熒光微球分析技術(shù)屬于化學(xué)材料發(fā)展結(jié)果,，可用于細胞表面抗原的檢測,、退行性神經(jīng)病變示蹤物,、吞噬功能的檢測,、血流分析,、敏感性診斷試劑等,，本文介紹了熒光微球分析技術(shù)以及熒光微球吞噬實驗的操作步驟,。 熒光微球分析 技術(shù)簡介 熒光微球分析技術(shù)是近年來化學(xué)材料科學(xué)活躍發(fā)展 的產(chǎn)物,，各種大小(0.2～10μm)可產(chǎn)生熒光和色彩的人工微球應(yīng)運而生,，目前各種材料人工合成,、多種顏色和規(guī)格的熒光微球有2大類，一種是表面不帶修飾基團的微球,，另一種是攜帶各種化學(xué)修飾基團,，包括羧基化修飾、氨基修飾,、巰基或醛巰基修飾等的微球,。 西安載藥微球

如何制作納米微球呢？ 離子交聯(lián)法是制作納米微球的基本方法之一，適用于以殼聚糖,、海藻酸鈉等 為材料的納米微球,。其主要原理是作為***載體的材料通過離子交聯(lián)法從乳 液中析出，同時通過氫鍵相互作用和疏水相互作用將***包埋在載體中,，從 而制備成載藥微球,。該方法制備條件溫和，整個過程不使用對人體有害的試 劑,，也成為載藥微球的理想制備方法之一,。 納米微球的典型制備方法還有“乳化-溶劑揮發(fā)法”和“微流控法”?！叭?化-溶劑揮發(fā)法”是將模型***先溶解于有機溶劑中,然后滴加到含有表面活 性劑的水相中,在均質(zhì)機的高速剪切下形成油相/水相型乳液,再通過常壓或減 壓方式除去乳液分散相中的揮發(fā)性有機溶劑,使納米粒硬化,***通過冷凍干 燥從水性混懸液中收集納米粒,。“微流控法”是一種在微米尺度的通道中操 控兩種或幾種互不相溶的微小體積液體,連續(xù),、可控地生產(chǎn)具有高度單分散尺 寸的單乳液滴和多重乳液液滴的技術(shù),。 青島載藥微球哪家強

目前，制備微球的常用方法主要有乳化分散法,、凝聚法及聚合法三種,。根據(jù)所需微球的粒度與釋能及臨床給藥途徑不同，可選用不同的制備方法 ,。 1.乳化分散法 乳化分散法系指與載體材料溶液混合后,，將其分散在不相溶的介質(zhì)中形成類似油包水（W/0）或水包油（0/W）型乳劑，然后使乳劑內(nèi)相固化,、分離制備微球的方法,。 （1）加熱固化法 加熱固化法系指利用蛋白質(zhì)受熱凝固的性質(zhì)，在100～180℃的條件下加熱使乳劑的內(nèi)向固化,、分離制備微球的方法,。常用的載體材料為血清白蛋白，必須是水溶性的,。常與25%白蛋白水溶液混合．加到含適量乳化劑的油相(如棉籽油)中,，制成油包水的初乳，另取適量油加熱至100-180℃．控制攪拌速度將初乳加入熱油中,，約維持20分鐘,，使白蛋白乳滴固化成球，用適宜溶劑洗滌除去附著的油,，過濾,、干燥即得。

2.凝聚法 凝聚法是指與載體材料的混合液中,，通過外界物理化學(xué)因素的影響,，如用帶相反電荷、脫水、溶劑置換等措施使載體材料溶解度發(fā)生改變,，凝聚載體材料包裹而自溶液中析出,。凝聚法制備微球常用載休材料有明膠、阿拉伯膠等,。 3.聚合法 聚合法是以載體材料單體通過聚合反應(yīng),，在聚合過程中將包裹．形成微球。此種方法制備微球具有粒徑小,、易于控制等優(yōu)點。 （1）乳化/增溶聚合法 乳化/增溶聚合法系將聚合物的單體用乳化或增溶的方法高度分散,，然后在引發(fā)劑作用下,，使單體聚合，同時將包裹制成微球的方法,。該法要求載體材料具有良好的乳化性和增溶性,、且聚合反應(yīng)易于進行。 （2）鹽析固化法 鹽析固化法又稱交聯(lián)聚合法,，向含有的高分子單體溶液中加入適量的鹽類沉淀劑如鈉使溶液渾濁而不產(chǎn)生沉淀,，制得的顆粒粒徑約為1～5μm，然后再加人交聯(lián)劑固化,，可得到穩(wěn)定的微球,。

如何精確控制和大規(guī)模化生產(chǎn)裸眼看不到的納米微球并賦予這些材料的功能,， 以滿足現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)的需求是當今納米材料科學(xué)家**重要的研究方向,。納米微球 的關(guān)鍵技術(shù)問題和研究方向如下： 1） 納米微球粒徑大小徑及粒徑分布精確控制關(guān)鍵技術(shù): 納米微球的應(yīng)用非常***,不同的應(yīng)用需要不同性能的微球,很多**應(yīng)用都 對微球的粒徑大小和均一性都有極高的要求，如液晶間隔物微球和導(dǎo)電金 球都要求能精確控制粒徑大?。ㄆ骄骄瓤刂圃?0納米以下）,，粒徑分 布滿足變異系數(shù)小于3%,. 因此不同材料組成的納米微球的精確粒徑大小和分 布本領(lǐng)域首要解決的關(guān)鍵技術(shù)問題 2） 納米微球的孔徑大小,孔徑分布和比表面精確調(diào)控關(guān)鍵技術(shù): 在很多應(yīng)用領(lǐng)域，不僅要嚴格控制微球材料,、粒徑大小,、分布和機械強度， 還要調(diào)控微球的比表面積,、孔道結(jié)構(gòu)等,如用于生物分離和分析的微球介質(zhì)和 色譜填料,，微球粒徑大小、均一性,、納米孔道結(jié)構(gòu)都會影響生物分子分離和 分析效果,，因此如何調(diào)控微球孔道結(jié)構(gòu)，比表面積也是關(guān)鍵技術(shù)之一,。北京載藥微球

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理想微球的微觀形態(tài)應(yīng)為圓整球型或橢圓形實體,，形態(tài)飽滿，顆粒的大小應(yīng)盡可能均勻，微球之間無粘連,。通常粒徑在1～250μm的稱微球,，而粒徑在0．1～1μm的稱亞微球，粒徑在10～100nm的稱納米球,。微觀形態(tài)的觀察可使用掃描電鏡(SEM),、透射電鏡(TEM)，以及原子力學(xué)顯微鏡(AFM),。SEM是目前觀察微球形態(tài)使用**廣的方法,，被用于表面及切面形態(tài)的觀察。TEM分辨率高,，適用于亞微球,、納米球粒徑測定。AFM優(yōu)點之一是分辨率高,，與SEM相比,，不需要對樣品進行金屬噴鍍，避免了噴鍍后對樣品的表面形態(tài)造成的破壞,，并且AFM允許在液態(tài)環(huán)境下觀測樣品,，而SEM則不行。但是AFM缺點是觀察范圍窄,，得到數(shù)據(jù)不具有統(tǒng)計性,，適合單個粒子表面形態(tài)的觀察西安載藥微球

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