以MS培養(yǎng)基母液為基礎(chǔ),向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL,,微量元素100×母液20mL,,鐵鹽100×母液20mL,維生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,,甘氨酸200×母液10mL,,配制得MS培養(yǎng)基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,,0.5mg·L-1的NAA8mL,。然后加入實(shí)際配制培養(yǎng)基體積約2/3-3/4的蒸餾水,加入40g蔗糖后攪拌使其溶化,,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl調(diào)整pH值至5.8-6.0,。加入14g瓊脂,將鋁鍋置于電爐上,,攪拌加熱使瓊脂完全溶化,,然后用蒸餾水定容至終體積2L,繼續(xù)加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中,。孟德爾-韋伯利法可以計(jì)算培養(yǎng)基的可利用能量,。膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基(DHL)
長時(shí)間高溫還會(huì)引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子(特別是鈣,、鎂,、鐵離子)結(jié)合形成難溶性復(fù)合物而產(chǎn)生沉淀,因此,,在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養(yǎng)基時(shí),,常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑,避免培養(yǎng)基中產(chǎn)生沉淀,,常用的螯合劑為乙二胺四乙酸(EDTA),。還可以將含鈣、鎂,、鐵等離子的成分與磷酸鹽,、碳酸鹽分別進(jìn)行滅菌,然后再混合,,避免形成沉淀,;高壓蒸汽滅菌后,培養(yǎng)基pH會(huì)發(fā)生改變(一般使pH降低),,可根據(jù)所培養(yǎng)微生物的要求,,在培養(yǎng)基滅菌前后加以調(diào)整。BCG牛乳培養(yǎng)基LB培養(yǎng)基是普遍使用的通用培養(yǎng)基,,適用于大多數(shù)腸道菌和非腸道菌的培養(yǎng),。
要獲得微生物純培養(yǎng),必須避免雜菌污染,,因此對(duì)所用器材及工作場所進(jìn)行消毒與滅菌,。對(duì)培養(yǎng)基而言,,更是要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌。對(duì)培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌,,一般培養(yǎng)基用1.05kg/cm2,,121.3℃條件下維持15-30min可達(dá)到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中,,長時(shí)間高溫會(huì)使某些不耐熱物質(zhì)遭到破壞,,如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖,,因此含糖培養(yǎng)基常在0.56kg/cm2,,112.6℃15-30分鐘進(jìn)行滅菌,某些對(duì)糖類要求較高的培養(yǎng)基,,可先將糖進(jìn)行過濾除菌或間歇滅菌,,再與其他已滅菌的成分混合。
培養(yǎng)基按成分分類有哪些,?上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,,根據(jù)培養(yǎng)基的組成成分,可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基兩大類,。天然培養(yǎng)基(native medium) 含有不完全明了化學(xué)成分的天然物質(zhì),。如蛋白胨、牛肉膏(粉),、肉浸液,、玉米漿、血液,、馬鈴薯等,。用此類材料配成的培養(yǎng)基很難做到不同批號(hào)之間質(zhì)量的穩(wěn)定一致,因此在選用原料時(shí)務(wù)必注明其商品名稱,、生產(chǎn)廠家及批號(hào),,對(duì)不同來源的原料應(yīng)先做小樣試驗(yàn)。此種培養(yǎng)基成本較低,,細(xì)菌繁殖較好,一般細(xì)菌培養(yǎng)以選用天然培養(yǎng)基為主,。細(xì)胞類培養(yǎng)基則可分為無血清培養(yǎng)基和含血清培養(yǎng)基兩類,。
按培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分是否完全區(qū)分:1.基本培養(yǎng)基,亦稱“較低限度培養(yǎng)基”,。只能滿足微生物野生型菌株生長需要的培養(yǎng)基,,稱為基本培養(yǎng)基,是含有營養(yǎng)要求較低成分的合成培養(yǎng)基,,常用“[-]”表示,。這種培養(yǎng)基往往缺少某些生長因子,,所以經(jīng)過誘變過的營養(yǎng)缺陷型菌株不能生長。2.完全培養(yǎng)基,,基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加血清等物質(zhì)后,,叫完全培養(yǎng)基,也叫(血清)細(xì)胞培養(yǎng)基,。完全培養(yǎng)基可用來滿足微生物的各種營養(yǎng)缺陷型菌株的生長需要,,常以“[+]”表示。3.補(bǔ)充培養(yǎng)基,,凡是只能滿足相應(yīng)的營養(yǎng)缺陷型生長需要的組合培養(yǎng)基,,稱為補(bǔ)充培養(yǎng)基,它是在基本培養(yǎng)基中加入該菌株不能合成的營養(yǎng)因子而組成的,。根據(jù)在基本培養(yǎng)基中加入的是A或B等營養(yǎng)因子代謝物而分別用[A]或[B]等來表示,。細(xì)菌類培養(yǎng)基則包括馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、麥芽瓊脂培養(yǎng)基等等,。BCG牛乳培養(yǎng)基
常見的培養(yǎng)基有LB培養(yǎng)基,,YPD培養(yǎng)基,M9培養(yǎng)基和DMEM培養(yǎng)基等,。膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基(DHL)
細(xì)胞培養(yǎng)過程中,,細(xì)胞培養(yǎng)基是不可或缺的,細(xì)胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),,也是培養(yǎng)細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境,。通常細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)需要加入血清,以維持細(xì)胞的生長和存活,。而除了血清之外,,部分細(xì)胞在培養(yǎng)過程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇(β-mercaptoethanol)等成分來維持細(xì)胞狀態(tài)。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細(xì)胞需要額外添加胰島素,,而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等細(xì)胞則需要添加β-巰基乙醇,,不同細(xì)胞加入量會(huì)有差異,需根據(jù)細(xì)胞類型判斷,。膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基(DHL)
上海瑞楚生物科技有限公司是國內(nèi)一家多年來專注從事培養(yǎng)基,,菌種,標(biāo)準(zhǔn)品,,酶的老牌企業(yè),。公司位于寶安公路4997號(hào)2號(hào)樓5樓,成立于2012-11-29,。公司的產(chǎn)品營銷網(wǎng)絡(luò)遍布國內(nèi)各大市場,。公司主要經(jīng)營培養(yǎng)基,菌種,,標(biāo)準(zhǔn)品,,酶等產(chǎn)品,,我們依托高素質(zhì)的技術(shù)人員和銷售隊(duì)伍,本著誠信經(jīng)營,、理解客戶需求為經(jīng)營原則,,公司通過良好的信譽(yù)和周到的售前、售后服務(wù),,贏得用戶的信賴和支持,。公司與行業(yè)上下游之間建立了長久親密的合作關(guān)系,確保培養(yǎng)基,,菌種,,標(biāo)準(zhǔn)品,酶在技術(shù)上與行業(yè)內(nèi)保持同步,。產(chǎn)品質(zhì)量按照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研發(fā)生產(chǎn),,絕不因價(jià)格而放棄質(zhì)量和聲譽(yù)。瑞楚生物秉承著誠信服務(wù),、產(chǎn)品求新的經(jīng)營原則,,對(duì)于員工素質(zhì)有嚴(yán)格的把控和要求,為培養(yǎng)基,,菌種,,標(biāo)準(zhǔn)品,酶行業(yè)用戶提供完善的售前和售后服務(wù),。