高通量篩選技術，是目前藥物篩選領域研究的重要課題,，近年來，對它的研究應用雖然已取得了長足的發(fā)展,，但仍然存在許多難題,，如體外模型的篩選結果與整體藥理作用的關系；對高通量篩選模型的評價標準以及新的藥物作用靶點的研究和發(fā)現(xiàn)等,。隨著醫(yī)藥學的進步,，高通量篩選技術在創(chuàng)新藥物的研發(fā)中，一定會開拓出更廣闊的空間,。高通量篩選時每天要對數(shù)以千萬的樣品進行檢測,，工作枯燥，步驟單一,，操作人員容易疲勞,、出錯。自動化操作系統(tǒng)由計算機及其操作軟件,、自動化加樣設備,、溫孵離心設備和堆棧4個部分組成。自動化操作系統(tǒng)代替人工操作顯然有諸多優(yōu)勢,，它利用計算機通過操作軟件控制整個實驗過程,，編程過程簡潔明了。離子液體高通量篩選,。廣東高通量篩選

環(huán)特生物是一家以斑馬魚生物技術應用為的國家高新生物科技企業(yè),。作為行業(yè)獨一家同時獲得國家CNAS認可、CMA資質(zhì)認定,、AAALAC國際實驗動物認證的斑馬魚科技公司,，多項技術成果先后榮獲德國紐倫堡國際發(fā)明金獎,、英國國際發(fā)明展金獎及杰出創(chuàng)新獎和中國發(fā)明協(xié)會發(fā)明創(chuàng)業(yè)獎項目獎金獎等多項發(fā)明類國內(nèi)外大獎。高通量篩選(High throughput screening,，HTS)技術是指以分子水平和細胞水平的實驗方法為基礎,，以微板形式作為實驗工具載體，以自動化操作系統(tǒng)執(zhí)行試驗過程,，以靈敏快速的檢測儀器采集實驗結果數(shù)據(jù),，以計算機分析處理實驗數(shù)據(jù)，在同一時間檢測數(shù)以千萬的樣品,，并以得到的相應數(shù)據(jù)庫支持運轉的技術體系,，它具有微量、快速,、靈敏和準確等特點,。簡言之就是可以通過一次實驗獲得大量的信息，并從中找到有價值的信息,。上海細胞高通量篩選酶的高通量篩選實驗,。

高通量篩選技術符合QbD的理念，是實現(xiàn)QbD的有力工具,?？色@得的工藝信息，從而增加對工藝的理解,，也為后續(xù)的工藝設計空間以及開發(fā)穩(wěn)定的工藝奠定了基礎,，不僅減少樣品的消耗量，更可縮短藥物進入臨床階段的時間,。由于高通量篩選（HTS）具有微量,、快速、靈敏和準確等特點,，從二十世紀九十年代開始,，海外各大藥企已經(jīng)開始積累擴大化合物庫和使用HTS技術來支持新藥研發(fā)。隨著用于HTS的操作設備和檢測儀器的發(fā)展,，自動化控制和計算機數(shù)據(jù)分析軟件的開發(fā),，HTS的效率和結果的準確性得到了提高。由于HTS使用了數(shù)量龐大的樣品庫,，實現(xiàn)了藥物篩選的規(guī)?；岣吡诵滤幬锇l(fā)現(xiàn)的幾率和質(zhì)量,。

蛋白質(zhì)片段互補分析(PCA,，也稱為雙分子熒光互補)和雙雜交篩選允許檢測細胞中蛋白質(zhì)相互作用的形成/抑制。PCA將單個檢測蛋白（熒光素酶、GFP,、GAL）分成兩部分,，這些部分與感興趣的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用融合；如果伴侶結合,，檢測蛋白會重新形成并檢測到信號,。高內(nèi)涵成像平臺（HCS）由于其能夠提供出色的單細胞分析功能和短的數(shù)據(jù)采集時間獲得大家的青睞。一般的實驗流程為設計實驗并使用自動分液儀將細胞接種到96,、384或1536孔板中,；然后加入化合物，由于細胞在孵育過程中會對化合物做出反應,，隨后對細胞進行染色,，并通過HCS成像系統(tǒng)獲取圖像，通過軟件分析獲取的圖像以確定化合物的劑量反應,。細胞水平高通量篩選,。

在報告基因檢測(也稱為信號通路檢測)中，報告蛋白的序列編碼是在相關通路的轉錄控制下引入的,。通過熒光或光學讀數(shù)監(jiān)測報告基因的表達,，通過這些指標來間接反應啟動子的或抑制程度。觀察到的信號是整個通路的產(chǎn)物,，篩選的化合物可以在該通路上的任何點相互作用,。常見的報告基因是CAT（氯霉素乙酰轉移酶）、GAL（β-半乳糖苷酶）,、LAC（β-內(nèi)酰胺酶）、LUC（熒光素酶）和GFP,。我們通常使用的為LUC（熒光素酶）,，但也可以使用其他報告基因。高通量篩選藥物分析儀,。廣東高通量篩選

高通量篩選的前提是什么,。廣東高通量篩選

化合物庫的質(zhì)量包括三個方面：多樣性、有效濃度,、化合物庫大小,。化合物庫的多樣性制約著苗頭化合物的新穎性,，而化合物的有效濃度則影響著活性化合物的檢出概率,。因此化合物庫的多樣性越大，化合物的有效濃度越高意味著苗頭化合物檢出率更有保證,。但是兩者之前需要有一個平衡,，一個化合物庫里單一化合物簇（Cluster）維持在4~12個化合物的時候，多樣性和有效濃度都能得到保障,。另外,，對于化合物庫大小而言,，理論情況下（基于多樣性、有效濃度以及靶點的成藥難度基本一致的隨機篩選而言）,，大的化合物庫有利于發(fā)現(xiàn)更多的苗頭化合物,。但是基于此次有限的匯總數(shù)據(jù)來看（有4個化合物庫達到了百萬級（0.6M~1.8M）），定向化合物庫（FocusLibrary）（圖七中紅色圈部分）由于其自身的特點檢出率較好,，而大的化合物庫并沒有帶來更高的苗頭化合物檢出率以及更高質(zhì)量的苗頭化合物廣東高通量篩選

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