2-羥基乙胺可以促進磷脂酰乙醇胺細胞壁組分的合成，從而提高菌株增殖速率,，后期菌株增殖放緩,，以產(chǎn)酸為主，2-羥基乙胺還能夠作為陽離子表面活性劑,，使得細胞壁疏松,，提高細胞通透性，促進谷氨酸釋放到發(fā)酵液；cecl3稀土鹽能夠促進菌株增殖,，提高谷氨酸相關(guān)合成酶的活力,，提高谷氨酸的產(chǎn)量；但是過高的濃度會造成菌株增殖放緩和死亡,，谷氨酸產(chǎn)量相應下降,；發(fā)酵中后期，菌株增殖速度放緩,，以產(chǎn)酸為主,，殼聚糖上的氨基與**細胞壁中帶負電荷的磷壁酸或脂多糖結(jié)合，并螯合mg2+,、ca2+等陽離子,從而改變細胞壁的通透性,，促進谷氨酸分泌到胞外。發(fā)酵培養(yǎng)基中添加了琥珀酸,，三羧酸循環(huán)有一定促進作用,，而對乙醛酸循環(huán)途徑具有**作用，從而導致中間代謝物更多地流向三羧酸循環(huán)途徑,，進而促進谷氨酸產(chǎn)量的增加,。說明書附圖圖1：cecl3稀土鹽對菌體濃度的影響；圖2：cecl3稀土鹽對谷氨酸含量的影響,；圖3：2-羥基乙胺對菌體濃度的影響,；圖4：2-羥基乙胺對谷氨酸含量的影響；圖5：2-羥基乙胺對糖酸轉(zhuǎn)化率的影響,。具體實施方式為了使本技術(shù)領(lǐng)域：的人員更好地理解本申請中的技術(shù)方案，下面將結(jié)合本申請具體實施例,，對本申請的技術(shù)方案進行清楚,、完整地描述，顯然,。減血清培養(yǎng)基減少了血清成分的變異性,。天津MEM培養(yǎng)基一般多少錢

    nh4)2so4264mg、nh4h2po4288mg,、mgso4·7h2o370mg,、cacl2332mg、mnso4·h2o15mg,、znso4·7h2o4mg,、h3bo33mg、cocl2·,、cuso4·,、na2moo4·、nafeedta37mg、肌醇100mg,、煙酸2mg,、鹽酸硫胺素7mg、鹽酸吡哆醇1mg,、甘氨酸2mg,。本發(fā)明廣適性植物**1/2培養(yǎng)基，其每1000ml培養(yǎng)基中含有：kno31331mg,、(nh4)2so4132mg,、nh4h2po4144mg、mgso4·7h2o185mg,、cacl2166mg,、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg,、h3bo33mg,、cocl2·、cuso4·,、na2moo4·,、nafeedta37mg、肌醇100mg,、煙酸2mg,、鹽酸硫胺素7mg、鹽酸吡哆醇1mg,、甘氨酸2mg,。本發(fā)明的有益效果：1、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基,，其能***應用于多種植物**培養(yǎng),，培養(yǎng)效果與ms培養(yǎng)基相當或優(yōu)于ms培養(yǎng)基，可規(guī)?；茝V使用,。2、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基,，其在不新增加易制爆試劑種類的情況下,，去除了現(xiàn)有培養(yǎng)基中含有的市場禁止流通的易制爆試劑nh4no3，不*消除了培養(yǎng)基的安全**,，也便于培養(yǎng)基的購買,、儲存及管理。3,、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基,，其配方用適量的(nh4)2so4和nh4h2po4取代nh4no3及kh2po4,，該替換減少的鉀離子和硝態(tài)氮通過適當增加kno3成分來補充，并且適當提高鉀離子含量,，可促進植物發(fā)芽,，有利于維管束、纖維**以及胚的發(fā)育,。河南DMEM/F12培養(yǎng)基無酚紅培養(yǎng)基在細胞實驗中減少了干擾因素,。

    平衡鹽溶液（balancedsaltsolution，BSS）簡稱鹽溶液,，集緩沖液的緩沖能力,、生理鹽水的等滲性以及培養(yǎng)液的營養(yǎng)供應特點于一體，兼具維持滲透壓,、緩沖和調(diào)節(jié)溶液的酸堿度,、同時供給細胞生存所必需的能量和無機離子成分的作用。各種BSS的緩沖系統(tǒng)有所不同,，其中以Hank’s液和Earle’s液為例,，它們主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在Earle’s(g/L)中比在Hank’s(g/L)中高。碳酸氫鈉需用高水平的CO2平衡,，以維持溶液的pH值,。Eagles液在空氣水平的CO2中，溶液會變堿,，Hank’s液在CO2培養(yǎng)箱中會變酸,。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存**，需要用Earle’s液,，,。如果**是清洗將要在細胞培養(yǎng)基中儲存的**，用Hank’s液就可以了,。表3-1幾種常用的平衡鹽溶液配方（g/L）一些BSS含有的Ca2+,、Mg2+是細胞膜的重要組成成分，同時參與許多重要的細胞功能活動,。但它們有使細胞凝集的作用，在配制分散細胞的消化液和特殊用途的細胞洗滌時,，宜采用Ca2+,、Mg2+含量較低的Dulbecco液或無Ca2+、Mg2+的D-Hanks液,，或者PBS液,。概述基礎(chǔ)細胞培養(yǎng)基主要包括199、MEM,、RPMI-1640,、DMEM,、DMEM/F12等。主要成分是氨基酸,、維生素,、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助物質(zhì),。

    二氧化碳不斷被釋放,，培養(yǎng)液變酸，pH值發(fā)生變化,。酚紅是細胞培養(yǎng)基中**常用的pH指示劑,，但依靠細胞培養(yǎng)基中的酚紅等pH指示劑進行判斷，需要實驗員的經(jīng)驗積累,，存在較大的主觀性,。實際上，個性化細胞培養(yǎng)基或是無血清細胞培養(yǎng)基中酚紅含量較少或是不含酚紅,，只能通過pH計或者pH電極進行pH值的檢測,，結(jié)果更為準確可靠。緩沖能力細胞培養(yǎng)基應具有一定的緩沖能力,。細胞培養(yǎng)過程中造成細胞培養(yǎng)液pH波動的主要物質(zhì)是細胞代謝產(chǎn)生的CO2,。在封閉式培養(yǎng)過程中CO2與水結(jié)合產(chǎn)生碳酸，細胞培養(yǎng)液pH很快下降,；打開培養(yǎng)器具時CO2逸出則會引起pH升高,。細胞培養(yǎng)基通常采用NaHCO3-CO2緩沖系統(tǒng)，按下列化學反應方程式調(diào)節(jié)細胞培養(yǎng)基的pH值：H2O+CO2→H2CO3?H++HCO3－NaHCO3?Na++HCO3－此外,，還有緩沖能力較高的磷酸鹽緩沖系統(tǒng),。但碳酸鹽緩沖系統(tǒng)的細胞毒性小、成本低,，在細胞培養(yǎng)中應用得更為***,。另一種較為常用的緩沖液是HEPES（羥乙基哌嗪乙硫磺酸）液，它是一種非離子兩性緩沖液,，在pH~,。高濃度的HEPES可能對細胞**性作用，細胞培養(yǎng)時HEPES的添加濃度一般為10～25mmol/L,。滲透壓細胞必須生活在等滲的環(huán)境中,，大多數(shù)體外培養(yǎng)的細胞對滲透壓有一定耐受性。研究顯示,。無酚紅培養(yǎng)基確保了細胞實驗結(jié)果的準確性,。

    1)、初代培養(yǎng)：繡球外植體,，將葉片剪去,，自來水沖洗干凈,。在超凈工作臺上把已經(jīng)沖洗干凈的外植體浸入75％酒精中消毒30s，用無菌水沖洗3～4次,。使用白貓漂白水和無菌水按1：4的體積比配制消毒液,，將外植體放入消毒液浸泡40min，其中白貓漂白水為上海白貓(集團)有限公司生產(chǎn)的“白貓”牌家用漂白水,。消毒完成,，將外植體接種到誘導培養(yǎng)基中培養(yǎng)，建立無菌再生系統(tǒng),，誘導培養(yǎng)環(huán)境為光照強度1500lx條件下,，溫度25℃，光照時間16h,；黑暗條件下,，溫度23℃，光照時間8h,，培養(yǎng)6～8周,。其中誘導培養(yǎng)基為ms+～～，誘導培養(yǎng)基的ph值為,。(2),、繼代培養(yǎng)：以建立的無菌再生系統(tǒng)為對象，將無菌外植體轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基,，其中增殖培養(yǎng)基為ms+～～,，培養(yǎng)環(huán)境為光照強度1500lx條件下，溫度25℃,，光照時間16h,；黑暗條件下，溫度23℃,，光照時間8h,，培養(yǎng)8～12周。每隔8～12周轉(zhuǎn)接入新的增殖培養(yǎng)基,，增殖培養(yǎng)基的ph值為,。(3)、生根培養(yǎng)：經(jīng)過繼代培養(yǎng)的繡球組培苗,，取2～3cm的頂芽,，放入生根培養(yǎng)基，其中生根培養(yǎng)基為1/2ms+～～,，生根培養(yǎng)基的ph值為。誘導培養(yǎng)環(huán)境為光照強度1500lx條件下,，溫度25℃,，光照時間16h,；黑暗條件下，溫度23℃,，光照時間8h,，培養(yǎng)8～12周。,。RPMI1640培養(yǎng)基在免疫細胞培養(yǎng)中表現(xiàn)出色,。安徽DMEM/F12培養(yǎng)基供應商

DMEM培養(yǎng)基提供了適宜的pH值和滲透壓。天津MEM培養(yǎng)基一般多少錢

    擬南芥根愈傷**誘導時,，培養(yǎng)6-9d在切口處開始出現(xiàn)少量顆粒狀愈傷**,，培養(yǎng)20-22d獲得淡黃色松脆型愈傷**，在愈傷**周圍觀察到大量致密分布的白毛,，顆粒狀愈傷**誘導率及愈傷**總誘導率均為100％,。如圖5所示。培養(yǎng)實例5和對比培養(yǎng)例5的誘導結(jié)果比較：用上述方法進行哥倫比亞擬南芥葉片和根愈傷**誘導時,，cs誘導培養(yǎng)基與ms誘導培養(yǎng)基的顆粒狀愈傷**誘導率及愈傷**總誘導率均為100％,，但cs誘導培養(yǎng)基的愈傷**出愈時間比ms誘導培養(yǎng)基提前至少1d；在相同培養(yǎng)條件下,，與ms誘導培養(yǎng)基相比,，經(jīng)cs誘導培養(yǎng)基誘導的葉片團塊狀愈傷**更大、誘導的根愈傷**更多,。如圖5所示,。培養(yǎng)實例6：本氏***葉片及根愈傷**誘導培養(yǎng)實例6與培養(yǎng)實例5不同的地方在于，步驟(1)將,；步驟(2)將2,,；步驟(3)所取葉片為本氏***無菌苗葉片，用手術(shù)剪刀將無菌葉片剪成,，用鑷子將其平鋪于誘導培養(yǎng)基,；步驟(4)所取根為本氏***無菌苗的根，cs誘導培養(yǎng)基的誘導結(jié)果為：本氏***葉片愈傷**誘導時,，培養(yǎng)15-18d的葉片明顯增大增厚,，葉片四周產(chǎn)生大量的淡綠色致密的愈傷**，愈傷**誘導率為100％,，且在愈傷**團塊上已開始產(chǎn)生多個嫩綠色的不定芽,；本氏***根愈傷**誘導時，培養(yǎng)9-11d在切口處產(chǎn)生大量淡黃色致密的愈傷**,。天津MEM培養(yǎng)基一般多少錢