細(xì)胞培養(yǎng)液(liquid of culture cellulae) 是指用于各種目的的體外培養(yǎng),、保存,、運(yùn)輸活組織及細(xì)胞的液體,,實(shí)質(zhì)為人工模擬體內(nèi)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,使細(xì)胞在此環(huán)境中有生長(zhǎng)和繁殖的能力,。由于其成分?jǐn)?shù)量明確并可通過(guò)調(diào)節(jié)某一種成分來(lái)觀察被研究對(duì)象的各種生物學(xué)改變,,被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)科的研究。細(xì)胞培養(yǎng)液的組成成分主要有水,、氨基酸、維生素,、碳水化合物,、無(wú)機(jī)離子、生長(zhǎng)因子等,,這些成分必須通過(guò)嚴(yán)格挑選,,嚴(yán)格測(cè)試后方可使用,所用的水必須達(dá)到2級(jí)試驗(yàn)用水(CB/T 6682-1992),,所用的器皿必須清潔無(wú)污并進(jìn)行高壓滅菌或干烤去熱源處理,。通過(guò)對(duì)培養(yǎng)基的深入研究和優(yōu)化,可以更好地實(shí)現(xiàn)生物醫(yī)學(xué),、生物工程和環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域的應(yīng)用和發(fā)展,。生脂固氮螺菌培養(yǎng)基
鑒別培養(yǎng)基(differential media) 在培養(yǎng)基中加入某一反應(yīng)底物和指示劑,以區(qū)別某些微生物的特性從而鑒別之,。又分一般鑒別培養(yǎng)基和選擇性鑒別培養(yǎng)基,。只用于區(qū)別不同微生物種類的培養(yǎng)基稱為-般鑒別培養(yǎng)基,此類培養(yǎng)基中一般不加抑菌劑而只含指示劑,,如克氏雙糖鐵培養(yǎng)基,,含有葡萄糖及乳糖,以酚紅作為指示劑,,觀察培養(yǎng)基底層與斜面的顏色變化判定細(xì)菌對(duì)葡萄糖和乳糖的發(fā)酵能力,,加人檸檬酸鐵銨,培養(yǎng)后觀察是否產(chǎn)生黑色沉著以判定細(xì)菌是否分解蛋白胨中的含硫氨基酸而產(chǎn)生硫化氫,;又如伊紅-美藍(lán)瓊脂,,含有乳糖(反應(yīng)底物)、伊紅-美藍(lán)(指示劑)用以鑒別大腸埃希菌,、腸道病原菌和其他雜菌,。一般鑒別培養(yǎng)基的特點(diǎn)是在配方中都含有指示劑,并可用于區(qū)別不同種類的微生物,,有些鑒別培養(yǎng)基也可同時(shí)作為細(xì)菌的特殊需要用來(lái)分離培養(yǎng)某些細(xì)菌,,如胰酪胨大豆瓊脂和巧克力色血瓊脂,。需氧厭氧菌瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)基的pH值需要根據(jù)不同微生物的生長(zhǎng)適應(yīng)范圍進(jìn)行調(diào)節(jié)。
半組合培養(yǎng)基:指一類主要以化學(xué)試劑配制,,同時(shí)還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基,。例如,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基,。固體培養(yǎng)基:1.液體培養(yǎng)基:80%~90%是水,,其中配有可溶性的或不溶性的營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。2.固體培養(yǎng)基:一類配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì),。根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基,、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基,、濾膜,。3.半固體培養(yǎng)基:指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。4.脫水培養(yǎng)基:又稱預(yù)制干燥培養(yǎng)基,,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基,。
營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基(nutrient media) 在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加一些特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如葡萄糖,、血液,、血清、酵母浸膏,、生長(zhǎng)因子等,,可供營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌在其中生長(zhǎng)。例如鏈球菌,、肺炎鏈球菌等需在含血液或血清的培養(yǎng)基中生長(zhǎng),;結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)基中須添加雞蛋、馬鈴薯,、甘油等,。比較常用的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基是血瓊脂平板。增菌培養(yǎng)基(enrichment media) 一般為液體培養(yǎng)基,,用于細(xì)菌的增菌培養(yǎng),,可泛用,也可專門(mén)用的,,在專門(mén)用的增菌培養(yǎng)基中常含有目的菌生長(zhǎng)所需要的特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或生長(zhǎng)因子,。酵母培養(yǎng)基通常包含酵母營(yíng)養(yǎng)素、碳水化合物和氮源,。
培養(yǎng)基,,是指供給微生物、植物或動(dòng)物(或組織)生長(zhǎng)繁殖的,,由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì),。一般都含有碳水化合物,、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素),、維生素和水等幾大類物質(zhì),。培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境,。培養(yǎng)基種類很多,,根據(jù)配制原料的來(lái)源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基,、半合成培養(yǎng)基,;根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基,、半固體培養(yǎng)基,;根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基,、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等,;根據(jù)使用范圍可分為細(xì)菌培養(yǎng)基,、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基等,。培養(yǎng)基配成后一般需測(cè)試并調(diào)節(jié)pH,,還須進(jìn)行滅菌,通常有高溫滅菌和過(guò)濾滅菌,。培養(yǎng)基由于富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),,易被污染或變質(zhì)。配好后不宜久置,,現(xiàn)配現(xiàn)用,。培養(yǎng)基應(yīng)適合不同類型細(xì)菌的生長(zhǎng),包括需氧菌和厭氧菌,。CDC厭氧菌瓊脂基礎(chǔ)
培養(yǎng)基是細(xì)胞和微生物生長(zhǎng)所需的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境條件,。生脂固氮螺菌培養(yǎng)基
不同類型微生物生長(zhǎng)對(duì)氧化還原電位(F)的要求不一樣,一般好氧性微生物在F值為+0.1V以上時(shí)可正常生長(zhǎng),,一般以+0.3—+0.4V為宜,,厭氧性微生物只能在F值低于+0.1V條件下生長(zhǎng),兼性厭氧微生物在F值為+0.1V以上時(shí)進(jìn)行好氧呼吸,,在+0.1V以下時(shí)進(jìn)行發(fā)酵,。F值與氧分壓和pH有關(guān),也受某些微生物代謝產(chǎn)物的影響,。在pH相對(duì)穩(wěn)定的條件下,,可通過(guò)增加通氣量(如振蕩培養(yǎng),、攪拌)提高培養(yǎng)基的氧分壓,或加入氧化劑,,從而增加F值,;在培養(yǎng)基中加入抗壞血酸、硫化氫,、半胱氨酸,、谷胱甘肽、二硫蘇糖醇等還原性物質(zhì)可降低F值,。生脂固氮螺菌培養(yǎng)基
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