血清培養(yǎng)基主要問(wèn)題:血清的成份可能有幾百種之多,,對(duì)其準(zhǔn)確的成份,、含量及其作用機(jī)制不清楚,,尤其是對(duì)其中一些多肽類生長(zhǎng)因子,、和脂類等尚未充分認(rèn)識(shí),,這給研究工作帶來(lái)許多困難,。血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大,,而且血清保存期至多一年,,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,,從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制,。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞,在體內(nèi)狀態(tài),,血清不是它們接觸的生理學(xué)液體,,只是在損傷愈合以及血液凝固過(guò)程中才接觸血清,因此使用血清有可能改變某種細(xì)胞在體內(nèi)的正常狀態(tài),,血清可能促進(jìn)某些細(xì)胞的生長(zhǎng)(成纖維細(xì)胞)同時(shí)抑制另一類細(xì)胞生長(zhǎng)(表皮細(xì)胞),。培養(yǎng)基的滅菌:一般培養(yǎng)基可采用121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。福建自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備器
Systec培養(yǎng)基準(zhǔn)備器可以快速的準(zhǔn)備好滅菌,,放入滅菌鍋,,“水套系統(tǒng)”里加入夾層水(滅菌鍋與滅菌鍋腔體之間的夾套水用于有效的熱傳導(dǎo)),加入培養(yǎng)基原料,,準(zhǔn)備啟動(dòng)滅菌程序,。培養(yǎng)基可以直接在Sampleprep內(nèi)懸浮溶解。強(qiáng)力磁力攪拌確保培養(yǎng)基在內(nèi)腔里混合的均勻性,并防止凝結(jié),。培養(yǎng)基可以在滅菌前用WATERBATH(水?。┠J筋A(yù)先溶解。同時(shí),,直觀的圖形化界面使沒(méi)有經(jīng)過(guò)專門培訓(xùn)的人員也能方便的操作,。用戶可以自定義設(shè)置多達(dá)50個(gè)滅菌程序,比如滅菌溫度,、時(shí)間,、分裝溫度等。它們可以被儲(chǔ)存起來(lái)并隨時(shí)調(diào)用,。寧夏不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn):不會(huì)產(chǎn)生氣泡,。
培養(yǎng)基的類型-根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)來(lái)區(qū)分,可以分為固體培養(yǎng)基,、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基,。1)液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的,其中的成分基本上溶于水,,沒(méi)有明顯的固形物,,液體培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分分布均勻,易于控制微生物的生長(zhǎng)代謝狀態(tài),。2)固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基,。常用作凝固劑的物質(zhì)有瓊脂、明膠,、硅膠等,,以瓊脂較為常用。固體培養(yǎng)基在實(shí)際中用得十分多方面,。在實(shí)驗(yàn)室中,,它被用作微生物的分離、鑒定,、檢驗(yàn)雜菌,、計(jì)數(shù)、保藏,、生物測(cè)定等,。3)半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中,就制成了半固體培養(yǎng)基,。以瓊脂為例,,它的用量在0.2~1%之間。這種培養(yǎng)基有時(shí)可用來(lái)觀察微生物的動(dòng)力,,有時(shí)用來(lái)保藏菌種,。
實(shí)驗(yàn)室在制作培養(yǎng)基時(shí)候的經(jīng)驗(yàn)總結(jié):1,、培養(yǎng)基pH值的調(diào)正:pH因培養(yǎng)基在加熱消毒過(guò)程中、pH會(huì)有所變化,,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,,應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正。例如,,牛肉浸液約可降低pH0.2,,而腸浸液pH卻會(huì)有明顯的升高。因此,,對(duì)這個(gè)步驟,,操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培養(yǎng)基的較終pH,,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量,。pH調(diào)整后,還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出,。2、培養(yǎng)基過(guò)濾澄清:液體培養(yǎng)基必須澄清,,瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無(wú)明顯沉淀,,因此,須要采用過(guò)濾或其它澄清方法以達(dá)到此項(xiàng)要求,。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過(guò)濾法,,濾紙應(yīng)折疊成折扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂,。培養(yǎng)基制備器系統(tǒng)自動(dòng)調(diào)整供給樣品劑量保證了重現(xiàn)性結(jié)果。
分接觸和利用培養(yǎng)基中的養(yǎng)料,,適于作生理等研究,,由于發(fā)酵率高,操作,、方便,,也常用于發(fā)酵工業(yè)。(3)半固體培養(yǎng)基,。是在液體培養(yǎng)基中加入少量凝固劑而呈半固體狀態(tài),。固體培養(yǎng)基的制作步驟:1、首先我們要準(zhǔn)備好一個(gè)裝有1000ml的燒杯,,然后在準(zhǔn)備好的杯中在放入500ml的蒸餾水,,在將牛肉膏和蛋白胨、氯化鈉這些都溶解在水中,。2,、其次我們?cè)谡{(diào)節(jié)PH值,調(diào)節(jié)時(shí)需要百分之10的氫氧化鈉溶液,將PH值調(diào)到7.2,,在此也要定容到1000ml,,較后在將這些液體都分別放入10個(gè)錐形瓶?jī)?nèi),每一瓶都裝100ml,。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。寧夏不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器
一般培養(yǎng)基用0.IMPa(121℃)維持15~30min即可徹底滅菌,。福建自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備器
對(duì)LST(月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí),,有時(shí)發(fā)酵管內(nèi)會(huì)有氣泡。為防止發(fā)酵管內(nèi)產(chǎn)生氣泡,,可以采取以下幾項(xiàng)措施:(1)小倒管浸滿培養(yǎng)基(不留氣泡)后再加入到盛LST的試管中,。(2)滅菌鍋關(guān)閉放氣閥前,將鍋內(nèi)氣體排干凈,。(3)試管塞不要塞得太緊(使用硅膠塞的時(shí)候),,勿使用橡皮塞。(4)不要過(guò)早打開(kāi)滅菌鍋,,要等滅菌鍋內(nèi)氣體和溫度都降到與室溫一致或相差不大時(shí)再打開(kāi)滅菌鍋,。如果以上情況都做到還有氣泡,可用水做培養(yǎng)基組的對(duì)照試驗(yàn),,若培養(yǎng)基組有氣泡,,而對(duì)照組沒(méi)有氣泡,可確定是培養(yǎng)基自身的原因,。福建自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備器