平板的制備和儲存:傾注融化的培養(yǎng)基到平皿中,,使之在平皿中形成厚度至少為3mm(直徑90mm的平皿,,通常要加入18mL?20mL瓊脂培養(yǎng)基)。將平皿蓋好皿蓋后放到水平平面使瓊脂冷卻凝固。如果平板需儲存,,或者培養(yǎng)時間超過48h或培養(yǎng)溫度高于40℃,則需要傾注更多的培養(yǎng)基,。凝固后的培養(yǎng)基應立即使用或存放于暗處和(或)5±3℃冰箱的密封袋中,,以防止培養(yǎng)基成分的改變。在平板底部或側(cè)邊做好標記,,標記的內(nèi)容包括名稱,、制備日期和(或)有效期。也可使用適宜的培養(yǎng)基編碼系統(tǒng)進行標記,。將倒好的平板放在密封的袋子中冷藏保存可延長儲存期限,。為了避免冷凝水的產(chǎn)生,平板應冷卻后再裝入袋中,。儲存前不要對培養(yǎng)基表面進行干燥處理,。對于采用表面接種形式培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基,,應先對瓊脂表面進行干燥:揭開平皿蓋,將平板倒扣于烘箱或培養(yǎng)箱中(溫度設為25~50℃),;或放在有對流的無菌凈化臺中,,直到培養(yǎng)基表面的水滴消失為止。注意不要過度干燥,。商品化的平板瓊脂培養(yǎng)基應按照廠商提供的說明使用,。脫水培養(yǎng)基,又稱預制干燥培養(yǎng)基,,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基,。安徽自動培養(yǎng)基制備器
微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點:培養(yǎng)基擺斜面,滅菌完成后,,將試管中的中海瓊脂培養(yǎng)基放在木棒或玻璃棒上,,同時它很熱,并且有適當?shù)钠露?。冷卻后使瓊脂凝固并變成斜面,。斜面長度不超過試管的二分之一。微生物培養(yǎng)基質(zhì)檢,,檢驗培養(yǎng)基滅菌后,,發(fā)現(xiàn)有破損,浸水,,顏色異常,,棉塞被培養(yǎng)基污染。所有這些都必須丟棄,,不能重復使用,,并確定其很終pH值。無菌檢查和效果檢查也是必需的,。無菌檢查是取1~2瓶無菌培養(yǎng)基,,37℃孵育一兩天,確認無細菌生長,;效果檢查是將標準菌株接種到相關培養(yǎng)基上進行細菌檢查,。動物的生長、形態(tài)和生化條件與已知條件一致,。兩個條件都合格,,準備好的培養(yǎng)基就可以使用了。安徽自動培養(yǎng)基制備器配制培養(yǎng)基的原則:根據(jù)培養(yǎng)目的需要選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì),。
培養(yǎng)基滅菌方法有哪五種類型:1,、輻射滅菌原理方法:輻射滅菌原理:是用高能電磁輻射和細菌核酸的光化學反應引起細菌死亡。常用的是紫外線,X射線和伽馬射線,。主要用于室內(nèi)空氣和器皿的表面消毒,。2、干熱滅菌原理方法:干熱滅菌原理:是采用高溫氧化微生物,,使蛋白質(zhì)變性并濃縮電解質(zhì)以殺死微生物,。3、化藥滅菌原理方法,,化藥滅菌原理:使用化藥與微生物細胞中的成分發(fā)生反應,,從而使蛋白質(zhì)變性酶失活。4,、過濾滅菌原理方法:過濾滅菌原理:是使用不能滲透的微生物濾膜進行滅菌,。使用方法是使用0.01-0.45毫米的細孔濾膜對壓縮空氣,酶溶液和其他對熱不穩(wěn)定的復合溶液進行滅菌,。5,、濕熱滅菌原理方法:在工業(yè)生產(chǎn)中,用于滅菌對于培養(yǎng)基,,管道和設備,通常將蒸汽加熱到一定溫度并保持一段時間,,這稱為濕熱滅菌,。濕熱滅菌原理:是直接用蒸汽進行滅菌。蒸汽冷凝后會釋放出大量潛熱,。蒸汽具有強大的穿透力,,破壞細菌蛋白質(zhì)和核酸的化學鍵,使酶失活并殺死由于代謝紊亂引起的微生物,。
分接觸和利用培養(yǎng)基中的養(yǎng)料,,適于作生理等研究,由于發(fā)酵率高,,操作,、方便,也常用于發(fā)酵工業(yè),。(3)半固體培養(yǎng)基,。是在液體培養(yǎng)基中加入少量凝固劑而呈半固體狀態(tài)。固體培養(yǎng)基的制作步驟:1,、首先我們要準備好一個裝有1000ml的燒杯,,然后在準備好的杯中在放入500ml的蒸餾水,在將牛肉膏和蛋白胨,、氯化鈉這些都溶解在水中,。2、其次我們在調(diào)節(jié)PH值,調(diào)節(jié)時需要百分之10的氫氧化鈉溶液,,將PH值調(diào)到7.2,,在此也要定容到1000ml,較后在將這些液體都分別放入10個錐形瓶內(nèi),,每一瓶都裝100ml,。對一些需嚴格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長時間的貯存,,必須放在3~6℃的冰箱內(nèi),。
培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項:1、培養(yǎng)基各成份的混合和溶化培養(yǎng)基所用化學藥品均應是化學純的,。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細菌不易生長,。好好使用不銹鋼鍋加熱溶化,,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時,、可先用溫水加熱并隨時擾動,、以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象,、該培養(yǎng)基即不能使用,,應重新制備。待大部分固體成分溶化后,,再用較小火力使所有成分完全溶化,,迄至煮沸2、培養(yǎng)基pH的初步調(diào)正因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中,、pH會有所變化,,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應進行PH的初步調(diào)正,。例如,,牛肉浸液約可降低pH0.2,而腸浸液pH卻會有明顯的升高,。因此,,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經(jīng)驗,、以期能掌握培養(yǎng)基的好終PH,,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。PH調(diào)整后,,還應將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。3、培養(yǎng)基的過濾澄清液體培養(yǎng)基必須較全澄清,,瓊脂培養(yǎng)基也應透明無明顯沉淀,,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求,。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,,濾紙應折疊成折扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂,。培養(yǎng)基制備器真彩色液晶屏顯示,,觸摸屏加按鍵操作。安徽自動培養(yǎng)基制備器
固體培養(yǎng)基根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基,、非可逆性固化培養(yǎng)基,、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜,。安徽自動培養(yǎng)基制備器
血清培養(yǎng)基主要問題:血清的成份可能有幾百種之多,,對其準確的成份、含量及其作用機制不清楚,,尤其是對其中一些多肽類生長因子,、和脂類等尚未充分認識,這給研究工作帶來許多困難,。血清都是批量生產(chǎn),,各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,,從而使實驗的標準化和連續(xù)性受到限制,。對大多數(shù)細胞,在體內(nèi)狀態(tài),,血清不是它們接觸的生理學液體,,只是在損傷愈合以及血液凝固過程中才接觸血清,因此使用血清有可能改變某種細胞在體內(nèi)的正常狀態(tài),,血清可能促進某些細胞的生長(成纖維細胞)同時抑制另一類細胞生長(表皮細胞),。安徽自動培養(yǎng)基制備器
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