選擇性培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基,。其功能是使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌,,從而提高該菌的篩選效率。酵母菌富集培養(yǎng)基:葡萄糖5%,,尿素0.1%,,硫化銨0.1%,磷酸二氫鉀0.25%,,磷酸氫二鈉0.05%,,七水合硫酸鎂0.1%,七水合硫酸鐵0.01%,,酵母膏0.05%,,孟加拉紅0.003%,pH4.5,。富集好氧自生固氮菌:甘露醇1%,,磷酸二氫鉀0.02%,七水合硫酸鎂0.02%,,氯化鈉0.02%,,二水合硫酸鈣0.01%,,碳酸鈣0.5%培養(yǎng)基的配方也會(huì)受到環(huán)境,、藥物和其他外部壓力的影響,,因此,在實(shí)際應(yīng)用中需要不斷進(jìn)行調(diào)整和改進(jìn),。麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MacC) ChP
近年來(lái),,國(guó)內(nèi)外利用某些細(xì)菌特有的酶,選擇相應(yīng)的作用底物,,研制出某些細(xì)菌專門用的的顯色培養(yǎng)基,,用于細(xì)菌的分離鑒別,,收到了良好的效果,這種顯色培養(yǎng)基實(shí)際上也是鑒別培養(yǎng)基,。其基本原理是將色原(或熒光原)與細(xì)菌作用底物的結(jié)合物加于培養(yǎng)基中,當(dāng)細(xì)菌含有相應(yīng)酶時(shí),,使該結(jié)合物分解而顯色(或顯示熒光),。如色原糖苷結(jié)合物在糖苷酶作用下分解,,使糖苷與色原分離,并顯示顏色,;熒光氨基酸結(jié)合物(不顯熒光)在氨基肽酶作用下,使氨基酸與熒光物質(zhì)分離而顯示熒光,。常用顯色的色原有α-萘酚,、β-萘酚,、鄰位硝基酚、對(duì)位硝基酚,、對(duì)硝基苯胺,、酚酞、2-氨基4-硝基苯等,;常用的熒光物有4-甲基傘形酮(又稱7-羥基4-甲基香豆素)等,。目前,顯色培養(yǎng)基已用于多種細(xì)菌的分離鑒別培養(yǎng),,如沙門菌、大腸埃希菌,、李斯特菌、雙歧桿菌和乳酸桿菌,、白色念珠菌等顯色培養(yǎng)基,。阿須貝氏(Ashby)培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)無(wú)菌處理的培養(yǎng)基能保證無(wú)細(xì)菌污染,。
細(xì)菌培養(yǎng)基之面粉瓊脂培養(yǎng)基:面粉60g,,瓊脂20g,水1000ml把面粉用水調(diào)成糊狀,,加水到500ml,放在文火上煮30分鐘,。另取500ml水,,放入瓊脂,,加熱煮沸到溶解后,把兩液調(diào)勻,,補(bǔ)充水分,調(diào)整pH值到7.4,,分裝,滅菌,,備用。微藻培養(yǎng)基,BG-11培養(yǎng)基:NaNO3 1.5g,,K2HPO4 ·3H2O0.04g,,MgSO4·7H2O0.075g,,CaCl2 ·2H2O0.036g Citric Acid (檸檬酸)0.006g,F(xiàn)erric ammonium citrate(檸檬酸鐵銨0.006g,,EDTA (dinatrium-salt) 0.001g,Na2CO3 0.02g,,A5 + Co solution * (A5溶液1000×)1ml Distilled Water (蒸餾水)919ml。
培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度合適時(shí)微生物才能生長(zhǎng)良好,,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)低時(shí)不能滿足微生物正常生長(zhǎng)所需,濃度過(guò)高時(shí)則可能對(duì)微生物生長(zhǎng)起抑制作用,,例如高濃度糖類物質(zhì),、無(wú)機(jī)鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進(jìn)微生物的生長(zhǎng),,反而起到抑菌或殺菌作用,。另外,培養(yǎng)基中各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比也直接影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和(或)代謝產(chǎn)物的形成和積累,,其中碳氮比(C/N)的影響較大,。嚴(yán)格地講,碳氮比指培養(yǎng)基中碳元素與氮元素的物質(zhì)的量比值,,有時(shí)也指培養(yǎng)基中還原糖與粗蛋白之比,。例如,在利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的過(guò)程中,,培養(yǎng)基碳氮比為4/1時(shí),,菌體大量繁殖,谷氨酸積累少,;當(dāng)培養(yǎng)基碳氮比為3/1時(shí),,菌體繁殖受到抑制,谷氨酸產(chǎn)量則大量增加,。 培養(yǎng)基根據(jù)功能分為選擇性培養(yǎng)基,、區(qū)分性培養(yǎng)基、富集培養(yǎng)基等,。
bFGF是一個(gè)肝素結(jié)合的多膚類絲裂源,,普遍分布于各種組織中。bFGF 是一種重要的細(xì)胞增殖分化調(diào)節(jié)劑,,可刺激多種細(xì)胞的增殖,。有研究發(fā)現(xiàn)它對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞也有促增殖作用。bFGF 主要是與細(xì)胞膜上FGF受體結(jié)合發(fā)揮作用,,刺激與增殖有關(guān)的基因表達(dá),。Thomson 等認(rèn)為,像其他體外培養(yǎng)的人體細(xì)胞一樣,,hES 細(xì)胞要求 bFGF 的存在以促進(jìn)增殖,。同理EGF(上皮生長(zhǎng)因子) , 是人體內(nèi)的一種活性物質(zhì),,由53個(gè)氨基組成的活細(xì)胞,藉由刺激表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體之酪氨酸磷酸化,,達(dá)到修補(bǔ)增生肌膚表層細(xì)胞,,據(jù)說(shuō)對(duì)受傷、受損之表皮肌膚擁有很好的療效,,其較大特點(diǎn)是能夠促進(jìn)細(xì)胞的增殖分化,。所以加入它們都是促進(jìn)細(xì)胞增殖的。液體培養(yǎng)基,、固體培養(yǎng)基和半固態(tài)培養(yǎng)基是常用的培養(yǎng)基種類,。BETA-SSA瓊脂基礎(chǔ)
有些培養(yǎng)基需要添加血清或其它富含蛋白質(zhì)的物質(zhì)以促進(jìn)生長(zhǎng)。麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MacC) ChP
1951年厄爾開(kāi)發(fā)了供動(dòng)物細(xì)胞體外生長(zhǎng)的人工合成培養(yǎng)基(MEM),。合成培養(yǎng)基的種類相當(dāng)多,。合成培養(yǎng)基成分已知,便于對(duì)實(shí)驗(yàn)條件的控制,。但與天然培養(yǎng)基相比,,有些天然的未知成分尚無(wú)法用已知的化學(xué)成分所替代,因此,,細(xì)胞培養(yǎng)中使用的基礎(chǔ)合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,,以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的作法是加入小牛血清,。動(dòng)物血清成分復(fù)雜,,各種生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚,。血清對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)很有效,,但后期對(duì)培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測(cè)造會(huì)成一定困難,。另外高質(zhì)量的動(dòng)物血清來(lái)源有限,,成本高,限制了它的大量使用,。無(wú)血清培養(yǎng)基不加動(dòng)物血清,,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入細(xì)胞生長(zhǎng)有效因子等。麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MacC) ChP
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