本發(fā)明屬于氨基酸生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域：,，具體涉及一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,。背景技術(shù)：：谷氨酸，是一種酸性氨基酸,。分子內(nèi)含兩個(gè)羧基,，化學(xué)名稱(chēng)為α-氨基戊二酸。谷氨酸是里索遜1856年發(fā)現(xiàn)的,，為無(wú)色晶體,，有鮮味，微溶于水,，而溶于鹽酸溶液,，等電點(diǎn)。大量存在于谷類(lèi)蛋白質(zhì)中,，動(dòng)物腦中含量也較多,。谷氨酸在生物體內(nèi)的蛋白質(zhì)代謝過(guò)程中占重要地位，參與動(dòng)物,、植物和微生物中的許多重要化學(xué)反應(yīng),。谷氨酸鈉俗稱(chēng)味精,，是重要的鮮味劑,，對(duì)香味具有增強(qiáng)作用,。谷氨酸鈉***用于食品調(diào)味劑，既可單獨(dú)使用,，又能與其它氨基酸等并用,。用于食品內(nèi)，有增香作用,。在食品中濃度為,，每人每天允許攝入量為0－120微克/千克(以谷氨酸計(jì))。在食品加工中一般用量為－,。谷氨酸主要以微生物發(fā)酵制備而得,，通過(guò)優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基，使得菌體增殖速率提高,，可以提高氨基酸的產(chǎn)量?，F(xiàn)有技術(shù)對(duì)谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化進(jìn)行了大量的研究，例如文獻(xiàn)1“基于pb試驗(yàn)和響應(yīng)面分析法對(duì)谷氨酸棒桿菌cnl021發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化,，**釀造2014年”,，通過(guò)**陡爬坡試驗(yàn)和響應(yīng)面分析法對(duì)發(fā)酵培養(yǎng)基組成進(jìn)行優(yōu)化，得到谷氨酸棒桿菌**適發(fā)酵培養(yǎng)基組,，較未優(yōu)化培養(yǎng)基的發(fā)酵培養(yǎng)基產(chǎn)酸量提高了,。MEM培養(yǎng)基在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出高效的穩(wěn)定性。山東F12培養(yǎng)基產(chǎn)品介紹

    文獻(xiàn)2“混合硝酸稀土對(duì)谷氨酸產(chǎn)生菌的影響，氨基酸雜志”發(fā)現(xiàn),，在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加一定量的稀土元素,，能夠提高谷氨酸的產(chǎn)量。申請(qǐng)人之前的**技術(shù)“一種谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基制備方法”,，在常規(guī)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn),，通過(guò)添加菌體蛋白浸膏來(lái)替代酵母膏氮源，不但節(jié)約了成本,，還能提高氨基酸發(fā)酵產(chǎn)率,，一舉兩得。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：在已有發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,，申請(qǐng)人針對(duì)微生物發(fā)酵的特點(diǎn),，繼續(xù)進(jìn)行了改進(jìn)，以提高發(fā)酵效率,，據(jù)此,，提出了一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基。本發(fā)明是通過(guò)如下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的：一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,，其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b,；所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加，然后間隔12h以上添加發(fā)酵培養(yǎng)基b,。進(jìn)一步地，所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為：取各原料：葡萄糖,，酵母浸膏,，k2hpo4，mgso4·7h2o,，2-羥基乙胺,，cecl3，mnso4·h2o,，feso4·7h2o,，vb1，生物素,；將各原料攪拌均勻后,，調(diào)節(jié)ph，**,，制得發(fā)酵培養(yǎng)基a,。進(jìn)一步地，所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為：取各原料：琥珀酸,，尿素,，殼聚糖；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)ph,，**,，制得發(fā)酵培養(yǎng)基b。推薦地,，所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為：取各原料：葡萄糖50-100g/l,，酵母浸膏10-30g/l，k2hpo41-5g/l,。天津F12培養(yǎng)基進(jìn)貨價(jià)無(wú)酚紅培養(yǎng)基在敏感細(xì)胞系的培養(yǎng)中表現(xiàn)優(yōu)越,。

    可通過(guò)在細(xì)胞培養(yǎng)基中添加一些保護(hù)劑，降低細(xì)胞-氣體和細(xì)胞-液體的表面張力,，減少氣泡的形成,。4.細(xì)胞培養(yǎng)基的**及儲(chǔ)存**方式及注意事項(xiàng)細(xì)胞培養(yǎng)基**的方式分為高壓**和膜過(guò)濾**，不同的培養(yǎng)基由于其營(yíng)養(yǎng)成份不同,，**方式也可能不同,。①高壓**某些培養(yǎng)基（如MEM）可進(jìn)行高壓**，這類(lèi)培養(yǎng)基一般不含有L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉,，一般是在培養(yǎng)基高壓**后才加入,。另外可用耐高壓的谷氨酸鹽（如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）代替L-谷氨酰胺?？筛邏?*的培養(yǎng)基在121℃,、15psi，15分鐘的條件下完全可達(dá)到**效果及營(yíng)養(yǎng)成分的**小損失,，不需將**時(shí)間延長(zhǎng),。絕大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)基不適宜高壓**。因培養(yǎng)液中常含有維生素,、蛋白質(zhì),、多肽、生長(zhǎng)因子等物質(zhì),，這些物質(zhì)在高溫或射線(xiàn)照射下易發(fā)生變性或失去功能,，因而上述液體多采用過(guò)濾消毒以除去**?？晒┻^(guò)濾**使用的濾膜很多,，其材料多為polyethersulphone（PES）、尼龍,、多聚碳酸鹽,、醋酸纖維素、硝酸纖維素,、PTFE,、陶瓷等,。膜過(guò)濾**是當(dāng)前較為常用及便捷的一種方法，常采用μm孔徑的濾膜,，部份采用μm孔徑,。與高壓過(guò)濾方式相比，濾膜具有使用期限且價(jià)格較高,，但對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成份破壞性較小,。通常液體細(xì)胞培養(yǎng)基避免-20℃凍存。

    1),、初代培養(yǎng)：繡球外植體,，將葉片剪去，自來(lái)水沖洗干凈,。在超凈工作臺(tái)上把已經(jīng)沖洗干凈的外植體浸入75％酒精中消毒30s,，用無(wú)菌水沖洗3～4次。使用白貓漂白水和無(wú)菌水按1：4的體積比配制消毒液,，將外植體放入消毒液浸泡40min,，其中白貓漂白水為上海白貓(集團(tuán))有限公司生產(chǎn)的“白貓”牌家用漂白水。消毒完成,，將外植體接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng),，建立無(wú)菌再生系統(tǒng)，誘導(dǎo)培養(yǎng)環(huán)境為光照強(qiáng)度1500lx條件下,，溫度25℃,，光照時(shí)間16h；黑暗條件下,，溫度23℃,，光照時(shí)間8h，培養(yǎng)6～8周,。其中誘導(dǎo)培養(yǎng)基為ms+～～，誘導(dǎo)培養(yǎng)基的ph值為,。(2),、繼代培養(yǎng)：以建立的無(wú)菌再生系統(tǒng)為對(duì)象，將無(wú)菌外植體轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基,，其中增殖培養(yǎng)基為ms+～～,，培養(yǎng)環(huán)境為光照強(qiáng)度1500lx條件下，溫度25℃,，光照時(shí)間16h,；黑暗條件下，溫度23℃,，光照時(shí)間8h,，培養(yǎng)8～12周。每隔8～12周轉(zhuǎn)接入新的增殖培養(yǎng)基，增殖培養(yǎng)基的ph值為,。(3),、生根培養(yǎng)：經(jīng)過(guò)繼代培養(yǎng)的繡球組培苗，取2～3cm的頂芽,，放入生根培養(yǎng)基,，其中生根培養(yǎng)基為1/2ms+～～，生根培養(yǎng)基的ph值為,。誘導(dǎo)培養(yǎng)環(huán)境為光照強(qiáng)度1500lx條件下,，溫度25℃，光照時(shí)間16h,；黑暗條件下,，溫度23℃，光照時(shí)間8h,，培養(yǎng)8～12周,。。無(wú)血清培養(yǎng)基提供了純凈的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境,。

    公司活動(dòng)友康生物不是一棟樓,，也不是一堆自動(dòng)化設(shè)備。他是一群不浮躁,、快樂(lè)工作,，幸福生活的人。首頁(yè)/友康產(chǎn)品無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基（脂肪—原代細(xì)胞分離及傳代培養(yǎng)）特別適用于*物申報(bào)企業(yè),。無(wú)血清,、無(wú)動(dòng)物源；化學(xué)組分明確,，不含任何未知組分脂肪干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基（原代細(xì)胞分間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基（臍帶-凍存細(xì)胞及高代數(shù)細(xì)胞傳代）**于臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞傳代培養(yǎng)和復(fù)蘇細(xì)胞的傳代培養(yǎng),，可穩(wěn)定傳代至20代間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基（臍帶—凍間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基（臍帶—原代細(xì)胞分離及種子庫(kù)構(gòu)建）既用于臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的原代分離，也可以用于種子庫(kù)構(gòu)建,?？煞€(wěn)定傳至10間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基（臍帶—原干細(xì)胞溫和消化酶專(zhuān)門(mén)用于干細(xì)胞的消化，包括臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,，脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞,，胚胎干細(xì)胞（ES）等。消化作用溫和,，對(duì)細(xì)胞的損干細(xì)胞溫和消化酶（100mL/瓶）脂肪**消化酶主要用于脂肪干細(xì)胞的分離,，作用溫和，對(duì)細(xì)胞損傷??；該產(chǎn)品無(wú)人源及動(dòng)物源組分,，適合臨床*物申報(bào)與生產(chǎn)。脂肪**消化酶友康NK細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基用于單個(gè)核細(xì)胞在體外向NK細(xì)胞的誘導(dǎo)及增值,。細(xì)胞數(shù)50-80億/2L,。MEM培養(yǎng)基含有多種必需的營(yíng)養(yǎng)成分和礦物質(zhì)。山東F12培養(yǎng)基產(chǎn)品介紹

無(wú)酚紅培養(yǎng)基在實(shí)驗(yàn)中減少了潛在毒性,。山東F12培養(yǎng)基產(chǎn)品介紹

    生產(chǎn)上一般采用冷水噴淋冷卻,，冷卻到40-50℃后，輸送到預(yù)先已經(jīng)**過(guò)的罐內(nèi),。（四）,、間歇**與連續(xù)**的比較1、歇**的***和缺點(diǎn)***是設(shè)備要求低,，不需另外設(shè)置加熱,、冷卻裝置；操作要求低,，適于手動(dòng)操作,，適合于小批量生產(chǎn)規(guī)模；適合于含有大量固體物質(zhì)的培養(yǎng)基的**,。缺點(diǎn)是培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較多,，**后培養(yǎng)基的質(zhì)量下降；需進(jìn)行反復(fù)的加熱和冷卻,，能耗較高,；不適合于大規(guī)模生產(chǎn)過(guò)程的**；發(fā)酵罐的利用率較低,。2,、連續(xù)**的***和缺點(diǎn)***是**溫度高，可減少培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失,；操作條件恒定,，**質(zhì)量穩(wěn)定；易于實(shí)現(xiàn)管道化和自控操作,；避免了復(fù)的加熱和冷卻,，提高了熱的利用率；發(fā)酵設(shè)備利用率高,。缺點(diǎn)是對(duì)設(shè)備的要求高，需另外設(shè)置加熱,、冷卻裝置,；操作較麻煩；染菌的機(jī)會(huì)較多,；不適合于含大量固體物料的**,；對(duì)蒸汽的要求高,。由此可見(jiàn)，無(wú)論在理論上或者在實(shí)踐上,，與間歇**過(guò)程相比,，連續(xù)**的***十分明顯。因此,，連續(xù)**越來(lái)越多地被用培養(yǎng)基的**,。山東F12培養(yǎng)基產(chǎn)品介紹