酵母單雜交篩選：（4）在篩選到的轉(zhuǎn)錄因子中,，***GL1促進(jìn)HIV-2轉(zhuǎn)錄。***GL1在免疫細(xì)胞中***表達(dá),，并與HIV的其他轉(zhuǎn)錄***因子,，即Sp1、AP-1和PCAF/CBP/P300存在相互作用,，本研究中顯示HEK293T細(xì)胞中,，***GL1過表達(dá)后，與LTR連接的螢火素酶表達(dá)上升近2倍,，說明***GL1是一個(gè)轉(zhuǎn)錄***因子,。值得一提的是，文章的背景介紹內(nèi)容中，對(duì)應(yīng)用其他技術(shù)（如RNAi,、scRNA-seq,、CRISPR等）對(duì)HIV轉(zhuǎn)錄調(diào)控方向的已有成果分析,，發(fā)現(xiàn)這些方法為HIV-1的復(fù)制和潛伏期提供了見解,，但并沒有直接評(píng)估轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合和功能。文章中也對(duì)酵母單雜交技術(shù)與其他互作組技術(shù)（如Chip-seq,、motif預(yù)測(cè)）進(jìn)行了比較分析,，發(fā)現(xiàn)eY1H技術(shù)對(duì)已識(shí)別因子的驗(yàn)證率為30-60%，同等或優(yōu)于其他技術(shù),。合作文章上百篇,，平均影響因子高達(dá)7.124 歐易生物酵母文庫(kù)。江西酵母文庫(kù)

蛋白被泛素化后（即蛋白上結(jié)合了泛素）,，意味著將要被運(yùn)往蛋白酶體降解,，一般用于降解細(xì)胞內(nèi)老弱病殘蛋白，再回收利用,。同時(shí)也被用于排除異己,，抵御外敵。該過程需要一系列酶介導(dǎo)：泛素***酶（E1）,、泛素偶聯(lián)酶（E2）和泛素E3連接酶（E3）,。其中E3是起特異性識(shí)別作用的，即決定誰(shuí)該被降解,，不能把好同志降解掉,。所以E3基因很多，植物中主要有四種類型：HECT,、RING,、U-box和CRLs。其中CRLs是植物中含量**豐富的E3連接酶,。本研究中,，通過酵母雙雜交篩選到的標(biāo)題蛋白MdBT2，整好是CRLs亞家族之一,。因此作者推測(cè)MdBT2可能在與ApNMV1a結(jié)合后,，起到了促進(jìn)其泛素化和降解的作用。江西酵母文庫(kù)專業(yè)酵母文庫(kù)構(gòu)建和篩選公司多年經(jīng)驗(yàn),。

通過酵母雙雜交進(jìn)行篩選,，結(jié)果顯示 SWC6 可以在藍(lán)光下與 CRY1 相互作用（圖 A-C）。同樣,，酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)顯示 CRY2 也可以在藍(lán)光下與 SWC6 相互作用（圖 D）,。并通過 pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down,、Co-IP 實(shí)驗(yàn)（圖 E-L）證實(shí) CRY1,、CRY2 與 SWC6 的結(jié)合是藍(lán)光依賴性的。SWC6 是真核生物中已報(bào)道的 SWR1 復(fù)合物亞基,，負(fù)責(zé)催化 H2A.Z 在染色質(zhì)上的替換,。已報(bào)道 SWR1 復(fù)合物中 SWC6 可以與 ARP6 亞基結(jié)合。Pull-down,、split-LUC,、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實(shí)驗(yàn)（圖 A-H）顯示,，CRY1,、CRY2 可以藍(lán)光依賴性與 ARP6 結(jié)合。

利用酵母雙雜交技術(shù)進(jìn)行篩選,，結(jié)果顯示SP8可以與水稻OsMYC3蛋白相互作用,，并且二者互作關(guān)系通過酵母一對(duì)一互作、BiFC,、Co-IP,、LCI實(shí)驗(yàn)得以驗(yàn)證（圖A-C）。利用截短的SP8進(jìn)行酵母一對(duì)一互作和Co-IP檢測(cè)表明,，與OsMYC3的結(jié)合依賴于SP8的NTP結(jié)構(gòu)域（圖D-E）,；同樣，OsMYC3的TAD結(jié)構(gòu)域也是二者互作所必不可少的（圖F）,。酵母雙雜交,、BiFC實(shí)驗(yàn)表明，OsMYC3可以與OsJAZ相互作用,。經(jīng)茉莉酸處理,，野生對(duì)照株根的長(zhǎng)度明顯被抑制、一系列JA生物合成和信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)基因表達(dá)量上升,，但Osmyc3突變體中抑制程度減輕,、JA相關(guān)基因表達(dá)量上升減少。進(jìn)口試劑高服務(wù)質(zhì)量市場(chǎng)份額大酵母文庫(kù),。

酵母雙雜交,、GSTpull-down實(shí)驗(yàn)顯示，SWC6可以直接與HY5,、HYH相互作用（圖A-C）,。pull-down實(shí)驗(yàn)顯示ARP6同樣可以與HY5、HYH相互作用（圖D）,。split-LUC,、Co-IP實(shí)驗(yàn)證實(shí)HY5可以與SWC6、ARP6結(jié)合（圖E-J）。下胚軸表型分析顯示,，藍(lán)光下arp6hy5hyh三突變體下胚軸長(zhǎng)度明顯大于arp6突變體,、hy5hyh雙突變體，表明ARP6和HY5有可能通過不同途徑調(diào)控下胚軸的發(fā)育,。Semi-in vivo pull-down,、Co-IP 實(shí)驗(yàn)顯示，藍(lán)光下,，在 CRY1 存在下,，SWC6 與 ARP6 的結(jié)合***增強(qiáng),。表明藍(lán)光***的 CRY1 可能通過藍(lán)光依賴的 CRY1-SWC6/ARP6 相互作用增強(qiáng) SWC6 與 ARP6 的結(jié)合,。酵母文庫(kù)已知蛋白互作靈活定制建庫(kù)。江西酵母文庫(kù)

酵母雜交技術(shù)是很巧妙且很好用的蛋白/蛋白,，蛋白/DNA等分子互作檢測(cè)的技術(shù),。江西酵母文庫(kù)

文章中酵母雙雜交文庫(kù)由歐易生物制備。2021年5月,，北京林業(yè)大學(xué)鈕世輝副教授為通訊作者,，在PlantPhysiology雜志（IF:6.902）在線發(fā)表了題為“MADS-boxtranscriptionfactorsMADS11andDAL1interacttomediatethevegetative-to-reproductivetransitioninpine”的研究論文，深入探討了油松中營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)-生殖生長(zhǎng)時(shí)相轉(zhuǎn)變調(diào)控的分子機(jī)制,。北京林業(yè)大學(xué)馬晶晶博士為***作者,，文章中酵母雙雜交文庫(kù)由歐易生物制備。本研究通過 7 個(gè)樹齡的油松樣品轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,，鑒定到一個(gè)與年齡信號(hào)***相關(guān)的基因模塊,，該模塊包含 33 個(gè)轉(zhuǎn)錄因子，包括 SOC1-like,、DAL1 等,。江西酵母文庫(kù)

上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司是一家檢驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)。（依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,，經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營(yíng)活動(dòng),，具體經(jīng)營(yíng)項(xiàng)目以相關(guān)部門批準(zhǔn)文件或許可證件為準(zhǔn)）一般項(xiàng)目：生物醫(yī)藥產(chǎn)品、生化產(chǎn)品的研發(fā),，醫(yī)藥中間體,、化工原料及產(chǎn)品（除危險(xiǎn)品化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品,、易制毒化學(xué)品）的研發(fā),、銷售，儀器儀表的銷售,，并提供相關(guān)技術(shù)咨詢,、技術(shù)服務(wù)，會(huì)務(wù)服務(wù)，企業(yè)管理咨詢,。的公司,，致力于發(fā)展為創(chuàng)新務(wù)實(shí)、誠(chéng)實(shí)可信的企業(yè),。歐易生物擁有一支經(jīng)驗(yàn)豐富,、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團(tuán)隊(duì)，以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供科研服務(wù),，科研檢測(cè),，學(xué)術(shù)研究，技術(shù)咨詢,。歐易生物始終以本分踏實(shí)的精神和必勝的信念,，影響并帶動(dòng)團(tuán)隊(duì)取得成功。歐易生物始終關(guān)注醫(yī)藥健康行業(yè),。滿足市場(chǎng)需求,，提高產(chǎn)品價(jià)值，是我們前行的力量,。