報告基因選用GFP或RFP,，**小啟動子來自斑馬魚gata2基因,；將上述載體與體外轉(zhuǎn)錄得到的Tol2轉(zhuǎn)座酶的mRNA共同注射到斑馬魚的單細胞受精卵中，受精卵長大后成為founder,；Founder外交（out-cross）得到F1代胚胎,，從中挑選出對于報告基因具有組織特異性表達模式的胚胎，拍照記錄后分類培養(yǎng),；F1長大后通過linker-mediatedPCR的方法鑒定對應(yīng)于GFP（或RFP）表達圖式的Tol2插入位點，并通過與已知基因組數(shù)據(jù)比較,，對插入位點進行定位與分析,；通過外交純化得到轉(zhuǎn)基因魚,，直至得到只含有單個插入品系的轉(zhuǎn)基因魚,。斑馬魚基因功能研究實驗?zāi)Ｐ?。上海大學(xué)斑馬魚實驗

杭州環(huán)特生物科技股份有限公司，是亞洲家斑馬魚技術(shù)公司,，是專注服務(wù)于大健康和美妝產(chǎn)業(yè)的一站式功效與安全研發(fā)檢測解決方案提供商,。憑借在斑馬魚技術(shù)領(lǐng)域逾20年的深厚積累，環(huán)特生物將原本用于基礎(chǔ)研究的斑馬魚生物技術(shù),，開創(chuàng)性地運用到藥物,、保健食品,、化妝品和食品及農(nóng)產(chǎn)品的研究與評價中,。公司研發(fā)團隊由經(jīng)驗豐富的毒理學(xué)、藥理學(xué),、食品化學(xué),、生物化學(xué)、生物信息學(xué)等各領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)人員組成,。技術(shù)團隊成員中,，具有碩博以上學(xué)歷或高級以上職稱占比70%以上。實驗室場地面積超過1500平方米,，擁有熒光顯微鏡,、斑馬魚行為分析系統(tǒng)、斑馬魚心跳血液分析系統(tǒng),、GC-MS/MS等專業(yè)分析測試設(shè)備,。擁有國際前列的斑馬魚養(yǎng)殖設(shè)施,，養(yǎng)殖中心現(xiàn)有40,000尾成年斑馬魚，周產(chǎn)胚胎斑馬魚100,000條以上供實驗研究用,，,、完善的設(shè)施設(shè)備，從硬件層面有效保障了項目順利開展,。新疆斑馬魚實驗抗體利用斑馬魚胚胎透明的特點,，構(gòu)建綠色熒光蛋白（GFP）與內(nèi)源性靶蛋白的融合蛋白,。

斑馬魚作為模式生物的優(yōu)勢1,、斑馬魚與哺乳動物生物結(jié)構(gòu)與生理功能高度相似，實驗結(jié)果可比性強,。2,、斑馬魚與人類基因同源性高達85%，信號傳導(dǎo)通路基本近似,。3,、斑馬魚幼魚通體透明，可直接觀察多個組織和,。4,、實驗周期短，通常實驗1-5天能夠完成,。5,、實驗費用低，為鼠類實驗費用的1/10到1/100,。6,、體積小，易觀察,，可實現(xiàn)高通量,、高內(nèi)涵及自動化分析。7,、繁殖能力強,，每對斑馬魚一次可產(chǎn)150-300枚，單組實驗樣本數(shù)量多,。8,、實驗所需樣品量小，毫克級樣品即可完成實驗,。9,、符合3R（替代、減少,、優(yōu)化）原則,。10,、獲得歐美監(jiān)管部門和跨國藥食企業(yè)認可。

斑馬魚敲除品系成功案例1,、基因分析分析目的基因的保守結(jié)構(gòu)域,；2、靶點篩選設(shè)計4個gRNA靶點,，PCR檢測包含靶點的區(qū)域真實序列,，顯微注射驗證靶點效率；3,、大規(guī)模注射養(yǎng)殖F0Cas9pro+gRNA共注射,，共養(yǎng)殖F0約80條用于后期Founder篩選；4,、Founder篩選F0代斑馬魚與野生型外交,，收集48hpf的F1胚胎抽取基因組，PCR鑒定,，測序結(jié)果在靶點位置出現(xiàn)雙峰的認為產(chǎn)生突變,，然后TAclone驗證其可能產(chǎn)生的突變方式；5,、F1代篩選F1代斑馬魚剪尾篩選,，TAclone驗證突變方式：斑馬魚藥物研發(fā)服務(wù)外包公司。

斑馬魚在細胞譜系分析中的應(yīng)用斑馬魚是研究新的疾病治療方法的重要工具,，因為疾病相關(guān)基因的發(fā)現(xiàn)能夠鑒定基因特異***物靶標,。通過突變斑馬魚胚胎中的特定基因，可以在發(fā)育過程中分析突變體并用于鑒定疾病相關(guān)基因,。然后可以將所得的觀察結(jié)果外推至人類基因組,，以查看相同的突變基因是否是導(dǎo)致特定人類遺傳疾病的原因?？偟膩碚f,，斑馬魚作為動物模型特別有用，因為它們的成本低,，繁殖時間短,，并且與人類相對相似,。所以研究中很受歡迎的動物模型之一是斑馬魚,，一種原產(chǎn)于亞洲稻田的熱帶魚。斑馬魚實驗提高藥物研發(fā)效率,。新疆斑馬魚實驗用途

斑馬魚實驗用于生物醫(yī)學(xué)研究,。上海大學(xué)斑馬魚實驗

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杭州環(huán)特生物科技股份有限公司是一家集研發(fā)、生產(chǎn),、咨詢,、規(guī)劃、銷售,、服務(wù)于一體的服務(wù)型企業(yè),。公司成立于2010-03-29，多年來在斑馬魚實驗,，動物實驗,，功效安全評價，生物檢測行業(yè)形成了成熟,、可靠的研發(fā),、生產(chǎn)體系。在孜孜不倦的奮斗下,，公司產(chǎn)品業(yè)務(wù)越來越廣,。目前主要經(jīng)營有斑馬魚實驗，動物實驗，功效安全評價,，生物檢測等產(chǎn)品,，并多次以商務(wù)服務(wù)行業(yè)標準、客戶需求定制多款多元化的產(chǎn)品,。杭州環(huán)特生物科技股份有限公司研發(fā)團隊不斷緊跟斑馬魚實驗,，動物實驗，功效安全評價,，生物檢測行業(yè)發(fā)展趨勢,，研發(fā)與改進新的產(chǎn)品，從而保證公司在新技術(shù)研發(fā)方面不斷提升,，確保公司產(chǎn)品符合行業(yè)標準和要求,。杭州環(huán)特生物科技股份有限公司注重以人為本、團隊合作的企業(yè)文化,，通過保證斑馬魚實驗,，動物實驗，功效安全評價,，生物檢測產(chǎn)品質(zhì)量合格,，以誠信經(jīng)營、用戶至上,、價格合理來服務(wù)客戶,。建立一切以客戶需求為前提的工作目標，真誠歡迎新老客戶前來洽談業(yè)務(wù),。