培養(yǎng)基的制備原則和要求：培養(yǎng)基是根據(jù)各類(lèi)微生物生長(zhǎng)繁殖的需要，用人工方法把多種物質(zhì)混合而成的營(yíng)養(yǎng)物,。一般用來(lái)分離,、培養(yǎng)菌類(lèi)。常用的培養(yǎng)基有基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、增菌培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基,、鑒別培養(yǎng)基和厭氧培養(yǎng)基,。在制備培養(yǎng)基時(shí),，應(yīng)掌握如下原則和要求：(一)培養(yǎng)基必須含有細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。所用的化學(xué)藥品必須純凈,，稱(chēng)取的份量務(wù)必準(zhǔn)確,。(二)培養(yǎng)基的酸堿度應(yīng)符合細(xì)菌生長(zhǎng)要求。按各種培養(yǎng)基要求準(zhǔn)確測(cè)定調(diào)節(jié)pH值,。多數(shù)細(xì)菌生長(zhǎng)的適宜pH值為7.2～7.6,，呈弱堿性。**電加熱**（帶溫控的磁力攪拌器）：建議選擇功率可調(diào),、加熱均勻的型號(hào),。福建自動(dòng)培養(yǎng)基制備器

實(shí)驗(yàn)室在制作培養(yǎng)基時(shí)候的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)：1、培養(yǎng)基成份稱(chēng)量：培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱(chēng)取并要注意防止錯(cuò)亂,，較好一次完成,，不要中斷?？蓪⑴浞街糜诎鴤?cè),，每稱(chēng)完一種成分即在配方上做出記號(hào)，并將所需稱(chēng)取的藥品一次取齊,，置于左側(cè),，每種稱(chēng)取完畢后，即移放于右側(cè),。完全稱(chēng)取完畢后,，還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。2,、培養(yǎng)基成份的混合與溶化：培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的,。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,，使細(xì)菌不易生長(zhǎng),。較好使用不銹鋼加熱溶化，可放入大燒杯或大燒瓶中置于高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化,。河南瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器**內(nèi)置冷卻系統(tǒng)**：部分培養(yǎng)基制備器配備水循環(huán)冷卻或風(fēng)扇冷卻功能,。

培養(yǎng)基的滅菌：培養(yǎng)基的滅菌多采用高壓蒸汽滅菌，各種培養(yǎng)基的滅菌時(shí)間和壓力,，按其成分不同而定,。普通培養(yǎng)基采用121℃、滅菌15min,，但容器和裝量較大時(shí),，應(yīng)延長(zhǎng)至20min。含糖培養(yǎng)基115℃、滅菌30min,。含糖,、血清、雞蛋等培養(yǎng)基可用流動(dòng)蒸汽及血清凝固器80—100℃,、30min，連續(xù)3d,，間歇滅菌,。血清或組織液,，采用低熱56—58水浴1h，連續(xù)5—6d滅菌,，一些遇高溫即被破壞的物質(zhì)如尿素,、腹水等，可用細(xì)菌過(guò)濾器,，過(guò)濾除菌,。高壓滅菌應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行，必須逐漸加熱,，徹底排除滅菌器內(nèi)的空氣,，再逐漸升壓保持預(yù)定的壓力和時(shí)間，達(dá)到全部殺滅微生物,。以上的滅菌時(shí)間和溫度要經(jīng)過(guò)驗(yàn)證確認(rèn),，如不同類(lèi)型培養(yǎng)基混合一起滅菌時(shí)宜采用115℃,、滅菌30min為好,。

培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備：1.水：除特定要求,實(shí)驗(yàn)室用水的電導(dǎo)率在25℃下應(yīng)不高于25uS/cm(相當(dāng)于電阻率≥0.4MΩcm)。微生物污染應(yīng)不超過(guò)103CFU/mL,，較好低于102CFU/mL,。應(yīng)根GB/T5750.12或其他有效方法,定期檢驗(yàn)微生物的污染。2.稱(chēng)量和復(fù)水：稱(chēng)量所需量的脫水培養(yǎng)基(注意防止吸入粉末,，尤其是含有有害物質(zhì)的培養(yǎng)基粉末),先加入少量水,充分混合(注意避免培養(yǎng)基結(jié)塊)后再加水至所需的量,。3.溶解和分裝：脫水培養(yǎng)基加水后適當(dāng)加熱,并不攪拌使其快速溶解，必要時(shí),，重新溶解,。含瓊脂的培養(yǎng)基在加熱溶解前應(yīng)浸泡幾分鐘。頻繁報(bào)錯(cuò)建議導(dǎo)出日志進(jìn)行專(zhuān)業(yè)診斷,。

分裝：配制好的培養(yǎng)基根據(jù)不同的用途分裝在三角瓶,、試管等容器中，分裝試管,，如果試管量很大,，可用自動(dòng)分液器。如果試管量少,，可用漏斗分裝,。分裝量不超過(guò)容器容積的三分之二。三角瓶以不超過(guò)容積的二分之一為宜,；瓊脂斜面以不超過(guò)試管長(zhǎng)度的五分之一為宜,，滅菌后，擺成的斜面為培養(yǎng)基的三分之一,、底層為三分之二的量為宜；半固體瓊脂分裝量為試管長(zhǎng)度的的三分之一,；用來(lái)接種或保菌的高層瓊脂,，分裝量為試管長(zhǎng)度的四分之一或三分之一，用來(lái)接種厭氧菌的要達(dá)到三分之二,；瓊脂平板,，內(nèi)徑90mm的以13ml~15ml為宜,，內(nèi)徑70mm的平板為8ml~10ml,，制成的瓊脂平板,。參數(shù)設(shè)置丟失需更換備用電池或存儲(chǔ)器,。黑龍江Systec培養(yǎng)基制備器

高溫下長(zhǎng)時(shí)間停留會(huì)導(dǎo)致瓊脂過(guò)度凝固、糖類(lèi)焦化或蛋白質(zhì)變性,。福建自動(dòng)培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基制備技術(shù)：一,、玻璃器皿的清洗：在制備培養(yǎng)基的過(guò)程中，首先要使用一些玻璃器皿,，如試管,、三角瓶、培養(yǎng)皿,、燒杯和吸管等,。這些器皿在使用前都要根據(jù)不同的情況，經(jīng)過(guò)一定的處理,，洗刷干凈,。有的還要進(jìn)行包裝，經(jīng)過(guò)滅菌等準(zhǔn)備就緒后,，才能使用,。1、新購(gòu)的玻璃器皿：除去包裝沾染的污垢后,，先用熱肥皂水刷洗，流水沖凈,，再浸泡于１～２％的工業(yè)鹽酸中數(shù)小時(shí),，使游離的堿性物質(zhì)除去，再以流水沖凈,。對(duì)容量較大的器皿,，如大燒瓶、量筒等,，洗凈后注入濃鹽酸少許,，轉(zhuǎn)動(dòng)容器使其內(nèi)部表面均沾有鹽酸，數(shù)分鐘后傾去鹽酸,，再以流水沖凈,，倒置于洗滌架上將水空干，即可使用,。2,、用過(guò)的玻璃器皿：凡確無(wú)病原菌或未被帶菌物污染的器皿，使用后可隨時(shí)沖洗,，吸取過(guò)化學(xué)試劑的吸管,，可先浸泡于清水中，待到一定數(shù)量后再集中進(jìn)行清洗,。有可能被病原菌污染的器皿,，必須經(jīng)過(guò)適當(dāng)消毒后,，將污垢除去，用皂液洗刷,，再用流水沖洗干凈,。福建自動(dòng)培養(yǎng)基制備器