天然培養(yǎng)基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基,。例如,。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等,。常用的天然有機營養(yǎng)物質(zhì)包括豆芽汁,、玉米粉、土壤浸液,、麩皮,、牛奶、血清,、椰子汁等,。天然培養(yǎng)基成本較低,,除在實驗室經(jīng)常使用外,也適于用來進行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn),。合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計而配制的培養(yǎng)基,。例如,。高氏1號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基有一定的配方,,配制合成培養(yǎng)基時重復(fù)性強,,但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高,微生物在其中生長速度較慢,,一般適于在實驗室用來進行有關(guān)微生物營養(yǎng)需求,、代謝、分類鑒定,、生物量測定,、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。Hugh-Leifson培養(yǎng)基(O/F試驗用)HL培養(yǎng)基 葡萄糖銨培養(yǎng)基 營養(yǎng)半固體瓊脂(NSA) Rustigian氏尿素培養(yǎng)液,。平板計數(shù)瓊脂(PCA)標準方法瓊脂(SA)
培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)濃度合適時微生物才能生長良好,,營養(yǎng)物質(zhì)濃度過低時不能滿足微生物正常生長所需,濃度過高時則可能對微生物生長起抑制作用,,例如高濃度糖類物質(zhì),、無機鹽、重金屬離子等不只不能維持和促進微生物的生長,,反而起到抑菌或殺菌作用,。另外,培養(yǎng)基中各營養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產(chǎn)物的形成和積累,,其中碳氮比(C/N)的影響較大,。嚴格地講,碳氮比指培養(yǎng)基中碳元素與氮元素的物質(zhì)的量比值,,有時也指培養(yǎng)基中還原糖與粗蛋白之比,。例如,在利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的過程中,,培養(yǎng)基碳氮比為4/1時,,菌體大量繁殖,谷氨酸積累少,;當培養(yǎng)基碳氮比為3/1時,,菌體繁殖受到抑制,谷氨酸產(chǎn)量則大量增加,。再如,,在維生素發(fā)酵生產(chǎn)過程中,,可以通過控制培養(yǎng)基中碳源與遲效氮(或碳)源之間的比例來控制菌體生長與維生素的合成協(xié)調(diào)。B5培養(yǎng)基(不含蔗糖和瓊脂)如果細菌的生長受到限制,,可以嘗試調(diào)整培養(yǎng)基的成分或添加輔助物質(zhì),,例如控制培養(yǎng)基中氧氣的含量。
基礎(chǔ)培養(yǎng)基:含有基礎(chǔ)生長所需的基本營養(yǎng)成分,,較常用的是肉浸液,俗稱肉湯,,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨,。基礎(chǔ)培養(yǎng)基普遍用于細菌的增菌,、檢驗,,也是制備其他培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。營養(yǎng)培養(yǎng)基:在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中可加入葡萄糖,、血液,、生長因子等特殊成分,供營養(yǎng)要求較高的細菌和需要特殊生長因子的細菌生長,。較常用的是血瓊脂平板,、巧克力血平板等。特殊培養(yǎng)基:包括厭氧培養(yǎng)基和細菌L型培養(yǎng)基等,。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基,,除含營養(yǎng)成分外,還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢,,如皰肉培養(yǎng)基,、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對細胞壁缺損的細菌L型,,由于胞內(nèi)滲透壓較高,,故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。
對于已經(jīng)購買來的預(yù)裝培養(yǎng)基,,其內(nèi)部較初的狀態(tài)已經(jīng)是無菌的,。因此,在通常情況下,,我們不需要對新的預(yù)裝培養(yǎng)基進行任何形式的消毒處理,。只需要在使用之前,檢查預(yù)裝培養(yǎng)基瓶口是否無菌,,便可以直接使用,。在使用過程中,應(yīng)當嚴格遵守實驗室操作規(guī)范,,避免外界微生物的污染,。對于需要自制的培養(yǎng)基而言,,其情況也不盡相同。如果自制的培養(yǎng)基中包含天然成分,,那么在自制之后就需要進行消毒處理,,以殺死培養(yǎng)基中可能存在的微生物。在消毒處理之后,,再將培養(yǎng)基裝入瓶中,,就可以進行進一步的實驗使用。同時,,在使用自制的預(yù)裝培養(yǎng)基時,,需要嚴格控制其培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時間,、以及實驗環(huán)境等參數(shù),,以保證實驗結(jié)果的準確性。培養(yǎng)基的配方也會受到環(huán)境,、藥物和其他外部壓力的影響,,因此,在實際應(yīng)用中需要不斷進行調(diào)整和改進,。
干粉培養(yǎng)基的保存和注意事項:干粉培養(yǎng)基的儲存條件應(yīng)保持干燥,、防潮、防曬,,并存放于陰涼干燥處,,避免受到光線、溫度,、濕度等外界環(huán)境的影響,。一旦開封,干粉培養(yǎng)基應(yīng)立即密封并放回原包裝中,,以免受到環(huán)境中的污染和變質(zhì),。在使用干粉培養(yǎng)基時,應(yīng)注意其有效期和使用方法,。有效期是指干粉培養(yǎng)基在儲存條件下能夠保持理想品質(zhì)的時間,,一般為 2 年至數(shù)年不等。在該期限內(nèi)使用的干粉培養(yǎng)基能夠保證培養(yǎng)實驗的有效性和可重復(fù)性,。同時,,使用干粉培養(yǎng)基時應(yīng)遵循無菌操作的原則,注意消毒,、凈化和防止污染,,保證實驗結(jié)果的準確和可靠。黃色布氏菌芽孢桿菌常用的培養(yǎng)基為營養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基,。胰蛋白胨酵母浸粉肉湯
培養(yǎng)基的傳遞需要在制備和使用期間保持良好的無菌技術(shù),,避免細菌交叉污染,。平板計數(shù)瓊脂(PCA)標準方法瓊脂(SA)
對于預(yù)裝培養(yǎng)基的儲存溫度應(yīng)該是在 4℃ 到 8℃ 的范圍內(nèi)。這是因為預(yù)裝培養(yǎng)基中含有大量的營養(yǎng)物質(zhì),,這些物質(zhì)在常溫下很容易被微生物利用,,從而失去營養(yǎng)價值。同時,,4℃ 到 8℃ 的溫度可以有效地防止微生物的生長和繁殖,,從而保證培養(yǎng)基的質(zhì)量和效果。對于預(yù)裝培養(yǎng)基的儲存條件應(yīng)該是“干燥,、陰涼,、避光和密封”。這是因為預(yù)裝培養(yǎng)基中含有一定比例的水分,,如果儲存條件不當,就會導(dǎo)致微生物的生長和繁殖,,從而影響實驗結(jié)果的準確性,。因此,我們需要選擇干燥,、陰涼,、避光和密封的地方進行存儲。在存儲時,,應(yīng)該避免陽光直射,、潮濕和高溫的環(huán)境,以免影響預(yù)裝培養(yǎng)基的質(zhì)量和穩(wěn)定性,。同時,,在儲存過程中,應(yīng)該注意避免磕碰和摔落,,提高預(yù)裝培養(yǎng)基的存儲安全性,。平板計數(shù)瓊脂(PCA)標準方法瓊脂(SA)