配制培養(yǎng)基的原則:調(diào)節(jié)氧化還原電位(Eh)各種微生物對(duì)培養(yǎng)基的Eh要求不同,。適宜好氧微生物生長的Eh值一般為+0.3~+0.4V,,厭氧微生物只能在+0.1V以下生長,因此,,培養(yǎng)好氧微生物必須保證氧的供應(yīng),,可在培養(yǎng)基中加入氧化劑提高Eh值。調(diào)節(jié)滲透壓多數(shù)微生物能耐受較大范圍滲透壓的變化,。培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度過大,,會(huì)使?jié)B透壓過高,使細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離而抑制微生物生長,。低滲溶液則使細(xì)胞吸水膨脹易破裂,,因此,配制培養(yǎng)基時(shí)要掌握營養(yǎng)物質(zhì)的濃度,。常在培養(yǎng)基中加人適量的Nacl以提高滲透壓,。原料來源的選擇力求節(jié)約:配制培養(yǎng)基還應(yīng)遵循力求節(jié)約的原則,盡量選用價(jià)格便宜,、來源方便的原料,。特別是在工業(yè)發(fā)酵中,培養(yǎng)基用量大,,更應(yīng)注意利用低成本的原料,,降低產(chǎn)品成本。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng):兩個(gè)存儲(chǔ)器;存儲(chǔ)器高度可選,。福建進(jìn)口培養(yǎng)基制備器
制備培養(yǎng)基有什么要求:1,、培養(yǎng)基需保持澄清,便于觀察細(xì)菌的生長情況,,培養(yǎng)基加熱煮沸后,,可用脫脂棉花或絨布過濾,以除去沉淀物,,必要時(shí)可用雞蛋白澄清處理,,所用瓊脂條要預(yù)先洗凈晾干后使用,避免因瓊脂含雜質(zhì)而影響透明度,。2,、盛裝培養(yǎng)基不宜用鐵、銅等容器,,使用洗凈的中性硬質(zhì)玻璃容器為好,。3、培養(yǎng)基的滅菌既要達(dá)到完全滅菌目的,,又要注意不因加熱而降低其營養(yǎng)價(jià)值,,121℃15min即可,,如為含有不耐高熱物質(zhì)的培養(yǎng)基如糖類、血清,、明膠等,,則應(yīng)采用低溫滅菌或間歇法滅菌,一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀,、卵黃,、TTC、克菌素等,,待基礎(chǔ)瓊脂高壓滅菌后涼至50℃左右再加入,。上海進(jìn)口培養(yǎng)基制備器固體培養(yǎng)基,一類配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì),。
培養(yǎng)基配置原則:選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì),,總體而言,所有微生物生長繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源,、氮源,、無機(jī)鹽、生長因子,、水及能源,,但由于微生物營養(yǎng)類型復(fù)雜,不同微生物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣的,,因此首先要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求配制針對(duì)性強(qiáng)的培養(yǎng)基,。自養(yǎng)型微生物能從簡單的無機(jī)物合成自身需要的糖類、脂類,、蛋白質(zhì)、核酸,、維生素等復(fù)雜的有機(jī)物,,因此培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全可以(或應(yīng)該)由簡單的無機(jī)物組成。在該培養(yǎng)基配制過程中并未專門加入其他碳源物質(zhì),,而是依靠空氣中和溶于水中的CO2為氧化硫硫桿菌提供碳源,。就微生物主要類型而言,有細(xì)菌,、放線菌,、酵母菌、霉菌,、原生動(dòng)物,、藻類及病毒之分,培養(yǎng)它們所需的培養(yǎng)基各不相同,。在實(shí)驗(yàn)室中常用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(或簡稱普通肉湯培養(yǎng)基)培養(yǎng)細(xì)菌,,用高氏I號(hào)合成培養(yǎng)基培養(yǎng)放線菌,,培養(yǎng)酵母菌一般用麥芽汁培養(yǎng)基,培養(yǎng)霉菌則一般用查氏合成培養(yǎng)基,。
培養(yǎng)基的滅菌:一般培養(yǎng)基可采用121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法,。在各種培養(yǎng)基制備方法中,如無特殊規(guī)定,,即可用此法滅菌,。某些畏熱成分,如糖類,,應(yīng)另行配成20%如或更高的濃液,,以過濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無菌操作技術(shù),、定量加于培養(yǎng)基,。明膠培養(yǎng)基亦應(yīng)用較低溫度滅菌。血液,、體液和物品等則應(yīng)從無菌操作技術(shù)抽取和加入于經(jīng)冷卻約50℃左右的培養(yǎng)基中,。瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后立即取出、待冷至55-60℃時(shí),,擺置成適當(dāng)斜面,、待其自然凝固。培養(yǎng)基在加熱消毒過程中,、pH會(huì)有所變化,,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進(jìn)行PH的初步調(diào)正,。
固體斜面培養(yǎng)基配制:培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的,。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,,使細(xì)菌不易生長,。較好使用不銹鋼萵加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化,。在鍋中溶化時(shí),、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng)、以防焦化,、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象,、該培養(yǎng)基即不能使用,應(yīng)重新制備,。待大部分固體成分溶化后,,再用較小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸,。如為瓊脂溶化,,用另一部分水溶化其它成分,,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,,因蒸發(fā)而丟失的水分,,較后必須加以補(bǔ)足。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)正:因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中,、pH會(huì)有所變化,,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進(jìn)行PH的初步調(diào)正,。培養(yǎng)基,,是指供給微生物、植物或動(dòng)物(或組織)生長繁殖的,,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì),。福建進(jìn)口培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備器功能強(qiáng)大的加熱器,能夠迅速加熱,。福建進(jìn)口培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的類型:1,、根據(jù)對(duì)培養(yǎng)基組成物質(zhì)的化學(xué)成分是否完全了解來區(qū)分,可以將培養(yǎng)基分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基,。(1)天然培養(yǎng)基:天然培養(yǎng)基是指利用各種動(dòng),、植物或微生物的原料,其成分難以確切知道。用作這種培養(yǎng)基的主要原料有:牛肉膏,、麥芽汁,、蛋白胨、酵母膏,、玉米粉,、麩皮、各種餅粉,、馬鈴薯,、牛奶、血清等,。用這些物質(zhì)配成的培養(yǎng)基雖然不能確切知道它的化學(xué)成分,但一般來講,營養(yǎng)是比較豐富的,微生物生長旺盛,而且來源多方面,配制方便,所以較為常用,尤其適合于配制實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的穩(wěn)定性常受生產(chǎn)廠或批號(hào)等因素的影響,。(2)合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基是一類化學(xué)成分和數(shù)量完全知道的培養(yǎng)基,它是用已知化學(xué)成分的化學(xué)藥品配制而成,。這類培養(yǎng)基化學(xué)成分精確、重復(fù)性強(qiáng),但價(jià)格昂貴,而微生物又生長緩慢,所以它只適用于做一些科學(xué)研究,例如營養(yǎng),、代謝的研究,。(3)半合成培養(yǎng)基。福建進(jìn)口培養(yǎng)基制備器
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