微生物發(fā)酵培養(yǎng)基配制注意事項(xiàng)：①養(yǎng)分濃度和配比合適：微生物只有在培養(yǎng)基中養(yǎng)分濃度合適的情況下才能生長(zhǎng)良好是合適的,。當(dāng)養(yǎng)分濃度過(guò)低時(shí)，不能滿足微生物正常生長(zhǎng)的需要,。②微生物培養(yǎng)基pH條件控制：培養(yǎng)基的pH必須控制在一定范圍內(nèi),，以滿足不同種類微生物的生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝物。各種微生物生長(zhǎng)繁殖或代謝產(chǎn)物產(chǎn)生的較佳pH條件不同,。通常細(xì)菌和放線菌適合在7~7.5pH范圍內(nèi)生長(zhǎng),，酵母菌和霉菌一般在4.5~6pH范圍內(nèi)生長(zhǎng)。③微生物培養(yǎng)基原料來(lái)源選擇：培養(yǎng)基配制時(shí),，應(yīng)盡可能使用低廉易得的原料作為培養(yǎng)基成分,。尤其在發(fā)酵行業(yè)，培養(yǎng)基用量大,，使用成本較低原料實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品附加價(jià)值,。例如在微生物單細(xì)胞蛋白的工業(yè)化生產(chǎn)過(guò)程中,，制糖業(yè)含蔗糖廢液、乳業(yè)含乳糖廢液,、大豆廢液工業(yè)和黑色廢物,、造紙工業(yè)中含有戊糖和己糖的亞硫酸鹽紙漿等經(jīng)常被作為培養(yǎng)基原料使用。④成品培養(yǎng)基滅菌處理,、為了獲得微生物的純培養(yǎng)物,，必須避免被細(xì)菌污染，所以對(duì)使用的設(shè)備和工作場(chǎng)所進(jìn)行消毒和消毒,。對(duì)于微生物培養(yǎng)基要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理,。液體培養(yǎng)基，80%～90%是水,，其中配有可溶性的或不溶性的營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基,。培養(yǎng)基制備儀定制

培養(yǎng)基的分裝：大批量配制時(shí)使用的自動(dòng)分配器須經(jīng)校準(zhǔn)和確認(rèn)。每次使用前后,，均要對(duì)分配器的管道系統(tǒng)進(jìn)行沖洗,，在分裝無(wú)菌培養(yǎng)基前，則要采用無(wú)菌硅膠管,。固體培養(yǎng)基一般分裝在250ml,、500ml錐形瓶中，高壓滅菌后根據(jù)需要分裝平皿或試管,。平皿：傾注平皿,，應(yīng)在無(wú)菌室中放置3—4h，如用塑料平皿須在35℃培養(yǎng)箱中倒置30—60min,。讓水蒸汽自然蒸發(fā),。斜面：制備低層斜面分裝于試管，約占容積1/5,，滅菌后趁熱斜放在細(xì)玻璃棒和木桿上,，使成斜度，分裝使注意管口和瓶塞上勿沾有培養(yǎng)基,，如沾有培養(yǎng)基應(yīng)用布抹去,，以避免污染。黑龍江培養(yǎng)基制備儀安裝調(diào)試液體培養(yǎng)基,，固體培養(yǎng)基的對(duì)應(yīng)詞,，是微生物或動(dòng)植物細(xì)胞的液狀培養(yǎng)基。

培養(yǎng)基的滅菌：一般培養(yǎng)基可采用121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法,。在各種培養(yǎng)基制備方法中,，如無(wú)特殊規(guī)定，即可用此法滅菌。某些熱敏成分,，如糖類,，應(yīng)另行配成20%或更高的濃液，以過(guò)濾或間歇滅菌法消毒,，以后再用無(wú)菌操作技術(shù),、定量加于培養(yǎng)基。明膠培養(yǎng)基亦應(yīng)用較低溫度滅菌,。血液,、體液和等則應(yīng)以無(wú)菌操作技術(shù)抽取和加入于經(jīng)冷卻約50°C左右的培養(yǎng)基中。瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后立即取出,，冷至55℃-60℃時(shí),，擺置成適當(dāng)斜面，待其自然凝固,。

培養(yǎng)基制備的九個(gè)步驟關(guān)注要點(diǎn)：步驟一：稱取數(shù)量：用1/100的電子天平稱出培養(yǎng)基所需的藥物,。首先參照配方計(jì)算出配制相應(yīng)培養(yǎng)基需要各成分的數(shù)量，然后用電子天平準(zhǔn)確稱取重量,。步驟二：培養(yǎng)基溶化：將培養(yǎng)基納入燒杯容器中,，加小適量的水，緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌,。倘若培養(yǎng)基中不含瓊脂,，則不需要對(duì)培養(yǎng)基加熱；相反含有瓊脂,，就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸,。步驟三：調(diào)培養(yǎng)基pH：雖然培養(yǎng)基中含有緩沖物質(zhì)，可以盡量使培養(yǎng)基的pH值保持在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi),，但如果配制的培養(yǎng)基不能要求,，則必須進(jìn)行必要的調(diào)整。如果您有校準(zhǔn)過(guò)的pH計(jì),，則可以使用pH計(jì),。步驟四：培養(yǎng)基過(guò)濾：如果對(duì)配制的培養(yǎng)基沒(méi)有特殊要求，這一步可以省略,。步驟五：培養(yǎng)基分裝：準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基根據(jù)用途不同分為燒瓶,、試管等容器，分裝試管量大采用自動(dòng)分液器,，分裝試管量小,，可以用漏斗分液。確定這批培養(yǎng)基的較終pH值,。步驟六：培養(yǎng)基滅菌處理：分裝完成的培養(yǎng)基應(yīng)馬上滅菌。培養(yǎng)基一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì),、無(wú)機(jī)鹽（包括微量元素）以及維生素和水等,。

培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括水、無(wú)機(jī)鹽,、碳源,、氮源（生長(zhǎng)因子）等。（1）碳源：能為微生物的代謝提供碳元素的物質(zhì),。如CO2,、NaHCO3等無(wú)機(jī)碳源；糖類,、石油,、花生粉餅等有機(jī)碳源。異養(yǎng)微生物只能利用有機(jī)碳源,。單質(zhì)碳不能作為碳源,。（2）氮源：能為微生物的代謝提供氮元素的物質(zhì)。如N2,、NH3,、NO3-、NH4+（無(wú)機(jī)氮源）蛋白質(zhì),、氨基酸,、尿素、牛肉膏,、蛋白胨（有機(jī)氮源）等,。只有固氮微生物才能利用N2。培養(yǎng)基還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)PH,、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求,。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素,，培養(yǎng)霉菌時(shí)須將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性,，培養(yǎng)細(xì)菌是需要將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧型微生物是則需要提供無(wú)氧的條件,。異養(yǎng)微生物的合成能力較弱,，不能以CO2作為碳源或主要碳源，故應(yīng)在培養(yǎng)基中至少添加一種有機(jī)物,。廣東實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備儀

控制培養(yǎng)基的條件,，控制培養(yǎng)基的pH配制培養(yǎng)基必須根據(jù)微生物的特點(diǎn)調(diào)節(jié)pH。培養(yǎng)基制備儀定制

培養(yǎng)基的稱量和溶解：小心稱量所需量的脫水合成培養(yǎng)基（必要時(shí)佩戴口罩或在通風(fēng)柜中操作,，以防吸入含有有毒物質(zhì)的培養(yǎng)基粉末）,，先加入適量的水,，充分混合（注意避免培養(yǎng)基結(jié)塊），然后加水至所需的量后適當(dāng)加熱,，并重復(fù)或連續(xù)攪拌使其快速分散,，必要時(shí)應(yīng)完全溶解。含瓊脂的培養(yǎng)基在加熱前應(yīng)浸泡幾分鐘,。注意：培養(yǎng)基的加熱溶解或高溫滅菌盛放使用的容器不得為銅鍋或鐵鍋,，以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中，使細(xì)菌不易生長(zhǎng),。較好使用不銹鋼鍋加熱溶化,，可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí),、可先用溫水加熱并隨時(shí)攪動(dòng),、以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象,、該培養(yǎng)基即不能使用,，應(yīng)重新制備。培養(yǎng)基制備儀定制

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