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巴氏梭狀芽孢桿菌合成培養(yǎng)基

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-05-14

按培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分是否完全區(qū)分:1.基本培養(yǎng)基,,亦稱“較低限度培養(yǎng)基”,。只能滿足微生物野生型菌株生長需要的培養(yǎng)基,稱為基本培養(yǎng)基,,是含有營養(yǎng)要求較低成分的合成培養(yǎng)基,,常用“[-]”表示,。這種培養(yǎng)基往往缺少某些生長因子,所以經(jīng)過誘變過的營養(yǎng)缺陷型菌株不能生長,。2.完全培養(yǎng)基,,基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加血清等物質(zhì)后,叫完全培養(yǎng)基,,也叫(血清)細(xì)胞培養(yǎng)基,。完全培養(yǎng)基可用來滿足微生物的各種營養(yǎng)缺陷型菌株的生長需要,常以“[+]”表示,。3.補(bǔ)充培養(yǎng)基,,凡是只能滿足相應(yīng)的營養(yǎng)缺陷型生長需要的組合培養(yǎng)基,稱為補(bǔ)充培養(yǎng)基,,它是在基本培養(yǎng)基中加入該菌株不能合成的營養(yǎng)因子而組成的,。根據(jù)在基本培養(yǎng)基中加入的是A或B等營養(yǎng)因子代謝物而分別用[A]或[B]等來表示。需要控制pH值,、溫度,、氣氛等因素,以保證培養(yǎng)基的穩(wěn)定性,。巴氏梭狀芽孢桿菌合成培養(yǎng)基

培養(yǎng)基

培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)濃度合適時(shí)微生物才能生長良好,,營養(yǎng)物質(zhì)濃度過低時(shí)不能滿足微生物正常生長所需,濃度過高時(shí)則可能對(duì)微生物生長起抑制作用,,例如高濃度糖類物質(zhì),、無機(jī)鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進(jìn)微生物的生長,,反而起到抑菌或殺菌作用,。另外,培養(yǎng)基中各營養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產(chǎn)物的形成和積累,,其中碳氮比(C/N)的影響較大,。嚴(yán)格地講,碳氮比指培養(yǎng)基中碳元素與氮元素的物質(zhì)的量比值,,有時(shí)也指培養(yǎng)基中還原糖與粗蛋白之比,。例如,在利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的過程中,,培養(yǎng)基碳氮比為4/1時(shí),,菌體大量繁殖,谷氨酸積累少,;當(dāng)培養(yǎng)基碳氮比為3/1時(shí),,菌體繁殖受到抑制,谷氨酸產(chǎn)量則大量增加,。 TYC培養(yǎng)基常見的培養(yǎng)基有LB培養(yǎng)基,,YPD培養(yǎng)基,,M9培養(yǎng)基和DMEM培養(yǎng)基等。

巴氏梭狀芽孢桿菌合成培養(yǎng)基,培養(yǎng)基

培養(yǎng)基中谷氨酰胺作用及使用方法,?幾乎所有的細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺有較高的要求,,細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),在缺少谷氨酰胺時(shí),,細(xì)胞生長不良而死亡,。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺,。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,,應(yīng)置-20℃ 冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中,。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基 4℃冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí),,應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺。GlutaMAX-I是什么,?培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I,?這個(gè)二肽有多穩(wěn)定?GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽,,是一個(gè)L-谷氨酰胺的衍生物,,其不穩(wěn)定的 alpha-氨基用L-丙氨酸來保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽,,釋放L-谷氨酰胺供利用,。GlutaMAX-I 二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,,GlutaMAX-I 二肽溶液有較小的降解,,如果在相同條件下,L-谷氨酰胺幾乎完全降解,。

培養(yǎng)基按成分分類有哪些,?按形態(tài)分類:培養(yǎng)基按其不同的物理狀態(tài),可分為液體,、流體,、半固體和固體4類,,培養(yǎng)基的物理狀態(tài)取決于培養(yǎng)基中是否加人凝固劑或凝固劑的加入量,。1、液體培養(yǎng)基(liquidnutrientmedium)不加任何凝固劑,,常溫下以完全液態(tài)存在的培養(yǎng)基,,如肉湯培養(yǎng)基或一般液體增菌培養(yǎng)基。2,、流體培養(yǎng)基(semi-liquidmedium)在液體培養(yǎng)基中加入0.05%~0.1%的瓊脂粉,,使其具一定黏度,,即成流體培養(yǎng)基。加入瓊脂粉增加了培養(yǎng)基的黏度,,降低空氣中的氧氣進(jìn)人培養(yǎng)基的速度,,能使培養(yǎng)基保持較長時(shí)間的厭氧條件,有利于一般厭氧菌的生長繁殖,,如硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基,、改良馬丁培養(yǎng)基等。一般用于霉菌和厭氧菌檢查的液體培養(yǎng)基中可加人少量瓊脂使其成為流體培養(yǎng),。含血清培養(yǎng)基是一種以動(dòng)物血清為主的培養(yǎng)基普遍用于誘導(dǎo)細(xì)胞分化和胚胎發(fā)育研究等方面,。

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胰島素(Insulin)作用普遍,包括調(diào)節(jié)脂肪和蛋白質(zhì)的代謝以及促進(jìn)細(xì)胞生長等,。胰島素功能的發(fā)揮源于其對(duì)細(xì)胞的作用,,進(jìn)而引起組織乃至機(jī)體的整體反應(yīng)。一般可將胰島素在細(xì)胞水平的作用分為三大類:代謝作用,、促生長作用,、以及代謝和促生長混合作用。胰島素對(duì)細(xì)胞的代謝調(diào)節(jié)作用主要是通過其與細(xì)胞膜上的胰島素受體(Insulin receptor, IR)相互作用而介導(dǎo),,而胰島素對(duì)細(xì)胞的促生長作用則是通過其與細(xì)胞膜上胰島素的樣生長的因子受體(IGF Receptor, IG)相互作用而介導(dǎo)的,。在無血清細(xì)胞培養(yǎng)液中,常添加胰島素來維持細(xì)胞生長,,調(diào)節(jié)細(xì)胞對(duì)葡萄糖,、氨基酸和脂肪酸的攝取、利用和貯存,,同時(shí)抑制糖原,、蛋白質(zhì)和脂肪的分解。微生物的供能方式會(huì)影響它對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的利用,,因此不同微生物需要不同成分的培養(yǎng)基,。MS維生素

如果細(xì)菌的生長受到限制,可以嘗試調(diào)整培養(yǎng)基的成分或添加輔助物質(zhì),,例如控制培養(yǎng)基中氧氣的含量,。巴氏梭狀芽孢桿菌合成培養(yǎng)基

細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞培養(yǎng)基是不可或缺的,,細(xì)胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),,也是培養(yǎng)細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。通常細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)需要加入血清,,以維持細(xì)胞的生長和存活,。而除了血清之外,部分細(xì)胞在培養(yǎng)過程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇(β-mercaptoethanol)等成分來維持細(xì)胞狀態(tài)。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細(xì)胞需要額外添加胰島素,,而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等細(xì)胞則需要添加β-巰基乙醇,,不同細(xì)胞加入量會(huì)有差異,需根據(jù)細(xì)胞類型判斷,。巴氏梭狀芽孢桿菌合成培養(yǎng)基

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