培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi),,以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物。各類微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的較適pH條件各不相同,,一般來講,,細菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內(nèi)生長,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內(nèi)生長,。值得注意的是,,在微生物生長繁殖和代謝過程中,由于營養(yǎng)物質(zhì)被分解利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累,,會導致培養(yǎng)基pH發(fā)生變化,,若不對培養(yǎng)基pH條件進行控制,,往往導致微生物生長速度下降或(和)代謝產(chǎn)物產(chǎn)量下降。因此,,為了維持培養(yǎng)基pH的相對恒定,,通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑,常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽(如KH2PO4和K2HPO4)組成的混合物,。K2HPO4溶液呈堿性,,KH2PO4溶液呈酸性,兩種物質(zhì)的等量混合溶液的pH為6.8,。當培養(yǎng)基中酸性物質(zhì)積累導致H+濃度增加時,,H+與弱堿性鹽結(jié)合形成弱酸性化合物,培養(yǎng)基pH不會過度降低,;如果培養(yǎng)基中OH-濃度增加,,OH-則與弱酸性鹽結(jié)合形成弱堿性化合物,培養(yǎng)基pH也不會過度升高,。液體培養(yǎng)基,、固體培養(yǎng)基和半固態(tài)培養(yǎng)基是常用的培養(yǎng)基種類,。七葉苷培養(yǎng)基
在培養(yǎng)基中加入 HEPES 有何好處?培養(yǎng)基中常用的緩沖體系是碳酸氫鹽,,它可提供營養(yǎng),但卻在生理 pH 條件下會降低緩沖能力,。而HEPES 是一種很強的緩沖劑,,能使細胞培養(yǎng)基在 pH7.2-7.6 條件下緩沖能力增強。HEPES溶液:是一種弱酸,,中文名字是羥乙基哌秦乙硫磺酸,,主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變動。在開放式培養(yǎng)條件下,,觀察細胞時培養(yǎng)基脫離了 5%CO2 的環(huán)境,,CO2 氣體迅速逸出,pH迅速升高,,若加了HEPES,,此時可以維持 pH7.0 左右。一般在進行克隆化培養(yǎng)時要添加HEPES,。神經(jīng)細胞原代培養(yǎng)的過程中能用到,。胡蘿卜培養(yǎng)基 胡蘿卜浸出液葡萄糖培養(yǎng)基在有些情況下,培養(yǎng)基還需要進行一些化學處理,。
上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,,厭氧菌培養(yǎng)基(anaerobic media) 供厭氧菌的分離、培養(yǎng)和鑒別用的培養(yǎng)基,,稱為厭氧菌培養(yǎng)基,。由于厭氧菌自身缺乏有氧代謝所必需的各種酶,,如細胞色素和細胞色素氧化酶、過氧化氫酶和過氧化物酶,、超氧化歧化酶,,所以造成自身代謝的缺陷,無法進行有氧代謝,,而無氧酵解所產(chǎn)生的能量又不足,,因此厭氧菌在正常的大氣環(huán)境下不能生長和生存。為使厭氧菌能正常生長,,必須制備營養(yǎng)成分豐富,,氧化還原電勢較低,具有特殊生長因子的專門用的培養(yǎng)基,。
合成培養(yǎng)基(synthetic medium) 由已知化學成分的營養(yǎng)物質(zhì)組成的培養(yǎng)基,。根據(jù)微生物對營養(yǎng)要求的不同,可完全由無機鹽或化合物組成,,如:氨基酸,、糖、嘌呤,、嘧啶,、維生素等,其組成成分已知,,只要嚴格操作,,各批次間質(zhì)量可做到穩(wěn)定一致。此培養(yǎng)基可用來檢測某種營養(yǎng)物或藥物對微生物代謝的影響,。組織細胞培養(yǎng)液均屬合成培養(yǎng)基,。合成培養(yǎng)基的成本較高,其價格相當于同類天然培養(yǎng)基的幾倍以至于幾十倍,。只含幾種無機鹽的合成培養(yǎng)基,,只適用于自養(yǎng)菌的培養(yǎng),如培養(yǎng)亞硝化細菌,、氧化硫桿菌等的培養(yǎng)基,。有些培養(yǎng)基大部分成分為已知化學結(jié)構(gòu)的營養(yǎng)物質(zhì),其中的個別或少數(shù)成分為未明化學成分的必須營養(yǎng)物,,成為半合成培養(yǎng)基,,如百日咳菌苗生產(chǎn)用的水解酪素培養(yǎng)基。常見的培養(yǎng)基有LB培養(yǎng)基,,YPD培養(yǎng)基,,M9培養(yǎng)基和DMEM培養(yǎng)基等。
在培養(yǎng)基中加人某種抑制劑和指示劑,,抑制某些細菌生長,,促進目的菌的繁殖,,并使所生長的細菌菌落具有一定特征,以助鑒別挑選,,這類培養(yǎng)基稱為選擇性鑒別培養(yǎng)基,。如SS瓊脂,在該培養(yǎng)基配方中含有乳糖(反應底物),、中性紅和檸檬酸鐵銨(指示劑),、燦爛綠及膽鹽等(抑菌劑)。燦爛綠和膽鹽等抑菌劑能抑制革蘭氏陽性菌及部分大腸埃希菌的生長,,而對沙門菌及志賀菌基本無影響,,而且大腸埃希菌能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸,使菌落變紅色,,沙門菌和志賀菌不發(fā)酵乳糖,,其菌落為無色。如細菌產(chǎn)生硫化氫,,則與檸檬酸鐵銨反應生成硫化亞鐵沉淀,,菌落中心呈黑色或褐色。以此達到鑒別的目的,。培養(yǎng)基類型和配方可以根據(jù)需要進行定制,,以滿足特定的實驗需求。Miller培養(yǎng)基
培養(yǎng)基中的各種成分會被微生物不同速率地利用,,因此需要在適當?shù)臅r間點更新培養(yǎng)基以維持細胞的生長狀態(tài),。七葉苷培養(yǎng)基
1951年厄爾開發(fā)了供動物細胞體外生長的人工合成培養(yǎng)基(MEM),。合成培養(yǎng)基的種類相當多,。合成培養(yǎng)基成分已知,便于對實驗條件的控制,。但與天然培養(yǎng)基相比,,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學成分所替代,因此,,細胞培養(yǎng)中使用的基礎合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,,以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的作法是加入小牛血清,。動物血清成分復雜,,各種生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚,。血清對細胞生長很有效,,但后期對培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測造會成一定困難,。另外高質(zhì)量的動物血清來源有限,,成本高,,限制了它的大量使用。無血清培養(yǎng)基不加動物血清,,在基礎培養(yǎng)基中加入細胞生長有效因子等,。七葉苷培養(yǎng)基
上海瑞楚生物科技有限公司是一家從事培養(yǎng)基,菌種,,標準品,,酶研發(fā)、生產(chǎn),、銷售及售后的貿(mào)易型企業(yè),。公司坐落在寶安公路4997號2號樓5樓,成立于2012-11-29,。公司通過創(chuàng)新型可持續(xù)發(fā)展為重心理念,,以客戶滿意為重要標準。公司主要經(jīng)營培養(yǎng)基,,菌種,,標準品,酶等產(chǎn)品,,產(chǎn)品質(zhì)量可靠,,均通過化工行業(yè)檢測,嚴格按照行業(yè)標準執(zhí)行,。目前產(chǎn)品已經(jīng)應用與全國30多個省,、市、自治區(qū),。我們以客戶的需求為基礎,,在產(chǎn)品設計和研發(fā)上面苦下功夫,一份份的不懈努力和付出,,打造了瑞楚生物產(chǎn)品,。我們從用戶角度,對每一款產(chǎn)品進行多方面分析,,對每一款產(chǎn)品都精心設計,、精心制作和嚴格檢驗。上海瑞楚生物科技有限公司注重以人為本,、團隊合作的企業(yè)文化,,通過保證培養(yǎng)基,菌種,,標準品,,酶產(chǎn)品質(zhì)量合格,以誠信經(jīng)營、用戶至上,、價格合理來服務客戶,。建立一切以客戶需求為前提的工作目標,真誠歡迎新老客戶前來洽談業(yè)務,。