基 幽門螺桿菌液體培養(yǎng)基基礎(chǔ) ATYP培養(yǎng)基 ATYP瓊脂。
培養(yǎng)基中谷氨酰胺作用及使用方法,?幾乎所有的細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺有較高的要求,,細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),在缺少谷氨酰胺時(shí),,細(xì)胞生長(zhǎng)不良而死亡,。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺,。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,,應(yīng)置-20℃ 冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中,。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基 4℃冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí),,應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺。GlutaMAX-I是什么,?培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I,?這個(gè)二肽有多穩(wěn)定?GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽,,是一個(gè)L-谷氨酰胺的衍生物,,其不穩(wěn)定的 alpha-氨基用L-丙氨酸來保護(hù),。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-谷氨酰胺供利用,。GlutaMAX-I 二肽非常穩(wěn)定,,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有較小的降解,,如果在相同條件下,,L-谷氨酰胺幾乎完全降解。葡萄糖酵母浸粉蛋白胨瓊脂GYP瓊脂 改良M17瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 尿酸瓊脂 MC肉湯不含瓊脂溴甲酚紫牛乳瓊脂培養(yǎng)基,。PS瓊脂
0.9%氯化鈉 大腸桿菌噬菌體ΦX174液體培養(yǎng)基 乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基/乳糖復(fù)發(fā)酵培養(yǎng)基 伊紅美藍(lán)瓊脂(不含乳糖),。DG18瓊脂基礎(chǔ) GB
在培養(yǎng)基中加人某種抑制劑和指示劑,抑制某些細(xì)菌生長(zhǎng),,促進(jìn)目的菌的繁殖,,并使所生長(zhǎng)的細(xì)菌菌落具有一定特征,以助鑒別挑選,,這類培養(yǎng)基稱為選擇性鑒別培養(yǎng)基,。如SS瓊脂,在該培養(yǎng)基配方中含有乳糖(反應(yīng)底物),、中性紅和檸檬酸鐵銨(指示劑),、燦爛綠及膽鹽等(抑菌劑)。燦爛綠和膽鹽等抑菌劑能抑制革蘭氏陽性菌及部分大腸埃希菌的生長(zhǎng),,而對(duì)沙門菌及志賀菌基本無影響,,而且大腸埃希菌能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸,使菌落變紅色,,沙門菌和志賀菌不發(fā)酵乳糖,,其菌落為無色。如細(xì)菌產(chǎn)生硫化氫,,則與檸檬酸鐵銨反應(yīng)生成硫化亞鐵沉淀,,菌落中心呈黑色或褐色。以此達(dá)到鑒別的目的,。DG18瓊脂基礎(chǔ) GB
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