利用三角培養(yǎng)瓶制備培養(yǎng)基:包扎,,分裝好后,,塞上棉塞,,在用牛皮紙將棉塞包裹好,,防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。滅菌,,按配方上要求的溫度,、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,,營養(yǎng)成分會被破壞,,培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會使培養(yǎng)基的顏色變深,。擺斜面,,滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個(gè)斜面,,約占試管長度的1/2,。貯存,培養(yǎng)基在30℃下放置,,無污染的即可使用,。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。培養(yǎng)基是細(xì)胞生長的必需營養(yǎng)物質(zhì),,利用三角培養(yǎng)瓶制備培養(yǎng)基可按照以上步驟操作,,在使用前需確保培養(yǎng)基的無菌性,以免影響細(xì)胞正常繁殖,。培養(yǎng)基pH值的調(diào)正:pH因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中,、pH會有所變化。山西不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基配制后一般都有沉渣或混濁出現(xiàn)醫(yī)學(xué),,需過濾成清晰透明后方可使用,,常用的過濾方法如下:1.液體培養(yǎng)基:液體培養(yǎng)基必須清晰,以便觀察細(xì)菌的生長情況,,常用濾紙過濾,,亦可在加熱前加入用水稀釋的雞蛋白(1000ml培養(yǎng)基用1個(gè)雞蛋白)在100℃加熱后保持60~70℃,40~60分鐘,,使其不溶性物質(zhì)附于凝固的蛋白上而沉淀,,然后再用虹吸法吸出上清液或以濾紙過濾。2.固體培養(yǎng)基:如系瓊脂培養(yǎng)基,,于加熱融化后需趁熱以絨布或兩層紗布中夾脫脂棉過濾,;亦可用自然沉淀法,即將瓊脂培養(yǎng)基盛人鋁鍋或廣口搪瓷容器內(nèi),,以高壓(103.43kPa)蒸汽融化15分鐘后,,靜置高壓鍋內(nèi)過夜,次日將瓊脂傾出,,用刀將底部沉渣切去,,再融化即可收清晰的瓊脂培養(yǎng)基。觸摸屏培養(yǎng)基制備器哪個(gè)品牌好培養(yǎng)基配好后不宜久置,,很好現(xiàn)配現(xiàn)用,。
培養(yǎng)基在使用前通過高壓或過濾滅菌,。防止污染應(yīng)該注意以下事項(xiàng):確認(rèn)工作細(xì)胞庫是否被污染,確認(rèn)毒種工作種子批是否被污染,,確認(rèn)所用培養(yǎng)基及其添加成分(如小牛血清,、NaHCO3等)是否被污染,均可用細(xì)菌,、及支原體無菌試驗(yàn)來確認(rèn)并排除,。同時(shí)要對無菌試驗(yàn)培養(yǎng)基的靈敏度進(jìn)行驗(yàn)證。實(shí)際生產(chǎn)中,,可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),,48小時(shí)即可觀察有無污染。其它:高壓滅菌設(shè)備,、過濾除菌設(shè)備均應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證,,確保滅菌和除菌效果;前者應(yīng)在投產(chǎn)前及其后的每6個(gè)月進(jìn)行驗(yàn)證,后者應(yīng)在每次除菌前,、后進(jìn)行驗(yàn)證工作(至少應(yīng)在除菌后進(jìn)行一次),。另外,應(yīng)將有毒區(qū)與無毒區(qū)嚴(yán)格分開,,并有各自獨(dú)自的空氣凈化系統(tǒng)及孵室,,有毒區(qū)對無毒區(qū)應(yīng)保持相對負(fù)壓,防止病毒對培養(yǎng)細(xì)胞(尤其是細(xì)胞庫)的污染,。
配制培養(yǎng)基的原則:滅菌處理:為了避免雜菌污染,,獲得微生物純培養(yǎng)物,培養(yǎng)基必須及時(shí)嚴(yán)格滅菌,。通常采用高壓蒸汽滅菌,。一般培養(yǎng)基用0.IMPa(121℃)維持15~30min即可徹底滅菌。長時(shí)間的高溫滅菌會使某些不耐熱的物質(zhì)破壞,,如使糖類物質(zhì)形成氨基糖,、焦糖。因此,,含糖培養(yǎng)基常用0.05MPa(110℃)滅菌20~30min某些對糖類要求更高的培養(yǎng)基,,可先將糖過濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合,。長時(shí)間高溫滅菌也會使磷酸鹽,、碳酸鹽與鈣、鎂鐵等陽離子形成難溶性化合物而產(chǎn)生沉淀,。為了防止這類沉淀發(fā)生,,可將這些物質(zhì)分別滅菌,冷卻后再混合,;也可在培養(yǎng)基中加入少量整合劑(0.01%乙二胺四乙酸,,即EDTA)使金屬離子形成可溶性絡(luò)合物,,防止沉淀的產(chǎn)生。高壓蒸汽滅菌一般使培養(yǎng)基pH降低,,應(yīng)在配制培養(yǎng)基時(shí)加以調(diào)節(jié),。培養(yǎng)基制備器微生物細(xì)胞組成元素的調(diào)查或分析,是設(shè)計(jì)培養(yǎng)基時(shí)的重要參考依據(jù),。
實(shí)驗(yàn)室在制作培養(yǎng)基時(shí)候的經(jīng)驗(yàn)總結(jié):培養(yǎng)基分裝:培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,,分裝于試管,、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3,。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時(shí)較好能使用半自動(dòng)或電動(dòng)的定量分裝器,。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時(shí),,分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為恰當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌,。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌,,以為測定該批培養(yǎng)基較終pH之用,。培養(yǎng)基制備器對于采用表面接種形式培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基,應(yīng)先對瓊脂表面進(jìn)行干燥,。觸摸屏培養(yǎng)基制備器哪個(gè)品牌好
培養(yǎng)基制備器蓋子和分裝孔是采用溫度和壓力控制的,,不能隨意打開。山西不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器
制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基:(1)方法步驟:計(jì)算,、稱量,、溶化、滅菌,、倒平板,。(2)倒平板操作的步驟:①將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上,右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,,左手拔出棉塞,。②右手拿錐形瓶,將瓶口迅速通過火焰,。③用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約10~20mL)倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋,。④等待平板冷卻凝固,,大約需5~10min,。然后,將平板倒過來放置,,使培養(yǎng)皿蓋在下,、皿底在上。倒平板操作的討論1.培養(yǎng)基滅菌后,,需要冷卻到50℃左右時(shí),,才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度,?提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí),就可以進(jìn)行倒平板了,。山西不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器
賽鍶鈦氪(上海)貿(mào)易有限公司是一家從事滅菌器,,培養(yǎng)基制備器,培養(yǎng)基分裝機(jī),,滅菌柜研發(fā),、生產(chǎn)、銷售及售后的貿(mào)易型企業(yè),。公司坐落在上海市松江區(qū)沈磚公路6000弄1號206室,,成立于2016-04-06。公司通過創(chuàng)新型可持續(xù)發(fā)展為重心理念,,以客戶滿意為重要標(biāo)準(zhǔn),。在孜孜不倦的奮斗下,公司產(chǎn)品業(yè)務(wù)越來越廣,。目前主要經(jīng)營有滅菌器,,培養(yǎng)基制備器,培養(yǎng)基分裝機(jī),,滅菌柜等產(chǎn)品,,并多次以機(jī)械及行業(yè)設(shè)備行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、客戶需求定制多款多元化的產(chǎn)品,。賽鍶鈦氪(上海)貿(mào)易有限公司每年將部分收入投入到滅菌器,,培養(yǎng)基制備器,培養(yǎng)基分裝機(jī),,滅菌柜產(chǎn)品開發(fā)工作中,,也為公司的技術(shù)創(chuàng)新和人材培養(yǎng)起到了很好的推動(dòng)作用。公司在長期的生產(chǎn)運(yùn)營中形成了一套完善的科技激勵(lì)政策,,以激勵(lì)在技術(shù)研發(fā),、產(chǎn)品改進(jìn)等。滅菌器,培養(yǎng)基制備器,,培養(yǎng)基分裝機(jī),,滅菌柜產(chǎn)品滿足客戶多方面的使用要求,讓客戶買的放心,,用的稱心,,產(chǎn)品定位以經(jīng)濟(jì)實(shí)用為重心,公司真誠期待與您合作,,相信有了您的支持我們會以昂揚(yáng)的姿態(tài)不斷前進(jìn),、進(jìn)步。