酵母文庫:近日,,上海市農(nóng)業(yè)科學院作物育種栽培研究所儲黃偉副研究員,、曹黎明研究員為共同通訊作者,在Plant,,Cell&Environment雜志(IF:7.228)在線發(fā)表了題為“Aconservedclathrin-coatedvesiclecomponent,,OsSCYL2,regulatesplantinnateimmunityinrice”的研究論文,,報道了水稻中一個被網(wǎng)格蛋白包被囊泡的一個重要組分OsSCYL2調(diào)控稻水先天免疫的分子機制,。上海市農(nóng)業(yè)科學院作物所碩士研究生姚瑤和周繼華助理研究員為該論文的共同***作者。文章中酵母雙雜交實驗由歐易生物完成,。酵母文庫質粒使用指南酵母菌的介紹 ,。湖南應用酵母文庫做什么
通過酵母雙雜交文庫進行了互作蛋白的篩選,結果顯示TaTIFY9可以與TaSRL1相互作用(下圖A),,并通過Bi-FC,、熒光互補實驗得以證實(圖B-C)。TaTIFY9屬于茉莉酸信號途徑關鍵因子JAZ家族的成員之一,。RT-PCR顯示TaTIFY9也主要表達于小麥根部,,外源施加茉莉酸可以***誘導TaTIFY9表達。這一結果表明,,TaSRL1可能通過與TIFY9結合介導了茉莉酸對根生長的抑制。已有研究表明 ERF 蛋白可以特異性結合到靶基因啟動子序列中的 GCC-box 序列,。TaSRL1 屬于 ERF 家族,。在生長素轉運基因 TaPIN2 的啟動子序列中含有一個 GCC-box 序列。酵母單雜交實驗顯示,,TaSRL1 可以直接與 TaPIN2 啟動子結合并***其表達(圖 A),,但該***作用會被TaSRL1的互作蛋白TaTIFY9 所抑制(圖 B和C)。湖南應用酵母文庫做什么酵母文庫文庫構建篩選歐易生物,。
酵母雙雜交(Y2H):植物轉錄因子(Plant transcripter factors,, TFs)是調(diào)控植物生長發(fā)育和環(huán)境適應性的關鍵分子。雖然在一些數(shù)據(jù)庫中,,如RiceSRTFDB (Priya and Jain,, 2013), Ricettissuetfdb (Chen et al.,,PlnTFDB (Pérez-Rodríguez et al.,, 2009)和PlantTFDB (Jin et al., 2017),,可以預測水稻轉錄因子功能,。但通過具體實驗研究,來直接證實轉錄因子對植物的調(diào)控作用仍然是必不可少的,。酵母雙雜交(Y2H)和酵母單雜交(Y1H)是被用于研究蛋白-蛋白以及蛋白-DNA互作的**常用技術,。為了方便和促進水稻育種研究,,陳凡老師與歐易生物達成合作,整合雙方優(yōu)勢資源,,歷經(jīng)春秋與冬夏,,成功構建了基于粳稻(日本晴)基因組的水稻轉錄因子文庫。該項成果以“一種高效的篩選系統(tǒng)來鑒定大米轉錄因子的蛋白質-蛋白質或蛋白質-DNA相互作用伙伴”為題,,發(fā)表于雜志JGG上,。
歐易生物酵母文庫技術發(fā)表的又一篇高水平研究論文。植物***茉莉酸(JA)參與植物許多發(fā)育過程的調(diào)控,。JAZ蛋白是茉莉酸信號反應的阻遏物,,通過抑制JA轉錄調(diào)節(jié)劑來負向調(diào)節(jié)JA信號?;ㄇ嗨睾驮ㄇ嗨厥欠N子,、葉、花和果實中重要的植物次生代謝產(chǎn)物,,可充當抗氧化劑,,幫助***活性氧和對**老,對人類健康具有重要價值,。已有研究表明,,花青素和原花青素的生物合成基因的轉錄受MYB、basichelix-loop-helix(bHLH)及WD40蛋白的調(diào)控,。其中,,蘋果MYB轉錄因子MdMYB9參與調(diào)控JA介導的花青素和原花青素的生物合成,但其分子機制仍有待深入研究,。smart酵母建庫和gateway酵母建庫,滿足各類客戶的需求,。
酵母文庫實驗實驗表明,MdTRB1 可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積,。MdTRB1 與 MdMYB9 結合可以增強后者對下游基因的轉錄***活性,。而 MdTRB1 與 MdJAZ1 的結合,可以干擾其與 MdMYB9 的互作,,進而負向調(diào)控 MdTRB1 介導的對花青素和原花青素積累的促進作用,。本研究表明,JAZ1-TRB1-MYB9 復合物可以動態(tài)調(diào)控 JA 介導的花青素和原花青素的積累,。本研究為進一步研究 JA 對花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見解,。本研究鑒定了一個可以與 MdMYB9 相互作用的蛋白 MdTRB1。實驗表明,,MdTRB1 可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積,。專業(yè)化的篩庫流程,多重質檢保證質量。初篩+復篩提高目標陽性克隆質粒精確度,。江蘇歐易生物酵母文庫
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酵母文庫實驗:MAPK級聯(lián)***是植物防御病原體入侵信號傳導過程中的關鍵事件,MAPKs靶向并磷酸化調(diào)節(jié)下游基因轉錄的轉錄因子,,**終響應病原菌的侵入,。WRKYs轉錄因子是MAPK級聯(lián)的重要目標,在植物對各種病原體的抗性中起著關鍵作用,。蘋果如何響應炭疽菌入侵,,將信號傳導到細胞內(nèi),以及哪個轉錄因子負責協(xié)調(diào)促進GLS耐受均尚不清楚,。本研究在蘋果炭疽葉枯病易感品種“嘎拉”中發(fā)現(xiàn)了一個由蘋果炭疽菌******誘導的轉錄因子MdWRKY17,。在6個易感蘋果種質中,MdWRKY17表達水平***高于6個耐受蘋果種質,,同時對應的水楊酸含量降低,,證實了MdWRKY17介導的水楊酸降解在GLS耐受中的關鍵作用。湖南應用酵母文庫做什么
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