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來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-05-26

按培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分是否完全區(qū)分:1.基本培養(yǎng)基,,亦稱“較低限度培養(yǎng)基”,。只能滿足微生物野生型菌株生長(zhǎng)需要的培養(yǎng)基,稱為基本培養(yǎng)基,,是含有營(yíng)養(yǎng)要求較低成分的合成培養(yǎng)基,,常用“[-]”表示。這種培養(yǎng)基往往缺少某些生長(zhǎng)因子,,所以經(jīng)過誘變過的營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株不能生長(zhǎng),。2.完全培養(yǎng)基,基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加血清等物質(zhì)后,,叫完全培養(yǎng)基,,也叫(血清)細(xì)胞培養(yǎng)基。完全培養(yǎng)基可用來滿足微生物的各種營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的生長(zhǎng)需要,,常以“[+]”表示,。3.補(bǔ)充培養(yǎng)基,凡是只能滿足相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)缺陷型生長(zhǎng)需要的組合培養(yǎng)基,,稱為補(bǔ)充培養(yǎng)基,,它是在基本培養(yǎng)基中加入該菌株不能合成的營(yíng)養(yǎng)因子而組成的。根據(jù)在基本培養(yǎng)基中加入的是A或B等營(yíng)養(yǎng)因子代謝物而分別用[A]或[B]等來表示,。培養(yǎng)基是用于微生物,、細(xì)胞、組織等體外培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)精制的物質(zhì),。50%乳酸鈉溶液

培養(yǎng)基

L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎,?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?L-谷氨酰胺(L-Glutamine)是細(xì)胞生長(zhǎng)的必須氨基酸,,可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源,,參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝,。L-谷氨酰胺在溶液中狀態(tài)不穩(wěn)定,它的降解速率隨保存時(shí)間,,保存溫度及保存環(huán)境pH值等變化而變化,。L-丙胺酰-谷氨酰胺(L-alanyl-L-glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中普遍使用的L-谷氨酰胺的替代品,其在水溶液中穩(wěn)定性高,,即可保持長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定的營(yíng)養(yǎng)供給,,也降低了分解產(chǎn)物造成的細(xì)胞毒性。L-丙胺酰-谷氨酰胺溶液(L-alanyl-L-glutamineslution)可作為哺乳動(dòng)物貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑,。與谷氨酰胺相比,,L-丙胺酰-谷氨酰胺不會(huì)自行降解成氨而導(dǎo)致細(xì)胞毒性,作為添加物培養(yǎng)條件更加可控,,可有效提高細(xì)胞活力。LB肉湯(含牛膽鹽)有些培養(yǎng)基需要添加血清或其它富含蛋白質(zhì)的物質(zhì)以促進(jìn)生長(zhǎng),。

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以MS培養(yǎng)基母液為基礎(chǔ),,向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,,鐵鹽100×母液20mL,,維生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,,甘氨酸200×母液10mL,,配制得MS培養(yǎng)基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,,0.5mg·L-1的NAA8mL,。然后加入實(shí)際配制培養(yǎng)基體積約2/3-3/4的蒸餾水,加入40g蔗糖后攪拌使其溶化,,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl調(diào)整pH值至5.8-6.0,。加入14g瓊脂,將鋁鍋置于電爐上,,攪拌加熱使瓊脂完全溶化,,然后用蒸餾水定容至終體積2L,繼續(xù)加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中,。

不同類型微生物生長(zhǎng)對(duì)氧化還原電位(F)的要求不一樣,,一般好氧性微生物在F值為+0.1V以上時(shí)可正常生長(zhǎng),一般以+0.3—+0.4V為宜,,厭氧性微生物只能在F值低于+0.1V條件下生長(zhǎng),,兼性厭氧微生物在F值為+0.1V以上時(shí)進(jìn)行好氧呼吸,在+0.1V以下時(shí)進(jìn)行發(fā)酵,。F值與氧分壓和pH有關(guān),,也受某些微生物代謝產(chǎn)物的影響,。在pH相對(duì)穩(wěn)定的條件下,可通過增加通氣量(如振蕩培養(yǎng),、攪拌)提高培養(yǎng)基的氧分壓,,或加入氧化劑,從而增加F值,;在培養(yǎng)基中加入抗壞血酸,、硫化氫、半胱氨酸,、谷胱甘肽,、二硫蘇糖醇等還原性物質(zhì)可降低F值。孟德爾-韋伯利法可以計(jì)算培養(yǎng)基的可利用能量,。

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半組合培養(yǎng)基:指一類主要以化學(xué)試劑配制,,同時(shí)還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基,。固體培養(yǎng)基:1.液體培養(yǎng)基:80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基,。2.固體培養(yǎng)基:一類配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì),。根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基,、天然固態(tài)培養(yǎng)基,、濾膜。3.半固體培養(yǎng)基:指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基,。4.脫水培養(yǎng)基:又稱預(yù)制干燥培養(yǎng)基,,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。培養(yǎng)基根據(jù)功能分為選擇性培養(yǎng)基,、區(qū)分性培養(yǎng)基,、富集培養(yǎng)基等。蘇通液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)

半固態(tài)培養(yǎng)基是一種介于液態(tài)培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基之間的混合形式,,常用于篩選微生物菌株,。50%乳酸鈉溶液

天然培養(yǎng)基:天然培養(yǎng)基是指一類利用動(dòng)物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基,。例如,。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等,。常用的天然有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括豆芽汁,、玉米粉、土壤浸液,、麩皮,、牛奶,、血清、椰子汁等,。天然培養(yǎng)基成本較低,,除在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常使用外,也適于用來進(jìn)行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn),。組合培養(yǎng)基:合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計(jì)而配制的培養(yǎng)基,。例如,,高氏1號(hào)培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基有一定的配方,,配制合成培養(yǎng)基時(shí)重復(fù)性強(qiáng),,但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高,微生物在其中生長(zhǎng)速度較慢,,一般適于在實(shí)驗(yàn)室用來進(jìn)行有關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)需求,、代謝、分類鑒定,、生物量測(cè)定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作,。50%乳酸鈉溶液

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