培養(yǎng)基配置原則：選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，總體而言,，所有微生物生長(zhǎng)繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源,、氮源、無機(jī)鹽,、生長(zhǎng)因子,、水及能源，但由于微生物營(yíng)養(yǎng)類型復(fù)雜，不同微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣的,，因此首先要根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需求配制針對(duì)性強(qiáng)的培養(yǎng)基,。自養(yǎng)型微生物能從簡(jiǎn)單的無機(jī)物合成自身需要的糖類、脂類,、蛋白質(zhì),、核酸、維生素等復(fù)雜的有機(jī)物,，因此培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全可以（或應(yīng)該）由簡(jiǎn)單的無機(jī)物組成,。在該培養(yǎng)基配制過程中并未專門加入其他碳源物質(zhì)，而是依靠空氣中和溶于水中的CO2為氧化硫硫桿菌提供碳源,。就微生物主要類型而言,，有細(xì)菌、放線菌,、酵母菌,、霉菌、原生動(dòng)物,、藻類及病毒之分,，培養(yǎng)它們所需的培養(yǎng)基各不相同。在實(shí)驗(yàn)室中常用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（或簡(jiǎn)稱普通肉湯培養(yǎng)基）培養(yǎng)細(xì)菌,，用高氏I號(hào)合成培養(yǎng)基培養(yǎng)放線菌,，培養(yǎng)酵母菌一般用麥芽汁培養(yǎng)基，培養(yǎng)霉菌則一般用查氏合成培養(yǎng)基,。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,，以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。上海瓊脂培養(yǎng)基制備器

制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基：培養(yǎng)基滅菌后,，如制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基,，須趁培養(yǎng)基未凝固時(shí)進(jìn)行。(1)制作斜面培養(yǎng)基,。在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上放1支長(zhǎng)0.5-1米左右的木條,厚度為1厘米左右,，將試管頭部枕在木條上，使管內(nèi)培養(yǎng)基自然傾斜,，凝固后即成斜面培養(yǎng)基,。(2)制作平板培養(yǎng)基。將剛剛滅過菌的盛有培養(yǎng)基的錐形瓶和培養(yǎng)皿放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,，點(diǎn)燃酒精燈,，右手托起錐形瓶瓶底，左手拔下棉塞,，將瓶口在酒精燈上稍加灼燒,，左手打開培養(yǎng)皿蓋,，右手迅速將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，每皿約倒入10毫升,，以鋪滿皿底為度,。鋪放培養(yǎng)基后放置15分鐘左右，待培養(yǎng)基凝固后,，再5個(gè)培養(yǎng)皿一疊,，倒置過來，平放在恒溫箱里,，24小時(shí)后檢查,，如培養(yǎng)基末長(zhǎng)雜菌，即可用來培養(yǎng)微生物,。上海瓊脂培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基一般都含有碳水化合物,、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽（包括微量元素）以及維生素和水等,。

培養(yǎng)基配制方法：正確制備培養(yǎng)基是微生物檢驗(yàn)的較基礎(chǔ)步驟之一,，使用脫水培養(yǎng)基和其他成分，尤其是含有有毒物質(zhì)（如膽鹽或其他選擇劑）的成分時(shí),，應(yīng)遵守良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說明,。培養(yǎng)基的不正確制備會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時(shí),，應(yīng)嚴(yán)格按照廠商提供的使用說明配制,。如重量（體積）、pH,、制備日期,、滅菌條件和操作步驟等。實(shí)驗(yàn)室使用各種基礎(chǔ)成分制備培養(yǎng)基時(shí),，應(yīng)按照配方準(zhǔn)確配制,，并記錄相關(guān)信息，如：培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級(jí)別,、每個(gè)成分物質(zhì)含量,、制造商、批號(hào),、pH,、培養(yǎng)基體積（分裝體積）,、無菌措施（包括實(shí)施的方式,、溫度及時(shí)間）、配置日期,、人員等,，以便溯源,。

Systec培養(yǎng)基準(zhǔn)備器的工作模式：它擁有2個(gè)主要工作模式與2個(gè)附加模式可供選擇，參數(shù)可自己設(shè)置,。1.標(biāo)準(zhǔn)模式：制備標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基,、或高敏感性培養(yǎng)基。滅菌溫度/時(shí)間及分裝時(shí)間均可設(shè)置,。2.巧克力瓊脂模式：一種特殊的2步制備程序,，可制備復(fù)雜培養(yǎng)基。在一次滅菌后可通過補(bǔ)料口添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),，如血液等,，然后進(jìn)行二次升溫。3.水浴模式：正式滅菌前在30–80°C下,，對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行溶解處理,。在滅菌鍋中可以放置玻璃器皿，并對(duì)玻璃器皿中的液體進(jìn)行水浴加熱,。4.滅菌模式：?jiǎn)⒂脺缇Ｊ胶?，可以?dāng)作普通的臺(tái)式滅菌器，用來對(duì)少量試管,、燒瓶等玻璃器皿滅菌,。培養(yǎng)基制備器系統(tǒng)自動(dòng)調(diào)整供給樣品劑量保證了重現(xiàn)性結(jié)果。

常用培養(yǎng)基的制備及注意事項(xiàng)一,、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私馀囵B(yǎng)基的配制原理,；掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟；了解常見滅菌,、清毒基本原理及方法,；掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過濾除菌的操作方法,。二,、實(shí)驗(yàn)原理培養(yǎng)基是人工按一定比例配制的供微生物生長(zhǎng)繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基的原材料可分為碳源,、氮源,、無機(jī)鹽、生長(zhǎng)因素和水,。根據(jù)微生物的種類和實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌?，培養(yǎng)基也有不同的種類和配制方法。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用較普遍和較普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基,，有時(shí)又稱為普通培養(yǎng)基,。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖所需要的較基本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，所以可供微生物生長(zhǎng)繁殖之用,。干熱天菌,、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過升溫使蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺死微生物的效果,。培養(yǎng)基制備器解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,，使溫度及成分均一,，減少沉淀的發(fā)生。上海瓊脂培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基制備器滅菌鍋關(guān)閉放氣閥前,，將鍋內(nèi)氣體排干凈,。上海瓊脂培養(yǎng)基制備器

在制備培養(yǎng)基時(shí)，通常要考慮以下因素：(1)pH值多數(shù)細(xì)胞系在pH=7.4下生長(zhǎng)得很好,。盡管各細(xì)胞株之間細(xì)胞生長(zhǎng)*pH值變化很小,，但一些正常的成纖維細(xì)胞系以pH=7.4～7.7，轉(zhuǎn)化細(xì)胞以pH=7.0～7.4更合適,。據(jù)報(bào)道,，上皮細(xì)胞以pH=5.5合適。為確定*佳pH值,，做一個(gè)簡(jiǎn)單的生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)或特殊功能分析酚紅常用作指示劑,，pH=7.4呈紅色，pH=7.0變橙色,，pH=6.5變黃色,，而pH=7.6呈紅色中略帶藍(lán)色，pH=7.8呈紫色,。由于對(duì)顏色的觀察有很大的主觀性,，因而必須用無菌平衡鹽溶液和同樣濃度的酚紅配一套標(biāo)準(zhǔn)樣，放在與制備培養(yǎng)基相同的瓶子中,。(2)緩沖能力碳算鹽緩沖系統(tǒng)由于毒性小,、成本低、對(duì)培養(yǎng)物有營(yíng)養(yǎng)作用,，因此比其他緩沖系統(tǒng)用得多,。在pH值條件下的緩沖能力差。(3)滲透壓多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞對(duì)滲透壓有很寬的耐受范圍,，一般常用冰點(diǎn)降低或蒸汽壓升高測(cè)定,。如果自己配培養(yǎng)基，可通過測(cè)定滲透壓防止稱量和稀釋等造成的誤差,。上海瓊脂培養(yǎng)基制備器