3D數(shù)字PCR為液體活檢提供技術(shù)支持液體活檢是一種非侵入性的檢測基因及臨床效果的一種方法,，目前可能正在開展有關(guān)3D數(shù)字PCR在在液體活檢中的療效，為后期臨床提供更多可靠的指導(dǎo)作用,。報道稱“無創(chuàng)傷性肺檢測技術(shù)即將登陸中國”,。隨著基因檢測技術(shù)，如類似3D數(shù)字PCR技術(shù)的發(fā)展,，推動我們將進(jìn)入了“DNA的應(yīng)用商城”這樣的新時代,，如23andme,、華大基因等專業(yè)的檢測服務(wù)機(jī)構(gòu)，提供更加專業(yè)的基因檢測結(jié)果,，經(jīng)基因報告解讀師或遺傳咨詢師進(jìn)行通俗的解讀,，讓我們每一個人都能夠了解自己的基因，擁有自己的“生命之書”,，讓我們更加健康的生活。精細(xì)醫(yī)療其實本質(zhì)是應(yīng)用生物學(xué)信息與大數(shù)據(jù)科學(xué)的交叉發(fā)展的新型醫(yī)學(xué)概念與醫(yī)療模式,。對于精細(xì)醫(yī)療,，重點(diǎn)在于“精細(xì)”，不僅只是簡單的基因測序如此簡單,，更需要精細(xì)的診斷與精細(xì)的,。從市場規(guī)模來看，目前數(shù)字PCR市場規(guī)模并不大,，全球約1.5億至2.5億美元,。美國數(shù)字PCR儀器

根據(jù)泊松分布的定義和適用條件可知，如果我們設(shè)微液滴總數(shù)為N,，投入的靶序列拷貝數(shù)為M,，那么“每個微液滴中的靶序列拷貝數(shù)”的概率分布是近似滿足泊松分布的。理解之前,，首先要明確一點(diǎn),，在檢測的過程中，并不是說一個樣本中檢測到了幾個亮點(diǎn),，這個反應(yīng)當(dāng)中就有幾個目標(biāo)基因的拷貝,。因為目標(biāo)基因的片段，在微滴當(dāng)中的分布,，是符合泊松分布的（也就是說進(jìn)不進(jìn)的概率相等,，并且相互獨(dú)立）。所以,，一個發(fā)光的微滴中,，可能有一個或者三個四個，甚至更多個目標(biāo)基因的拷貝,。因此,，發(fā)光的微滴數(shù)與原始的基因拷貝數(shù)并不是一對一的對應(yīng)關(guān)系。美國數(shù)字PCR儀器臻準(zhǔn)推出新款數(shù)字PCR產(chǎn)品：AccuONE2.0數(shù)字PCR系統(tǒng),。

使用ddPCR的一個主要優(yōu)點(diǎn)在于,，定量不是相對的。微滴式數(shù)字PCR計算事件的數(shù)量,，因此可以確定檢測極限和比較低起始量,，以便達(dá)到所需的靈敏度,。在連續(xù)監(jiān)控或比較不同患者的效果時，這可以更準(zhǔn)確地比較負(fù)荷,，因為所測得的豐度不是相對的,。經(jīng)過實驗證實，ddPCRKRASG12/G13ScreeningKit也能夠檢測患者cfDNA樣品中的KRAS突變（圖2）,。這些患者的血漿樣品購自ConversantBio和ProMedDx,，之前已通過FFPE基因分型被分為KRAS突變陽性或陰性。歡迎咨詢廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司,。

dPCR在使用過程中需要特別注意體積誤差造成的結(jié)果偏差,。體積誤差對于測量拷貝數(shù)濃度會產(chǎn)生偏差。目前dPCR中體積優(yōu)化方法以光學(xué)顯微鏡觀測為主,。分散體積的差異會增加拷貝數(shù)結(jié)果的不確定性,，Emslie等使用光學(xué)顯微鏡縱向拍照比較圖片邊緣的微小差異，考察了數(shù)字PCR系統(tǒng)中每個微孔內(nèi)和孔與孔間的體積差異對實驗結(jié)果的影響程度,。Corbisier等使用微滴數(shù)字PCR對6種不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)棉籽粉質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)[ERM-AD623a-f,，濃度范圍（10~10）copies/ul]進(jìn)行分析，優(yōu)化了液滴體積得到相應(yīng)校正因子,，并使用該校正因子發(fā)現(xiàn)并校準(zhǔn)了運(yùn)行軟件中液滴體積不變的假設(shè)而引起的數(shù)據(jù)偏離,，數(shù)據(jù)結(jié)果的一致性有明顯提高。數(shù)字PCR應(yīng)用前景廣闊,，可用于病原微生物檢測,、基因檢測、無創(chuàng)產(chǎn)前篩查,、測序結(jié)果驗證等領(lǐng)域,。

數(shù)字PCR平臺的評價指標(biāo)有：分割單元數(shù)，熒光通道數(shù),，操作復(fù)雜性和污染風(fēng)險,。但是重要的是檢測準(zhǔn)確性，評估數(shù)字PCR平臺的一種方法是使用多個數(shù)字PCR平臺互相驗證,，另一種方法是使用定值準(zhǔn)確的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),。目前的三代的PCR技術(shù)各有各的優(yōu)缺點(diǎn)，也各有各的應(yīng)用領(lǐng)域,，并不是一代取代一代的關(guān)系,。技術(shù)的不斷進(jìn)步給PCR技術(shù)注入了新的活力，使其能解鎖一個又一個的應(yīng)用方向,，使核酸檢測更方便,、更準(zhǔn)確。目前dPCR儀器的價格仍然十分昂貴,，但隨著系統(tǒng)加工工藝的改進(jìn)以及使用較便宜的材料,，聚合成更小的體積[556],，其價格將會不斷的降低，使其應(yīng)用到更多的檢測中,。數(shù)字PCR在檢測珍貴樣品和樣品核酸存在降解時具有明顯的優(yōu)勢,。雙螺旋生物儀器數(shù)字PCR市場前景

數(shù)字PCR的應(yīng)用甚廣，除了可應(yīng)用于進(jìn)行突變的檢測以外,，也可運(yùn)用于基因擴(kuò)增的檢測,。美國數(shù)字PCR儀器

作為時下的熱點(diǎn)技術(shù)，數(shù)字PCR是將核酸樣品分配到大量單獨(dú),、平行的微反應(yīng)單元（nL,，納升級別）中，使得每個反應(yīng)單元中盡可能含有1個模板分子,，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行擴(kuò)增、檢測和分布統(tǒng)計,，從而實現(xiàn)靶標(biāo)分子的比較 計數(shù),。（圖：數(shù)字PCR技術(shù)原理）根據(jù)微反應(yīng)單元的不同形式，數(shù)字PCR產(chǎn)品可分為微板式,、微滴式和芯片式等,。目前，市場上主要的數(shù)字PCR產(chǎn)品主要是基于微滴式和芯片式,，如Bio-Rad公司的QX200微滴式系統(tǒng)和ThermoFisher公司的QuantStudio系統(tǒng)等,。與一、二代PCR技術(shù)相比,，數(shù)字PCR具有很多優(yōu)勢：一是特異性,、靈敏性均有顯著提高；二是在不依賴內(nèi)參和標(biāo)準(zhǔn)曲線的前提下,，可直接得到比較 量化指標(biāo),；三是微反應(yīng)單元相互獨(dú)立、封閉,，避免了PCR抑制劑及不同核酸分子擴(kuò)增產(chǎn)物間的相互干擾,，準(zhǔn)確度和可重復(fù)性較高。美國數(shù)字PCR儀器

廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司致力于精細(xì)化學(xué)品,，以科技創(chuàng)新實現(xiàn)高質(zhì)量管理的追求,。雙螺旋科學(xué)儀器作為精細(xì)化學(xué)品的企業(yè)之一，為客戶提供良好的數(shù)字PCR,，純水機(jī),，病理切片機(jī)，倍性分析儀,。雙螺旋科學(xué)儀器不斷開拓創(chuàng)新,，追求出色,，以技術(shù)為先導(dǎo)，以產(chǎn)品為平臺,，以應(yīng)用為重點(diǎn),，以服務(wù)為保證，不斷為客戶創(chuàng)造更高價值,，提供更優(yōu)服務(wù),。雙螺旋科學(xué)儀器創(chuàng)始人姜艷，始終關(guān)注客戶,，創(chuàng)新科技,，竭誠為客戶提供良好的服務(wù)。