利用三角培養(yǎng)瓶制備培養(yǎng)基:包扎,,分裝好后,,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,,防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕,。滅菌,按配方上要求的溫度,、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,。如果滅菌的溫度太高,營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)被破壞,,培養(yǎng)基中的糖,、氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深。擺斜面,,滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,,使其凝固成為一個(gè)斜面,約占試管長(zhǎng)度的1/2,。貯存,,培養(yǎng)基在30℃下放置,無(wú)污染的即可使用,。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用,。培養(yǎng)基是細(xì)胞生長(zhǎng)的必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),利用三角培養(yǎng)瓶制備培養(yǎng)基可按照以上步驟操作,,在使用前需確保培養(yǎng)基的無(wú)菌性,,以免影響細(xì)胞正常繁殖。實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)壓力與溫度參數(shù),,保障滅菌過(guò)程合規(guī)性,。 高效冷凝系統(tǒng)縮短冷卻時(shí)間,提升整體制備效率,。江西瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器
實(shí)驗(yàn)室在制作培養(yǎng)基時(shí)候的經(jīng)驗(yàn)總結(jié):1,、培養(yǎng)基成份稱量:培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯(cuò)亂,較好一次完成,不要中斷,??蓪⑴浞街糜诎鴤?cè),每稱完一種成分即在配方上做出記號(hào),,并將所需稱取的藥品一次取齊,,置于左側(cè),每種稱取完畢后,,即移放于右側(cè),。完全稱取完畢后,還應(yīng)進(jìn)行一次檢查,。2,、培養(yǎng)基成份的混合與溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,,使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。較好使用不銹鋼加熱溶化,,可放入大燒杯或大燒瓶中置于高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化,。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備器安裝調(diào)試Systec培養(yǎng)基制備器采用模塊化設(shè)計(jì),適配多種培養(yǎng)基類型需求,。
制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基:(1)方法步驟:計(jì)算,、稱量、溶化,、滅菌,、倒平板。(2)倒平板操作的步驟:①將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上,,右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,,左手拔出棉塞。②右手拿錐形瓶,,將瓶口迅速通過(guò)火焰,。③用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約10~20mL)倒入培養(yǎng)皿,,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋,。④等待平板冷卻凝固,大約需5~10min,。然后,,將平板倒過(guò)來(lái)放置,使培養(yǎng)皿蓋在下,、皿底在上,。倒平板操作的討論1.培養(yǎng)基滅菌后,,需要冷卻到50℃左右時(shí),才能用來(lái)倒平板,。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度,?提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí),,就可以進(jìn)行倒平板了。
血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),,該如何處理:血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,,但好普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成的,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血渭解凍后,,也會(huì)存在于血清中,,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物并不影響血清本身的質(zhì)量,。若想去除這些絮狀沉淀物,,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾,。不建議以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過(guò)濾膜,。何謂熱滅活:一般是以56℃,30分鐘來(lái)處理已解凍的血清,,因?yàn)榇思訜岵襟E可以使補(bǔ)體去活化,而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,,平滑肌的收縮,,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,增強(qiáng)吞噬作用,,淋巴細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞的趨化和啟動(dòng)。投資一臺(tái)高性能制備器可明顯降低實(shí)驗(yàn)失敗率,,長(zhǎng)期節(jié)省時(shí)間和成本,。
培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,,使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。好好使用不銹鋼鍋加熱溶化.也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化,。在鍋中溶化時(shí),、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng),以防焦化,、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象,、該培養(yǎng)基即不能使用,,應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后,,再用較小火力使所有成分完全溶化.迄至煮沸,。如為瓊脂培養(yǎng)基,應(yīng)先用一部分水將瓊脂溶化,,用另一部分水溶化其它成分,,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過(guò)程中,,因蒸發(fā)而丟失的水分,,較后必須加以補(bǔ)足。需具備±1°C以內(nèi)的精確控溫,,避免溫度波動(dòng)影響滅菌效果或成分穩(wěn)定性,。北京培養(yǎng)基制備器供應(yīng)商
培養(yǎng)基制備器勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,,血清會(huì)變得混濁!江西瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的滅菌:一般培養(yǎng)基可采用121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法,。在各種培養(yǎng)基制備方法中,如無(wú)特殊規(guī)定,,即可用此法滅菌,。某些畏熱成分,如糖類,,應(yīng)另行配成20%或更高的濃液,,以過(guò)濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無(wú)菌操作技術(shù),、定量加于培養(yǎng)基,。明膠培養(yǎng)基亦應(yīng)用較低溫度滅菌。血液,、體液和物品等則應(yīng)以無(wú)菌操作技術(shù)抽取和加入于經(jīng)冷卻約50°C左右的培養(yǎng)基中,。瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后立即取出,冷至55℃-60℃時(shí),,擺置成適當(dāng)斜面,,待其自然凝固。江西瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器