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放線菌分離瓊脂

來源: 發(fā)布時間:2023-05-24

動物細胞培養(yǎng)必需的溶液,平衡鹽水(BSS):Hanks 液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液,。PH調(diào)整液:3.7%,、5.6%、7.4%的NaHCO3溶液,、HEPES溶液(二羥乙基哌嗪乙烷磺酸)細胞消化液:胰蛋白酶溶液,、EDTA溶液、膠原酶溶液,。1)青,、鏈霉素,每毫升培養(yǎng)液含100U青霉素和100ug鏈霉素,。2)卡那霉素:終濃度為50ug/ml培養(yǎng)液,。3)制霉菌素:濃度25U/ml,,小瓶分裝,每瓶一次用完,。常用的動物血清主要有牛血清和馬血清,。牛血清分為胎牛血清和犢牛血清,前者來源少,,價格高,;后者要求剛產(chǎn)下尚未哺乳的小牛,因為哺乳后的小牛血清中可能含有更復(fù)雜的成分,。血清中已知的成分主要有蛋白質(zhì),、氨基酸、葡萄糖等,。蛋白質(zhì)主要是白蛋白和球蛋白,。在培養(yǎng)細胞時通常還需要添加藥物,以防止細菌污染,。放線菌分離瓊脂

培養(yǎng)基

天然培養(yǎng)基:天然培養(yǎng)基是指一類利用動物,、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如,。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。常用的天然有機營養(yǎng)物質(zhì)包括豆芽汁,、玉米粉,、土壤浸液、麩皮,、牛奶,、血清、椰子汁等,。天然培養(yǎng)基成本較低,,除在實驗室經(jīng)常使用外,也適于用來進行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn),。組合培養(yǎng)基:合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計而配制的培養(yǎng)基,。例如,高氏1號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等,。合成培養(yǎng)基有一定的配方,,配制合成培養(yǎng)基時重復(fù)性強,但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高,,微生物在其中生長速度較慢,,一般適于在實驗室用來進行有關(guān)微生物營養(yǎng)需求,、代謝、分類鑒定,、生物量測定,、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。D-環(huán)絲氨酸溶液致病菌常用的培養(yǎng)基包括營養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基,、馬鈴薯葡萄糖瓊培養(yǎng)基,。

放線菌分離瓊脂,培養(yǎng)基

培養(yǎng)基是高中生物很重要的一個知識點,種類多且復(fù)雜,,所以學(xué)起來也是比較難的,。下面小編給大家介紹一下培養(yǎng)基的分類,一起來了解一下培養(yǎng)基吧,!培養(yǎng)基是指供給微生物,、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì),。一般都含有碳水化合物,、含氮物質(zhì)、無機鹽(包括微量元素),、維生素和水等幾大類物質(zhì),。培養(yǎng)基既是提供細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細胞生長和繁殖的生存環(huán)境,。由于各類微生物對營養(yǎng)的要求不同及科學(xué)研究的目的或生產(chǎn)實踐的需要不同,,因而培養(yǎng)基的種類很多。迄今為止,,已有數(shù)千種不同的培養(yǎng)基,。

培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi),以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物,。各類微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的較適pH條件各不相同,,一般來講,細菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內(nèi)生長,,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內(nèi)生長,。值得注意的是,在微生物生長繁殖和代謝過程中,,由于營養(yǎng)物質(zhì)被分解利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累,,會導(dǎo)致培養(yǎng)基pH發(fā)生變化,若不對培養(yǎng)基pH條件進行控制,,往往導(dǎo)致微生物生長速度下降或(和)代謝產(chǎn)物產(chǎn)量下降,。因此,為了維持培養(yǎng)基pH的相對恒定,,通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑,,常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽(如KH2PO4和K2HPO4)組成的混合物,。K2HPO4溶液呈堿性,KH2PO4溶液呈酸性,,兩種物質(zhì)的等量混合溶液的pH為6.8,。當培養(yǎng)基中酸性物質(zhì)積累導(dǎo)致H+濃度增加時,H+與弱堿性鹽結(jié)合形成弱酸性化合物,,培養(yǎng)基pH不會過度降低,;如果培養(yǎng)基中OH-濃度增加,OH-則與弱酸性鹽結(jié)合形成弱堿性化合物,,培養(yǎng)基pH也不會過度升高,。含血清培養(yǎng)基是一種以動物血清為主的培養(yǎng)基普遍用于誘導(dǎo)細胞分化和胚胎發(fā)育研究等方面。

放線菌分離瓊脂,培養(yǎng)基

細菌培養(yǎng)基之牛肉膏瓊脂培養(yǎng)基:牛肉膏0.3g ,,蛋白胨1.0g,,氯化鈉0.5g,瓊脂1.5g,,水100ml在燒杯內(nèi)加水100ml,,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化鈉,,用蠟筆在燒杯外作上記號后,,放在火上加熱。待燒杯內(nèi)各組分溶解后,,加入瓊脂,,不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解后補足失水,,用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調(diào)整pH值到7.2-7.6,,分裝在各個試管里,加棉花塞,,用高壓蒸汽滅菌:1.05千克每平方厘米,、121攝氏度維持15-30分鐘。牛心培養(yǎng)基:取新鮮牛心(除去脂肪和血管)250克,,用刀細細剁成肉末后,,加入500毫升蒸餾水和5克蛋白胨。在燒杯上做好記號,,煮沸,,轉(zhuǎn)用文火燉2小時。過濾,,濾出的肉末干燥處理,,濾液pH值調(diào)到7.5左右。每支試管內(nèi)加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心,,滅菌,,備用。微生物的供能方式會影響它對營養(yǎng)物質(zhì)的利用,,因此不同微生物需要不同成分的培養(yǎng)基,。MD培養(yǎng)基

經(jīng)過無菌處理的培養(yǎng)基能保證無細菌污染。放線菌分離瓊脂

培養(yǎng)基的分類有幾種呢,?按培養(yǎng)基組成物質(zhì)的化學(xué)成分區(qū)分:1.天然培養(yǎng)基,,天然培養(yǎng)基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基,。例如,。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等,。2.組合培養(yǎng)基,,合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成,、人工設(shè)計而配制的培養(yǎng)基,。例如。高氏1號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等,。3.半組合培養(yǎng)基 ,,指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基,。例如,,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。放線菌分離瓊脂

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