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放線菌分離瓊脂

來源: 發(fā)布時間:2023-05-13

總體而言,,所有微生物生長繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無機鹽,、生長因子、水及能源,,但由于微生物營養(yǎng)類型復雜,,不同微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣的,因此首先要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求配制針對性強的培養(yǎng)基,。自養(yǎng)型微生物能從簡單的無機物合成自身需要的糖類,、脂類、蛋白質(zhì),、核酸,、維生素等復雜的有機物,因此培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全可以(或應該)由簡單的無機物組成,。例如,,培養(yǎng)化能自養(yǎng)型的氧化硫硫桿菌(Thiobacillus thiooxdans)的培養(yǎng)基組成見表3.9。在該培養(yǎng)基配制過程中并未專門加入其他碳源物質(zhì),,而是依靠空氣中和溶于水中的CO2為氧化硫硫桿菌提供碳源,。Luria-Bertani 培養(yǎng)基是一種常用的細菌培養(yǎng)基,可用于大腸桿菌 E. coli 的培養(yǎng),。放線菌分離瓊脂

培養(yǎng)基

通常用心,、腦或其他臟器浸液配制厭氧菌培養(yǎng)基,并常需加入硫乙醇酸鈉,、半胱氨酸,、肉渣,、還原鐵、活性炭等還原劑或除氧材料,。在液體培養(yǎng)基中還可加入刃天青或亞甲基藍作為氧化還原指示劑,,以觀察培養(yǎng)基的含氧程度。心,、腦浸液,、肝塊、肉渣中含有不飽和脂肪酸,,能吸收培養(yǎng)基中的氧,。硫乙醇酸鈉、半胱氨酸是較強的還原劑,,能消耗溶解在培養(yǎng)基中的氧,。干燥的活性炭和脫脂棉同樣能吸收培養(yǎng)基中的氧。所以培養(yǎng)基中加入還原劑和吸收材料,,目的都是為造成培養(yǎng)基的缺氧環(huán)境,,使培養(yǎng)基保持較低的氧化還原電勢。此外,,還可在培養(yǎng)基表面加一層液體石蠟,,以隔絕培養(yǎng)基與大氣的接觸。緩沖蛋白胨水(BPW)常見的細菌類培養(yǎng)基包括營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,、大腸桿菌培養(yǎng)基,、金黃色葡萄球菌培養(yǎng)基等等。

放線菌分離瓊脂,培養(yǎng)基

氨基酸是細胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,,氨基酸中有12種是細胞本身不合成的,,必須由培養(yǎng)液提供。水解乳蛋白,、膠原是另外兩種較好的天然培養(yǎng)基成分,。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解產(chǎn)物,,呈蛋黃色粉末狀,,富含氨基酸。一般配制成0.5%溶液,,微酸性,。膠原是從動物真皮中提取的,具改善細胞表面特性促使其附著生長的作用,。特殊培養(yǎng)基:包括厭氧培養(yǎng)基和細菌L型培養(yǎng)基等,。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基,除含營養(yǎng)成分外,,還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢,,如皰肉培養(yǎng)基,、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對細胞壁缺損的細菌L型,,由于胞內(nèi)滲透壓較高,,故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。

培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi),,以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物,。各類微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的較適pH條件各不相同,一般來講,,細菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內(nèi)生長,,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內(nèi)生長。值得注意的是,,在微生物生長繁殖和代謝過程中,,由于營養(yǎng)物質(zhì)被分解利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累,會導致培養(yǎng)基pH發(fā)生變化,,若不對培養(yǎng)基pH條件進行控制,,往往導致微生物生長速度下降或(和)代謝產(chǎn)物產(chǎn)量下降。因此,,為了維持培養(yǎng)基pH的相對恒定,,通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑,常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽(如KH2PO4和K2HPO4)組成的混合物,。K2HPO4溶液呈堿性,,KH2PO4溶液呈酸性,兩種物質(zhì)的等量混合溶液的pH為6.8,。當培養(yǎng)基中酸性物質(zhì)積累導致H+濃度增加時,,H+與弱堿性鹽結(jié)合形成弱酸性化合物,培養(yǎng)基pH不會過度降低,;如果培養(yǎng)基中OH-濃度增加,,OH-則與弱酸性鹽結(jié)合形成弱堿性化合物,培養(yǎng)基pH也不會過度升高,。培養(yǎng)基種類繁多,,根據(jù)需求選擇適合的培養(yǎng)基對于成功的微生物培養(yǎng)至關重要。

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什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅,?酚紅在培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑:中性時為紅色,,酸性時為黃色,堿性時為紫色,。酚紅本身對生物制品質(zhì)量并不會產(chǎn)生影響,,可以通過純化技術去除,但酚紅在無血清培養(yǎng)基可能帶來胞內(nèi)鈉/鉀失衡,,影響細胞生長,,當然這種作用能被血清所中和或減輕,。酚紅并不是培養(yǎng)基中必需的一種成分,很多國外的疫苗或抗體生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)過程中都使用無酚紅培養(yǎng)基,。研究表明,,酚紅可以模擬固醇類的作用。為避免固醇類反應,,培養(yǎng)細胞,,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基,。由于酚紅干擾檢測,,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基,。液體培養(yǎng)基普遍應用于微生物菌株的生長,、染色及細胞背景下的細胞培養(yǎng)等方面。Endo培養(yǎng)基

液體培養(yǎng)基,、固體培養(yǎng)基和半固態(tài)培養(yǎng)基是常用的培養(yǎng)基種類,。放線菌分離瓊脂

培養(yǎng)基的分類有幾種呢?按培養(yǎng)基組成物質(zhì)的化學成分區(qū)分:1.天然培養(yǎng)基,,天然培養(yǎng)基是指一類利用動物,、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如,。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。2.組合培養(yǎng)基,,合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,,用化學物質(zhì)模擬合成、人工設計而配制的培養(yǎng)基,。例如,。高氏1號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。3.半組合培養(yǎng)基 ,,指一類主要以化學試劑配制,,同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基,。放線菌分離瓊脂

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