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細(xì)胞培養(yǎng)液(liquid of culture cellulae) 是指用于各種目的的體外培養(yǎng),、保存、運(yùn)輸活組織及細(xì)胞的液體,,實質(zhì)為人工模擬體內(nèi)生長的營養(yǎng)環(huán)境,,使細(xì)胞在此環(huán)境中有生長和繁殖的能力。由于其成分?jǐn)?shù)量明確并可通過調(diào)節(jié)某一種成分來觀察被研究對象的各種生物學(xué)改變,,被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)科的研究,。細(xì)胞培養(yǎng)液的組成成分主要有水、氨基酸,、維生素,、碳水化合物、無機(jī)離子,、生長因子等,,這些成分必須通過嚴(yán)格挑選,嚴(yán)格測試后方可使用,,所用的水必須達(dá)到2級試驗用水(CB/T 6682-1992),,所用的器皿必須清潔無污并進(jìn)行高壓滅菌或干烤去熱源處理。通過對培養(yǎng)基的深入研究和優(yōu)化,,可以更好地實現(xiàn)生物醫(yī)學(xué),、生物工程和環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域的應(yīng)用和發(fā)展。生脂固氮螺菌培養(yǎng)基
鑒別培養(yǎng)基(differential media) 在培養(yǎng)基中加入某一反應(yīng)底物和指示劑,,以區(qū)別某些微生物的特性從而鑒別之,。又分一般鑒別培養(yǎng)基和選擇性鑒別培養(yǎng)基。只用于區(qū)別不同微生物種類的培養(yǎng)基稱為-般鑒別培養(yǎng)基,,此類培養(yǎng)基中一般不加抑菌劑而只含指示劑,,如克氏雙糖鐵培養(yǎng)基,,含有葡萄糖及乳糖,以酚紅作為指示劑,,觀察培養(yǎng)基底層與斜面的顏色變化判定細(xì)菌對葡萄糖和乳糖的發(fā)酵能力,,加人檸檬酸鐵銨,培養(yǎng)后觀察是否產(chǎn)生黑色沉著以判定細(xì)菌是否分解蛋白胨中的含硫氨基酸而產(chǎn)生硫化氫,;又如伊紅-美藍(lán)瓊脂,,含有乳糖(反應(yīng)底物)、伊紅-美藍(lán)(指示劑)用以鑒別大腸埃希菌,、腸道病原菌和其他雜菌,。一般鑒別培養(yǎng)基的特點(diǎn)是在配方中都含有指示劑,并可用于區(qū)別不同種類的微生物,,有些鑒別培養(yǎng)基也可同時作為細(xì)菌的特殊需要用來分離培養(yǎng)某些細(xì)菌,,如胰酪胨大豆瓊脂和巧克力色血瓊脂。需氧厭氧菌瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)基的pH值需要根據(jù)不同微生物的生長適應(yīng)范圍進(jìn)行調(diào)節(jié),。
半組合培養(yǎng)基:指一類主要以化學(xué)試劑配制,,同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基,。固體培養(yǎng)基:1.液體培養(yǎng)基:80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基,。2.固體培養(yǎng)基:一類配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì),。根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基,、天然固態(tài)培養(yǎng)基,、濾膜。3.半固體培養(yǎng)基:指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基,。4.脫水培養(yǎng)基:又稱預(yù)制干燥培養(yǎng)基,,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基,。
營養(yǎng)培養(yǎng)基(nutrient media) 在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加一些特殊的營養(yǎng)物質(zhì),,如葡萄糖、血液,、血清,、酵母浸膏、生長因子等,,可供營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌在其中生長,。例如鏈球菌、肺炎鏈球菌等需在含血液或血清的培養(yǎng)基中生長,;結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)基中須添加雞蛋,、馬鈴薯,、甘油等。比較常用的營養(yǎng)培養(yǎng)基是血瓊脂平板,。增菌培養(yǎng)基(enrichment media) 一般為液體培養(yǎng)基,,用于細(xì)菌的增菌培養(yǎng),可泛用,,也可專門用的,,在專門用的增菌培養(yǎng)基中常含有目的菌生長所需要的特殊營養(yǎng)物質(zhì)或生長因子。酵母培養(yǎng)基通常包含酵母營養(yǎng)素,、碳水化合物和氮源,。
培養(yǎng)基,是指供給微生物,、植物或動物(或組織)生長繁殖的,,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物,、含氮物質(zhì),、無機(jī)鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質(zhì),。培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),,也是細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基種類很多,,根據(jù)配制原料的來源可分為自然培養(yǎng)基,、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基,;根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基,、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基,;根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基,、鑒別培養(yǎng)基等,;根據(jù)使用范圍可分為細(xì)菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基,、酵母菌培養(yǎng)基等,。培養(yǎng)基配成后一般需測試并調(diào)節(jié)pH,還須進(jìn)行滅菌,,通常有高溫滅菌和過濾滅菌,。培養(yǎng)基由于富含營養(yǎng)物質(zhì),易被污染或變質(zhì),。配好后不宜久置,,現(xiàn)配現(xiàn)用,。培養(yǎng)基應(yīng)適合不同類型細(xì)菌的生長,包括需氧菌和厭氧菌,。CDC厭氧菌瓊脂基礎(chǔ)
培養(yǎng)基是細(xì)胞和微生物生長所需的基本營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境條件,。生脂固氮螺菌培養(yǎng)基
不同類型微生物生長對氧化還原電位(F)的要求不一樣,一般好氧性微生物在F值為+0.1V以上時可正常生長,,一般以+0.3—+0.4V為宜,,厭氧性微生物只能在F值低于+0.1V條件下生長,兼性厭氧微生物在F值為+0.1V以上時進(jìn)行好氧呼吸,,在+0.1V以下時進(jìn)行發(fā)酵,。F值與氧分壓和pH有關(guān),也受某些微生物代謝產(chǎn)物的影響,。在pH相對穩(wěn)定的條件下,,可通過增加通氣量(如振蕩培養(yǎng)、攪拌)提高培養(yǎng)基的氧分壓,,或加入氧化劑,,從而增加F值;在培養(yǎng)基中加入抗壞血酸,、硫化氫,、半胱氨酸、谷胱甘肽,、二硫蘇糖醇等還原性物質(zhì)可降低F值,。生脂固氮螺菌培養(yǎng)基
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