Openfieldtest(曠場試驗)為了探究運動和自發(fā)活動,,我們描繪了魚的行為當(dāng)它們在Plexiglasopen-fieldapparatus(裝置,、設(shè)備、儀器)中自在探究時(直徑20厘米,;高10厘米)(圖1a),。魚別離轉(zhuǎn)移到魚缸中10分鐘;8分鐘內(nèi)的軌道由頂部視圖攝像機(jī)記錄下來進(jìn)行分析,。在試驗過程中,,測量了受試者在中心和邊緣區(qū)域花費的時刻、移動的總間隔(cm)和平均速度(cm/s),。2,、Noveltanktest(新型水槽測驗)本發(fā)明公開了一種通明的1.5升梯形水槽檢測裝置(15.2×27.9×22.5×7.2cm;高×上底×下底×寬)(圖1c)。魚在早上(9:00)或晚上(21:00)被放在這個水槽里10分鐘,。8分鐘記錄他們的行為軌道,。為了進(jìn)行軌道分析,新型水槽實際上被分為三個水平段(上,、中,、下)。模擬人類疾病造模,,斑馬魚實驗可準(zhǔn)確復(fù)現(xiàn)病癥,,為攻克疑難病找方向,成醫(yī)學(xué)研究好幫手,。江西國內(nèi)斑馬魚實驗室
在重金屬污染評估中,,斑馬魚胚胎的金屬硫蛋白(MT)基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制展現(xiàn)出獨特優(yōu)勢,。當(dāng)水體中鎘離子濃度超過5μg/L時,斑馬魚胚胎肝臟區(qū)域MT基因表達(dá)量在6小時內(nèi)可上調(diào)20倍,,該生物標(biāo)志物較傳統(tǒng)化學(xué)檢測法響應(yīng)時間縮短80%,。某研究團(tuán)隊利用斑馬魚胚胎陣列技術(shù),同時檢測了電子垃圾拆解區(qū)水樣中鉛,、汞,、鎘等12種重金屬的復(fù)合毒性,發(fā)現(xiàn)實際毒性效應(yīng)較單一金屬檢測結(jié)果高5-8倍,,揭示了傳統(tǒng)檢測方法的局限性,。斑馬魚胚胎的透明特性使得其神經(jīng)管發(fā)育畸形、血管生成異常等表型可直接觀測,,為污染物致畸效應(yīng)研究提供了可視化證據(jù),。斑馬魚環(huán)特生物通過斑馬魚實驗,可以觀察到心臟發(fā)育及血液流動狀況,,對心血管研究有重要意義,。
斑馬魚胚胎急性毒性實驗已成為全球藥物安全性評價的“金標(biāo)準(zhǔn)”。美國FDA批準(zhǔn)的Zebrafish Embryo Acute Toxicity Test(ZFET)方法,,通過96小時暴露期觀察胚胎死亡率,、畸形率及孵化率,可替代部分哺乳動物急性毒性實驗,。數(shù)據(jù)顯示,,斑馬魚胚胎對藥物肝毒性的預(yù)測準(zhǔn)確率達(dá)89%,較傳統(tǒng)細(xì)胞實驗靈敏度提升25%,。某跨國藥企在抗ancer藥物篩選中,,利用斑馬魚胚胎模型發(fā)現(xiàn),一種靶向BRAF突變的化合物在低濃度下即導(dǎo)致胚胎心臟水腫,,而該毒性在體外細(xì)胞實驗中未被檢出,,避免了后續(xù)臨床前研究的資源浪費。
【試驗計劃】咱們將受測試軟骨熒光斑馬魚分成三組,,分別是正常對照組,、模型對照組和軟骨修正產(chǎn)品組。其間正常對照組未攝入DXMS,,模型對照組與服用軟骨修正產(chǎn)品組都攝入了等量的DXMS(DXMS經(jīng)過溶解到養(yǎng)魚用水中的方法攝入到斑馬魚體內(nèi)),。服用軟骨修正產(chǎn)品組在攝入DXMS的一起攝入硫酸軟骨素之類的軟骨修正產(chǎn)品。服用一段時間軟骨修正產(chǎn)品后,,咱們觀察軟骨熒光的改變,。能夠看到,服用軟骨修正產(chǎn)品組的軟骨情況與未攝入DXMS的正常對照組比較類似,沒有明顯的軟骨損害,。斑馬魚幼魚通體透明,,適合篩選抗tumor藥物和觀察tumor轉(zhuǎn)移。
【點評原理】關(guān)節(jié)軟骨遭到急性外傷和慢性磨損,,出現(xiàn)不同程度的損害,,導(dǎo)致關(guān)節(jié)疼、活動受限,,乃至功能喪失,。關(guān)節(jié)軟骨的修正首要靠軟骨細(xì)胞的增殖分化,生產(chǎn)滿足的細(xì)胞外基質(zhì)修正軟骨缺損,。人軟骨細(xì)胞通常是停止的,,血管化程度低,營養(yǎng)首要來源于關(guān)節(jié)液和軟骨下骨,,修正再生則顯得十分有限,,需求外源性的手法來輔佐修正。DXMS破壞軟骨細(xì)胞的代謝平衡,,引起軟骨細(xì)胞的逝世或凋亡,,從而引起軟骨損害。斑馬魚的骨骼發(fā)育與其他脊椎動物骨骼發(fā)育進(jìn)程極其類似,,因此,,可用于軟骨修正功效點評。斑馬魚的軟骨首要散布于頭部,,包括七對咽顱軟骨弓(下頜弓,、舌弓及五對鰓弓)和腦顱軟骨。根據(jù)轉(zhuǎn)基因軟骨熒光斑馬魚特性,,患有軟骨損害的斑馬魚的軟骨熒光強(qiáng)度會顯著比正常斑馬魚的軟骨熒光強(qiáng)度要暗許多,,能夠顯著被觀察到。斑馬魚與基因編輯在腦科學(xué)研究的應(yīng)用,。寧夏國內(nèi)做的斑馬魚實驗室
轉(zhuǎn)基因斑馬魚在環(huán)境監(jiān)測中用于檢測水中的污染物,,具有重要應(yīng)用價值,。江西國內(nèi)斑馬魚實驗室
斑馬魚鰭再生模型為組織工程研究提供了理想平臺,。美國斯坦福大學(xué)團(tuán)隊通過單細(xì)胞RNA測序技術(shù),揭示了斑馬魚鰭再生過程中“去分化-增殖-再分化”的三階段調(diào)控網(wǎng)絡(luò),。研究顯示,,再生初期上皮細(xì)胞通過表達(dá)Wnt信號通路jihuo因子(如wnt5a),誘導(dǎo)基質(zhì)細(xì)胞去分化為祖細(xì)胞,,而該過程受microRNA-133的負(fù)向調(diào)控,。通過化學(xué)小分子干預(yù)microRNA-133表達(dá),可使斑馬魚鰭再生速度提升50%,為人類肢體再生研究提供了新的分子靶點,。在個性化醫(yī)療領(lǐng)域,,斑馬魚患者源性異種移植(PDX)模型展現(xiàn)出獨特優(yōu)勢。中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院團(tuán)隊將急性淋巴細(xì)胞白血病患者的tumor細(xì)胞移植至斑馬魚胚胎,,發(fā)現(xiàn)其tumor生長速率與患者臨床預(yù)后明顯相關(guān)(r=0.82),。進(jìn)一步通過高通量藥物篩選,發(fā)現(xiàn)患者特異性敏感藥物在斑馬魚模型中的有效率達(dá)78%,,較傳統(tǒng)細(xì)胞系篩選結(jié)果準(zhǔn)確率提升30%,。該技術(shù)已應(yīng)用于兒童白血病準(zhǔn)確醫(yī)療,使部分難治性患者的完全緩解率從40%提升至65%,。江西國內(nèi)斑馬魚實驗室