培養(yǎng)基(Medium)是供微生物,、植物和動(dòng)物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料,,一般都含有碳水化合物,、含氮物質(zhì),、無機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等,有點(diǎn)還添加克菌素,、色素,、和血清。為方便長期保管,,培養(yǎng)基的成分均制成粉末狀,。使用時(shí)再配制成可用的培養(yǎng)基,整個(gè)制備過程培養(yǎng)基需要嚴(yán)格的滅菌,。目前對培養(yǎng)基滅菌通常使用高壓蒸汽法,,因?yàn)檎羝哂泻軓?qiáng)的穿透能力,能夠殺死各種微生物,,微生物受熱死亡的原因,,主要是因高溫使微生物體內(nèi)的一些重要蛋白質(zhì),如酶等,,發(fā)生凝固,、變性,從而導(dǎo)致微生物無法生存而死,。滅菌中加熱溫度和受熱時(shí)間與滅菌程度和營養(yǎng)成分的破壞都有關(guān)系,。培養(yǎng)基制備器小倒管浸滿培養(yǎng)基(不留氣泡)后再加入到盛LST的試管中。內(nèi)蒙古自動(dòng)培養(yǎng)基制備器
簡單制作培養(yǎng)基,,需要完成以下幾個(gè)主要步驟:需要對其進(jìn)行消毒處理,,普通介質(zhì)使用121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘。本發(fā)明適用于各種介質(zhì)的制備,,如無特殊要求,,可用于滅菌,。一些熱成分,如碳水化合物,,應(yīng)該單獨(dú)制備20%或更多的濃縮液,,過濾或間斷殺菌,然后通過無菌操作技術(shù)加入到培養(yǎng)液中,。在低溫下,,明膠培養(yǎng)基也能殺菌。血,、體液及素應(yīng)經(jīng)無菌處理后,,加至約50℃冷卻培養(yǎng)基中。需要對培養(yǎng)基的質(zhì)量進(jìn)行檢測,。每次處理完培養(yǎng)基,,都要仔細(xì)檢查,如破損,、浸漬、顏色異常,、棉塞污染等,,要進(jìn)行篩選和棄置,才能確定pH值,。培養(yǎng)基培養(yǎng)一晚,,若有細(xì)菌生長,培養(yǎng)基將被丟棄,。常規(guī)菌株接種1×2管或瓶培養(yǎng)基,,24h培養(yǎng),對生長不良或無菌的菌株進(jìn)行培養(yǎng),,追蹤其產(chǎn)生原因,,并反復(fù)接種。如不發(fā)生變化,,應(yīng)丟棄培養(yǎng)基,,禁止使用。內(nèi)蒙古自動(dòng)培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基根據(jù)使用范圍可分為細(xì)菌培養(yǎng)基,、放線菌培養(yǎng)基,、酵母菌培養(yǎng)基、培養(yǎng)基等,。
培養(yǎng)基配制方法:正確制備培養(yǎng)基是微生物檢驗(yàn)的較基礎(chǔ)步驟之一,,使用脫水培養(yǎng)基和其他成分,尤其是含有有毒物質(zhì)(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時(shí),,應(yīng)遵守良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說明,。培養(yǎng)基的不正確制備會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問題,。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照廠商提供的使用說明配制,。如重量(體積),、pH、制備日期,、滅菌條件和操作步驟等,。實(shí)驗(yàn)室使用各種基礎(chǔ)成分制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)按照配方準(zhǔn)確配制,,并記錄相關(guān)信息,,如:培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級別、每個(gè)成分物質(zhì)含量,、制造商,、批號、pH,、培養(yǎng)基體積(分裝體積),、無菌措施(包括實(shí)施的方式、溫度及時(shí)間),、配置日期,、人員等,以便溯源,。
培養(yǎng)基質(zhì)量測試:(1)澄清度:水是細(xì)胞培養(yǎng)基的溶劑,。細(xì)胞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分只有完全溶解于水才能被細(xì)胞吸收攝取,細(xì)胞才能生長增殖,,因此細(xì)胞培養(yǎng)基是否溶解以及培養(yǎng)液是否透明澄清直接影響培養(yǎng)基使用,。該項(xiàng)目是通過對水溶解后的細(xì)胞培養(yǎng)基的澄清度檢查,判斷細(xì)胞培養(yǎng)基的澄清度,。按中國藥典2005年版二部附錄ⅨB進(jìn)行,。(2)pH值:哺乳類動(dòng)物細(xì)胞生長需要合適的酸堿度,pH過高或者過低都會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡,。pH值的測定也可以檢查細(xì)胞培養(yǎng)基的批間差,。清大天一標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定取規(guī)定量供試品,用注射用水(水溫20℃-30℃)溶解至1L,,加入規(guī)定量碳酸氫鈉到上述溶液中,,用與細(xì)胞培養(yǎng)基溶液pH值相近的兩點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)緩沖液校準(zhǔn)后的酸度計(jì)進(jìn)行測定。按中國藥典2005年版二部附錄ⅥH進(jìn)行,;加入規(guī)定量的碳酸氫鈉到上述溶液中,,按中國藥典2005年版二部附錄ⅥH進(jìn)行。培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備:正確制備培養(yǎng)基時(shí)微生物檢驗(yàn)的較基礎(chǔ)步驟之一,。
培養(yǎng)基的類別按照培養(yǎng)基的成分來分:培養(yǎng)基按其所含成分,,可分為合成培養(yǎng)基,、天然培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基三類。(1)合成培養(yǎng)基,。合成培養(yǎng)基的各種成分完全是己知的各種化學(xué)物質(zhì),。這種培養(yǎng)基的化學(xué)成分清楚,組成成分精確,,重復(fù)性強(qiáng),,但價(jià)格較貴,而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長較慢,。如高氏一號合成培養(yǎng)基,、察氏培養(yǎng)基等。(2)天然培養(yǎng)基,。由天然物質(zhì)制成,,如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯,前者用于培養(yǎng)霉菌,,后者用于培養(yǎng)細(xì)菌,。這類培養(yǎng)基的化學(xué)成分很不恒定,也難以確定,,但配制方便,,營養(yǎng)豐富,所以常被采用,。(3)半合成培養(yǎng)基。在天然有機(jī)物的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入已知成分的無機(jī)鹽類,,或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分,,如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要,。要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì),,配制針對性強(qiáng)的培養(yǎng)基。內(nèi)蒙古自動(dòng)培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備器真彩色液晶屏顯示,,觸摸屏加按鍵操作,。內(nèi)蒙古自動(dòng)培養(yǎng)基制備器
孢子培養(yǎng)基:孢子培養(yǎng)基是供菌種繁殖孢子的一種常用固體培養(yǎng)基,對這種培養(yǎng)基的要求是能使菌體迅速生長,,產(chǎn)生較多較好的孢子,,并要求這種培養(yǎng)基不易引起菌種發(fā)生變異。所以對孢子培養(yǎng)基的基本配制要求是:靠前,,營養(yǎng)不要太豐富(特別是有機(jī)氮源),,否則不易產(chǎn)孢子。如灰色鏈霉在葡萄糖-硝酸鹽-其它鹽類的培養(yǎng)基上都能很好地生長和產(chǎn)孢子,,但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后,,就只長菌絲而不長孢子,。第二,所用無機(jī)鹽的濃度要適量,,不然也會(huì)影響孢子量和孢子顏色,。第三,要注意孢子培養(yǎng)基的pH和濕度,。生產(chǎn)上常用的孢子培養(yǎng)基有:麩皮培養(yǎng)基,、小米培養(yǎng)基、大米培養(yǎng)基,、玉米碎屑培養(yǎng)基和用葡萄糖,、蛋白胨、牛肉膏和食鹽等配制成的瓊脂斜面培養(yǎng)基,。大米和小米常用作霉菌孢子培養(yǎng)基,,因?yàn)樗鼈兒可伲杷?、表面積大,,所以是較好孢子培養(yǎng)基。大米培養(yǎng)基的水分需控制在21%-50%,,而曲房空氣濕度需控制在90%-靠前,。內(nèi)蒙古自動(dòng)培養(yǎng)基制備器
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